劉 娟 陳科潔 彭贊平 李登科 吳端生

(1. 南華大學(xué)藥學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院，衡陽(yáng) 421001)(2. 岳陽(yáng)市婦幼保健院，岳陽(yáng) 414000)(3.南華大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部，衡陽(yáng) 421001)

實(shí)驗(yàn)紅鯽是由南華大學(xué)吳端生等[1]將池塘養(yǎng)殖紅鯽，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室馴化并按照實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化要求培育而成，近交品系有實(shí)驗(yàn)紅鯽C1HD系，封閉群品種有實(shí)驗(yàn)紅鯽HN:CARV1。實(shí)驗(yàn)紅鯽體色全紅，身體側(cè)扁，呈紡錘形，全鱗，口端位，無(wú)須，單尾。實(shí)驗(yàn)紅鯽具有性成熟早、繁殖力強(qiáng)、生活力強(qiáng)、體型適當(dāng)、雜食性等許多作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的優(yōu)點(diǎn)，已被廣泛地應(yīng)用于遺傳學(xué)、生理學(xué)、毒理學(xué)等實(shí)驗(yàn)研究，特別適用于水產(chǎn)動(dòng)物疾病模型、漁藥研發(fā)、水生態(tài)環(huán)境安全性評(píng)價(jià)等。

作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或模式動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)紅鯽，必需在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的水族箱中飼養(yǎng)繁殖[2]。這些年來(lái)，本實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過(guò)反復(fù)的養(yǎng)殖實(shí)踐，建立了一套有效的實(shí)驗(yàn)紅鯽水族箱飼養(yǎng)技術(shù)，本文予以歸納總結(jié)，以供有關(guān)實(shí)驗(yàn)室參考。

1 水族箱、用具及藥品準(zhǔn)備

1.1 水族箱

水族箱是實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行實(shí)驗(yàn)魚(yú)飼養(yǎng)的理想設(shè)施。水族箱可簡(jiǎn)單到只飼養(yǎng)一條魚(yú)的小魚(yú)缸，復(fù)雜到具備各種配套設(shè)施的生態(tài)仿真水族箱。目前市售的水族箱，其形狀、大小各式各樣，可以根據(jù)室內(nèi)面積大小、室內(nèi)陳設(shè)及飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)紅鯽的規(guī)模等不同情況來(lái)選用。通常選擇長(zhǎng)方形的水族箱，大小以滿足實(shí)驗(yàn)紅鯽自由游泳的基本活動(dòng)空間，并有利于在水族箱內(nèi)種植水草、放置底石等點(diǎn)綴，且便于換水、搬運(yùn)、結(jié)實(shí)又不易破損為宜。水族箱最好是雙倍式的，即長(zhǎng)度為深度或者是寬度的二倍，例如采用長(zhǎng)×寬×高大約為1 200 mm×480 mm×755 mm規(guī)格的水簇箱飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)紅鯽就比較合適(圖1)。市面上銷售的斑馬魚(yú)養(yǎng)殖系統(tǒng)，經(jīng)改裝后也可用于實(shí)驗(yàn)紅鯽的飼養(yǎng)。市售水族箱商品，通常配置有照明設(shè)施、過(guò)濾設(shè)施、控溫設(shè)施、增氧設(shè)施、抽水等設(shè)施。

1.2 用具

常用飼養(yǎng)工具包括抽水機(jī)、空氣泵(增氧泵)、潛水泵、過(guò)濾器、照明燈、加溫器、水溫計(jì)、魚(yú)盆、水桶、魚(yú)簍、(大小)撈網(wǎng)、撈兜、撈勺、水管、氧氣袋、刷子等?？筛鶕?jù)實(shí)際需要量進(jìn)行準(zhǔn)備。

1.3 藥品

常用消毒和疾病防治的藥品有高錳酸鉀(KMnO4)、硫酸銅(CuSO4)、食鹽(NaCl)、漂白粉、新潔爾滅等。

2 水質(zhì)與環(huán)境要求

水族箱的小環(huán)境因素，包括水質(zhì)、溫度、光照、噪聲、震動(dòng)等。理想的水族箱，應(yīng)該是水族箱的小環(huán)境與魚(yú)自然棲息環(huán)境保持一致，實(shí)驗(yàn)魚(yú)的生理和行為活動(dòng)不受限制，包括攝食、游泳、姿態(tài)調(diào)整、群居等[3]。

2.1 水溫

實(shí)驗(yàn)紅鯽在溫度為0～39 ℃的水體中均能生存，但最適宜水溫為18～26 ℃。實(shí)驗(yàn)紅鯽在此溫度范圍內(nèi)，新陳代謝旺盛，生長(zhǎng)發(fā)育良好，不易得?。蝗绻疁赝蝗簧仙蛳陆?，幅度超過(guò)7～8℃則易得病[2]。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)水族箱飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)紅鯽的水溫應(yīng)該保持在18～24 ℃為宜，晝夜溫差≤4 ℃，瞬時(shí)溫差≤3 ℃。

2.2 光照

光照的長(zhǎng)短對(duì)性腺分泌激素有關(guān)，應(yīng)適量增加光照時(shí)間。光照還可以刺激魚(yú)體表色素細(xì)胞，有利于加快變色和出現(xiàn)鮮艷光澤。水族箱中實(shí)驗(yàn)紅鯽晝夜明暗交替時(shí)間以14/10 或12/12為宜，光照強(qiáng)度宜在100～200lx。

2.3 溶解氧

水體中的溶解氧是實(shí)驗(yàn)紅鯽賴以生存的必要條件。低于2 mg/L，實(shí)驗(yàn)紅鯽常因水體缺氧而到水面呼吸，稱之為“浮頭”。氧氣溶解量隨水溫的升高而減少。水族箱飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)紅鯽用的多為靜水，溶解的氧氣含量應(yīng)保持在≥6 mg/L的水平。

2.4 二氧化碳

水族箱中的二氧化碳主要來(lái)源于魚(yú)體的排泄物和呼吸作用。水體中二氧化碳含量偏高時(shí)，會(huì)降低魚(yú)體內(nèi)血紅蛋白與氧的結(jié)合能力，發(fā)生呼吸困難。水體中二氧化碳的含量達(dá)60 mg/L以上時(shí)，會(huì)產(chǎn)生中毒的現(xiàn)象。應(yīng)及時(shí)把水體中魚(yú)的糞便、殘餌等污物吸出，并適時(shí)適量補(bǔ)充新水，使水族箱中游離二氧化碳含量保持在適宜生長(zhǎng)的閾值內(nèi)。

2.5 酸堿度

水質(zhì)酸堿度在pH6.5～8.5，符合淡水養(yǎng)魚(yú)的水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)。pH值低于5.5時(shí)，魚(yú)類對(duì)傳染性疾病特別敏感；當(dāng)pH值大于9.5～10或小于4～5時(shí)，會(huì)直接造成魚(yú)的死亡。實(shí)驗(yàn)紅鯽在pH5.5～9.5都能生存，以pH7.5～8.5為最適范圍。

2.6 硬度

水的硬度主要由鈣(Ca2+)、鎂(Mg2+)離子的含量決定。適宜范圍的硬度，有調(diào)節(jié)和穩(wěn)定水質(zhì)的作用。對(duì)于實(shí)驗(yàn)紅鯽，飼養(yǎng)水的硬度以水體碳酸鈣(CaCO3)的濃度為95～105 mg/L左右為宜。

2.7 氯氣

城市生活飲用自來(lái)水往往用氯氣作為消毒劑，使得自來(lái)水中殘留有一定濃度的氯，要注意氯對(duì)魚(yú)體的毒害作用。必須先將自來(lái)水中的殘余氯排除，才能作為飼養(yǎng)水使用。排除水中余氯的方法有很多種，通常將自來(lái)水儲(chǔ)存靜置3～4 d，氯氣便自行揮發(fā)除去。

2.8 氨

水體中的氨主要來(lái)源于魚(yú)類排泄物、食物殘?jiān)群袡C(jī)物的分解作用產(chǎn)生。水中氨(NH3)的濃度對(duì)實(shí)驗(yàn)紅鯽的安全值為0.02 mg/L。及時(shí)清除水中糞便、殘餌等污物，就不會(huì)造成實(shí)驗(yàn)紅鯽氨中毒現(xiàn)象。

2.9 生態(tài)布景

實(shí)驗(yàn)室水族箱生態(tài)布景的原則主要是適應(yīng)實(shí)驗(yàn)紅鯽的生活習(xí)性和滿足實(shí)驗(yàn)紅鯽的福利要求。其主要環(huán)節(jié)包括鋪沙、植草和造景筑巢，作用是模擬池塘生境，最大可能體現(xiàn)出大自然景觀，并提供實(shí)驗(yàn)魚(yú)的藏身和繁殖的環(huán)境條件(圖1)。

圖1 水族箱

箱底可鋪設(shè)土色或黃褐色的砂礫或卵石，砂礫不宜太細(xì)、太粗糙或尖銳，厚度因水族箱大小而定，大的水族箱，鋪設(shè)的底沙可厚些。

水族箱的造景筑巢有三個(gè)主要的內(nèi)容：一是構(gòu)筑實(shí)驗(yàn)紅鯽藏身或隱身的棲息洞穴或水草叢，二是構(gòu)筑實(shí)驗(yàn)紅鯽產(chǎn)卵孵化巢，三是鋪設(shè)池塘模擬生態(tài)景觀?？刹捎檬瘔K、樹(shù)樁、陶瓷等便于消毒滅菌的材料。

3 飼料的準(zhǔn)備

3.1 營(yíng)養(yǎng)需求

實(shí)驗(yàn)紅鯽的營(yíng)養(yǎng)需要是指對(duì)蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、礦物質(zhì)和維生素等營(yíng)養(yǎng)素的需要量，包括維持營(yíng)養(yǎng)需要和生產(chǎn)(生長(zhǎng)、繁殖)營(yíng)養(yǎng)需要。

實(shí)驗(yàn)紅鯽對(duì)飼料蛋白質(zhì)的需求量為25%～35%，對(duì)脂肪的需要量，一般在5%～7%，對(duì)碳水化合物的需要量一般在40%左右，粗灰分在10%左右。實(shí)驗(yàn)紅鯽必需的礦物元素有10多種，對(duì)維生素的需要量很少，卻必須由飼料供給。

實(shí)驗(yàn)紅鯽每千克配合飼料的總能，應(yīng)不低于12 530 kJ，飼料能量·蛋白比約為33～50 kJ/g蛋白質(zhì)。

3.2 飼料配方

根據(jù)實(shí)驗(yàn)紅鯽不同生長(zhǎng)階段對(duì)營(yíng)養(yǎng)的需要，將多種飼料按比例科學(xué)地配制成均勻的混合物，一般制成顆粒飼料?？梢贼~(yú)粉、豆粕、麩皮等為原料，按粗蛋白、粗脂肪、粗纖維、粗灰分分別為32、6、6、10左右的百分比進(jìn)行全價(jià)顆粒飼料配制。制成的飼料顆粒應(yīng)具有不低于15 min的水中穩(wěn)定性，膨化飼料更佳。

3.3 飼料質(zhì)量要求

成品飼料應(yīng)放在通風(fēng)、清潔、干燥的專用倉(cāng)庫(kù)內(nèi)存放，常溫下保質(zhì)期不宜超過(guò)3個(gè)月。配合飼料應(yīng)混合均勻，新鮮、無(wú)雜質(zhì)、無(wú)異味、無(wú)霉變、無(wú)發(fā)酵、無(wú)蟲(chóng)蛀及鼠咬。飼料的營(yíng)養(yǎng)成分和顆粒的長(zhǎng)度、粒徑、粉化率和硬度、衛(wèi)生指標(biāo)等指標(biāo)應(yīng)符合標(biāo)準(zhǔn)。

4 實(shí)驗(yàn)紅鯽的準(zhǔn)備

4.1 種魚(yú)的質(zhì)量

作為種用的實(shí)驗(yàn)紅鯽的質(zhì)量應(yīng)符合實(shí)驗(yàn)紅鯽遺傳質(zhì)量和微生物學(xué)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[4]，為體格健壯的2年齡魚(yú)，且具備較強(qiáng)的繁殖能力和生活力。

4.2 實(shí)驗(yàn)魚(yú)的選擇

科學(xué)實(shí)驗(yàn)選用于水族箱養(yǎng)殖的實(shí)驗(yàn)紅鯽應(yīng)滿足以下基本條件：一是遺傳質(zhì)量合格，包括體色、體型和體質(zhì)均一；二是體格健康，無(wú)特定病原體感染；三是滿足實(shí)驗(yàn)要求，包括年齡、體質(zhì)量及模型性狀均符合實(shí)驗(yàn)要求。應(yīng)來(lái)源于具有實(shí)驗(yàn)紅鯽繁殖生產(chǎn)許可證的機(jī)構(gòu)，并索取完整的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物背景資料。

4.3 實(shí)驗(yàn)魚(yú)的運(yùn)輸

購(gòu)入的實(shí)驗(yàn)紅鯽，可用氧氣袋充氧來(lái)進(jìn)行活體運(yùn)輸。具體操作方法：就1～2年齡魚(yú)而言,按魚(yú)∶水∶氧氣為1∶1∶4的體積比例，給氧氣袋加入清潔水和實(shí)驗(yàn)紅鯽，然后擠壓出袋內(nèi)空氣，再以氧氣瓶向氧氣袋灌入氧氣至氧氣袋膨脹，立即用橡皮筋扎緊袋口，最后將裝載有實(shí)驗(yàn)紅鯽的氧氣袋置于瓦楞紙箱或木箱內(nèi)，用膠帶紙封好箱即可。以15 h內(nèi)到達(dá)目的地為宜。

5 日常飼養(yǎng)管理

5.1 設(shè)施、用具準(zhǔn)備及環(huán)境調(diào)控

使用水族箱飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)紅鯽時(shí)，首先用自來(lái)水將水族箱洗刷干凈，然后用20 mg/L的KMnO4或10%的食鹽水浸泡1 h以上用于滅菌，放盡KMnO4或食鹽水，再按2.9所述做好生態(tài)布景(所有布景材料均用20 mg/L的KMnO4浸泡消毒過(guò))，最后往水族箱中注入曝氣3 d后的自來(lái)水，至適度水深。

再配置經(jīng)20 mg/L的KMnO4浸泡消毒過(guò)的各種飼養(yǎng)用具。

各種設(shè)施與用具準(zhǔn)備齊備以后，按2所述調(diào)控好光照、水溫等環(huán)境因素，并調(diào)節(jié)好增氧泵、過(guò)濾器、晝夜節(jié)律照明定時(shí)開(kāi)關(guān)、加溫棒、空調(diào)器等設(shè)備并保持正常遠(yuǎn)轉(zhuǎn)。

5.2 飼養(yǎng)密度選擇

水族箱飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)紅鯽的飼養(yǎng)密度應(yīng)適度，可參照表1計(jì)算。飼養(yǎng)密度確定后，再將購(gòu)入或選擇好的實(shí)驗(yàn)紅鯽投放于水族箱中。

5.3 投喂飼料

實(shí)驗(yàn)紅鯽的日投飼率與實(shí)驗(yàn)紅鯽體質(zhì)量、水溫、水中溶氧及飼料配方有關(guān)，大約為體質(zhì)量的1%～5%。每箱實(shí)驗(yàn)紅鯽的日投飼量=平均尾重×尾數(shù)×投飼率。

表1 水族箱放養(yǎng)實(shí)驗(yàn)紅鯽的規(guī)格與密度[4]

實(shí)驗(yàn)紅鯽的飼料投喂，宜定時(shí)、定量，日投飼率約為魚(yú)體質(zhì)量的3%，每日投喂1～2次，投喂時(shí)間為上午9：00～10：00和下午16：30～17:30。對(duì)于0～3月齡的幼魚(yú)，可投喂煮熟的蛋黃，于每天上、下午各喂食1次，投喂量應(yīng)為實(shí)驗(yàn)紅鯽在1 h左右內(nèi)吃完為宜。對(duì)于5～10月齡的幼魚(yú)可投喂粒徑為0.1～0.5 mm的全價(jià)顆粒飼料，輔以蛋黃。對(duì)于10月齡以上的成魚(yú)則可投喂粒徑為0.5～1.5 mm的全價(jià)顆粒飼料，每天上午投喂1次或上、下午各投喂1次。

5.4 清污及換水

水族箱水質(zhì)顏色應(yīng)保持在淡綠色透亮。每3～7 d部分換水一次，14～21 d全部換水并清洗一次。每次換水量約為水體總量的1/3～1/5，換水時(shí)要從水族箱底部把糞便等渣滓一起吸去。因?yàn)樗逑渌疁氐募眲∽兓瘯?huì)造成魚(yú)死亡，所以換水時(shí)必須小心，要特別注意新水的溫度[5]。換得的新水的溫差不應(yīng)超過(guò)3 ℃，溫差超過(guò)7 ℃時(shí)實(shí)驗(yàn)紅鯽易得病。

每次換水時(shí)，要將水族箱箱體、水泵、過(guò)濾設(shè)施、水草、魚(yú)巢等清洗干凈、消毒。

5.5 衛(wèi)生清掃與消毒滅菌

每日工作完畢，將水族箱、實(shí)驗(yàn)臺(tái)板、地板等表面擦洗干凈，將用過(guò)的飼養(yǎng)用具全部徹底清洗干凈，并用20 mg/L的KMnO4或0.1%的新潔爾滅浸泡消毒，再用清水沖洗晾干，擺放整齊。

5.6 觀察、檢測(cè)與記錄

每日工作時(shí)，應(yīng)對(duì)所有水族箱進(jìn)行巡視觀察。觀察的內(nèi)容包括：水(室)溫、水質(zhì)、光照等是否正常，魚(yú)的行為是否異常，攝食情況是否正常，魚(yú)體傷、病害是否存在，有無(wú)魚(yú)死亡等，檢測(cè)溫度、光照、pH值、溶解氧等是否達(dá)標(biāo)，檢測(cè)水族箱(增氧泵、過(guò)濾器等)運(yùn)轉(zhuǎn)是否正常等。

做好環(huán)境因素、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容(如體質(zhì)量、體長(zhǎng)等)、飼料投喂(投喂時(shí)間、投喂量等)、飼養(yǎng)操作(換水、洗涮、消毒等)等的記錄，并建立實(shí)驗(yàn)魚(yú)、飼料、用具、藥品等消費(fèi)臺(tái)賬。

6 疾病防治

實(shí)驗(yàn)紅鯽對(duì)疾病的抵抗力較強(qiáng)，飼養(yǎng)得當(dāng)一般不會(huì)得病，但也要重視疾病的防治。疾病防治的原則是清除或減少設(shè)施內(nèi)病原，防控設(shè)施外病原入侵。主要措施有：①把好實(shí)驗(yàn)紅鯽來(lái)源關(guān)。購(gòu)買(mǎi)質(zhì)量合格的健壯的實(shí)驗(yàn)紅鯽飼養(yǎng)。②科學(xué)飼養(yǎng)管理。保持適宜的放養(yǎng)密度，做到勤觀察、勤清污，并適時(shí)換水與清洗、消毒，使用潔凈用具，謹(jǐn)慎操作勿傷魚(yú)，保持良好的水質(zhì)條件，投喂優(yōu)質(zhì)無(wú)污染的飼料。