聯(lián)用酶聯(lián)免疫法、免疫熒光法和散射比濁法檢測不同時期系統(tǒng)性紅斑狼瘡的效果研究

何 麗

(合江縣人民醫(yī)院，四川 瀘州 646200)

系統(tǒng)性紅斑狼瘡是患者自身結(jié)締組織發(fā)生免疫性、炎癥性病變的一種疾病。此病患者多為青年女性[1-2]。目前，此病的發(fā)病原因尚不明確，可能與患者的身體存在感染、內(nèi)分泌紊亂、免疫系統(tǒng)功能障礙及其遺傳因素等有關[3]。此病患者的臨床表現(xiàn)較多，也可出現(xiàn)多個系統(tǒng)功能的癥狀。對此類患者的病情進行診斷易發(fā)生誤診。對系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者進行免疫學檢測其抗ds-DNA抗體、抗Sm抗體均為陽性。這兩種抗體是系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者發(fā)生病變的標志性抗體。但此類患者的抗ds-DNA抗體、抗Sm抗體的陽性檢出率均較低。通過檢測這兩種抗體也不能判斷出系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者病情的分期。為了提高對系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的病情進行診斷的確診率、明確其病情的分期，可使用散射比濁法對其體內(nèi)補體C3的水平、補體C4的水平進行檢測。補體C3、補體C4是對系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的病情進行補充檢測的有效指標，對其進行這兩種檢測不僅可明確系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者病情的分期，也可有效地顯示出患者進行治療和護理的效果，進而可有效改善患者的預后。本研究主要是探討聯(lián)用酶聯(lián)免疫法、免疫熒光法和散射比濁法檢測不同時期系統(tǒng)性紅斑狼瘡的臨床效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本文的研究對象為2016年1月至2017年9月期間合江縣人民醫(yī)院收治的86例系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者和同期進行健康體檢的43例健康人。將43例健康人作為對照組。將43例活動期系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者作為觀察Ⅰ組，將43例非活動期系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者作為觀察Ⅱ組。在對照組受檢者中，有男6例，女37例；其年齡為21～56歲，平均年齡為(37.07±5.13)歲。在觀察Ⅰ組受檢者中，有男6例，女37例；其年齡為22～54歲，平均年齡為(37.13±5.12)歲。在觀察Ⅱ組受檢者中，有男5例，女38例；其年齡為21～55歲，平均年齡為(36.97±5.15)歲。三組研究對象的一般資料相比，P＞0.05，具有可比性。

1.2 納入標準及其排除標準

觀察Ⅰ組受檢者和觀察Ⅱ組受檢者的病情符合系統(tǒng)性紅斑狼瘡的診斷標準，并被確診；這些患者均簽署了自愿參與本次研究的知情同意書。這些患者的排除標準是：未患有尿毒癥等其他影響其腎臟健康的疾??；不存在心、脾等其他臟器的器質(zhì)性損傷；未患有血液病。

1.3 方法

對三組受檢者均使用酶聯(lián)免疫法、免疫熒光法和散射比濁法進行檢測。具體的方法是：1)取血：⑴在清晨空腹的狀態(tài)下，抽取受檢者5 ml的靜脈血作為血液標本。將其血液標本裝入無菌干燥的試管中。⑵在采集血液標本30 min后，對血液標本進行離心處理。將離心機的轉(zhuǎn)速設為3000 r/min，將離心的時間設為10 min。⑶分離血清后，在確認血液標本沒有高脂血與溶血后，?。?50 μL的血液標本，將其放置于-30℃的冰箱中保存、待測。2)使用酶聯(lián)免疫法對血液標本中的抗ds-DNA抗體進行檢測。進行此項檢測需使用抗雙鏈DNA抗體檢測試劑盒(生產(chǎn)企業(yè)為北京利米生物科技有限公司，批準文號為京械注準20162400068)。3)使用免疫熒光法對血液標本中的抗Sm抗體進行檢測。進行此項檢測需使用抗核抗體譜檢測試劑盒(生產(chǎn)企業(yè)為Zeus Scientific,Inc，批準文號為國械注進20162404949)和特定的試劑。4)使用散射比濁法對血液標本中補體C3的水平、補體C4的水平進行檢測。進行此項檢測需使用H760型號的全自動特定蛋白分析儀(生產(chǎn)企業(yè)為深圳市希萊恒醫(yī)用電子有限公司，批準文號為粵械注準20152400252)和特定的試劑。5)本次研究需使用熒光顯微鏡[生產(chǎn)企業(yè)為歐蒙醫(yī)學實驗診斷股份公司(EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG)，批準文號為國械注進20162222960]和特定的抗體參照物(生產(chǎn)企業(yè)為上海恒遠生物科技有限公司)。本次研究中的各項檢測均嚴格按照操作說明書進行規(guī)范操作。

1.4 觀察指標

觀察并記錄三組受檢者抗ds-DNA抗體的陽性檢出率、抗Sm抗體的陽性檢出率、補體C3的水平及補體C4的水平。

1.5 統(tǒng)計學方法

將本次研究中的數(shù)據(jù)錄入到SPSS21.0統(tǒng)計軟件中進行分析處理，計量資料用()表示，采用t檢驗，計數(shù)資料以%表示，采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 三組受檢者抗ds-DNA抗體的陽性檢出率、抗Sm抗體的陽性檢出率的比較

與對照組受檢者相比，觀察組受檢者抗ds-DNA抗體的陽性檢出率、抗Sm抗體的陽性檢出率均更高，P＜0.05。與觀察Ⅱ組受檢者相比，觀察Ⅰ組受檢者抗ds-DNA抗體的陽性檢出率、抗Sm抗體的陽性檢出率均更高，P＜0.05。詳情見表1。

表1 三組受檢者抗ds-DNA抗體的陽性檢出率、抗Sm抗體的陽性檢出率的比較[n(%)]

2.2 三組受檢者補體C3的水平、補體C4水平的比較

觀察Ⅱ組受檢者與對照組受檢者補體C3的水平、補體C4的水平相比，P＞0.05。與對照組受檢者、觀察Ⅱ組受檢者相比，觀察Ⅰ組受檢者補體C3的水平、補體C4的水平均更低，P＜0.05。詳情見表2。

表2 三組受檢者補體C3的水平、補體C4水平的比較(g/L ，)

表2 三組受檢者補體C3的水平、補體C4水平的比較(g/L ，)

注：*與觀察Ⅱ組相比，P＜0.05；t1值、P1值表示觀察Ⅰ組與對照組相比；t2值、P2值表示觀察Ⅱ組與對照組相比。

指標 觀察Ⅰ組 觀察Ⅱ組 對照組 t1值 P1值 t2值 P2值例數(shù) 43 43 43補體C3的水平 0.61±0.15* 0.88±0.09 0.94±0.18 9.236 0.001 1.955 0.054補體C4水平 0.26±0.05* 0.86±0.11 0.92±0.17 24.424 0.001 1.943 0.055

3 討論

系統(tǒng)性紅斑狼瘡是臨床上常見的一種全身性疾病。有學者認為，此病的病因多與環(huán)境因素、遺傳因素及體內(nèi)的激素分泌因素等有關。此病患者以出現(xiàn)發(fā)熱、出現(xiàn)蝶形紅斑、關節(jié)疼痛及體重下降等為主要的臨床表現(xiàn)[5]。按照其病程的進展可將此病患者分為早期系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者和晚期系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者。早期系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的臨床癥狀可自行消退，數(shù)月后便可消失。晚期系統(tǒng)性紅斑狼瘡多會累及患者的皮膚黏膜、肌肉、骨骼及中樞神經(jīng)系統(tǒng)等，嚴重的還會累及其心、肺、腎等其他的臟器組織。對此病患者進行抗ds-DNA抗體、抗Sm抗體檢測是診斷其是否患有系統(tǒng)性紅斑狼瘡的主要方法?？筪s-DNA抗體、抗Sm抗體是臨床上公認的系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者發(fā)生病變的標志性抗體。系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者體內(nèi)抗ds-DNA抗體的滴度越高，表示其腎臟的受損程度及其系統(tǒng)性紅斑狼瘡的病情越嚴重。系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者體內(nèi)抗Sm抗體的滴度與其病情是否處于活動期無關。檢測患者的抗Sm抗體只可輔助診斷其是否患有系統(tǒng)性紅斑狼瘡。為了提高對系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的病情進行診斷的確診率、明確其病情的分期，可對患者體內(nèi)補體C3的水平、補體C4的水平進行檢測。健康人體內(nèi)補體C3的水平、補體C4的水平均在0.8～1.2 g/L之間。系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者在發(fā)病初期，其體內(nèi)補體C3的水平、補體C4的水平幾乎不會發(fā)生改變。當患者的病情惡化后，其體內(nèi)補體C3的水平、補體C4的水平會急速下降，且其回升的速度較慢。在患者的病情得到有效的緩解和控制后，其體內(nèi)補體C3的水平、補體C4的水平會逐漸升高，直至恢復至正常水平。因此，可通過檢測患者體內(nèi)補體C3的水平、補體C4的水平明確其病情的分期情況。本次研究的結(jié)果顯示，聯(lián)用酶聯(lián)免疫法、免疫熒光法和散射比濁法檢測不同時期系統(tǒng)性紅斑狼瘡的效果顯著。