琳 娜,席琳圖雅,劉 杰,青格勒,斯 琴,張志琴,斯琴巴特爾*
(1.內(nèi)蒙古錫林郭勒盟蒙醫(yī)醫(yī)院藥劑科,內(nèi)蒙古 錫林郭勒 026000;2.內(nèi)蒙古錫林郭勒盟蒙醫(yī)醫(yī)院,內(nèi)蒙古 錫林郭勒 026000)
狼毒在中醫(yī)記載中有著悠久的歷史,并且廣泛應(yīng)用于臨床治療中,取得了良好的效果,是有著較高研究價值的中藥[1]。但是一直以來中醫(yī)科混淆了大戟科狼毒和瑞香狼毒,不能完全了解其有效成分和藥理活性,因此使用較為混亂。為進一步準確分析內(nèi)蒙古錫林郭勒盟狼毒的有效成分及其藥理活性,本次研究選取乙醇超聲提取的大戟科狼毒和瑞香狼毒,現(xiàn)報道如下。
本文觀察對象選自乙醇超聲提取的大戟科狼毒和瑞香狼毒。其中狼毒均采集自內(nèi)蒙古錫林郭勒盟一帶草原。
提取狼毒素:首先將試驗所用狼毒根沖洗干凈,并切片晾干,用堿浸泡、過濾、濾液酸化至PH值2~3范圍,觀察到褐色沉淀后,將沉淀研磨成粉狀,通過乙醇提取兩次,合并兩次提取液,水浴中回收乙醚。膏狀物加無水吡啶,搖晃均勻,添加少許醋酸酐水浴回流10 min,置入20倍冰水中,過夜,看到褐色沉淀。沉淀經(jīng)歷鹽酸和冷水洗滌、堿溶解、過濾酸化等一系列環(huán)節(jié),使PH值在2~3范圍內(nèi),最后所得褐色沉淀,即狼毒有效成分粗品。
檢測有效成分為半萜內(nèi)蔭、二萜生物堿、二萜環(huán)氧內(nèi)酯、三萜苷及香豆素,7,10一十八二烯酸甲醋和十六碳酸乙酯、烷烴、烯烴和萜類等。首先抗菌實驗,取0.1 mg狼毒素,1 mL慶大霉素10倍稀釋液和無菌蒸餾水,通過用濾紙片法做抗菌試驗。菌種是大腸桿菌、沙門氏菌和克氏肺炎桿菌,從中選出抗菌效果最佳狼毒做動物實驗。其次在小白鼠毒性實驗中將提取出來的有效成分經(jīng)滅菌蒸餾水溶解,肌注小白鼠0.1 mg,持續(xù)3日,每日早晚兩次,肌注后觀察小白鼠的生活狀況和異常變化。
抗菌實驗結(jié)果顯示,黃酮類結(jié)構(gòu)物質(zhì)抗菌作用顯著,尤其是對克氏肺炎桿菌;小白鼠毒性實驗中注射狼毒素小白鼠體重增長明顯超過正常小鼠,未出現(xiàn)死亡、過敏等異常情況,相比白細胞減少慢,具有抗腫瘤、提高免疫損傷功能的效果。狼毒瑞香狼毒屬于雙氫雙黃酮類結(jié)構(gòu)的化合物,有效成分有倍半萜內(nèi)蔭、二萜生物堿、二萜環(huán)氧內(nèi)酯、三萜苷及香豆素等,大戟科狼毒有效成分為7,10一十八二烯酸甲醋和十六碳酸乙酯、烷烴、烯烴和萜類等,均具有抗菌、抗腫瘤、治療白血病和預(yù)防免疫缺陷的作用。
狼毒是一種有毒植物,內(nèi)蒙古錫林郭勒盟草原上分布了大量狼毒,但是對牲畜吸引力不大,事實上草場上狼毒種植量和載畜率兩者具有負相關(guān)關(guān)系,從某種意義上講,只有對狼毒植物不斷進行開發(fā)與合理利用,才能優(yōu)化天然草原資源[2]。但現(xiàn)實情況是內(nèi)蒙古錫林郭勒盟的大量狼毒沒有得到有效開發(fā),中藥材資源被嚴重荒廢,如果臨床研究加深對狼毒有效成分和藥理活性的認識,就能夠進一步發(fā)揮出狼毒抗菌、抗腫瘤、抗白血病等多種功效?,F(xiàn)階段關(guān)于內(nèi)蒙古狼毒有效成分與藥理活性研究的報道較少,其關(guān)鍵在于活性組分的提取和分離,醫(yī)學(xué)研究中應(yīng)將更多的精力投到研究高效低毒的提取與分離技術(shù)上[3],研究出提取無害活性化合物的方式,從狼毒中開發(fā)出有價值的抗病藥物。本次試驗檢測了狼毒的藥理性質(zhì),抑菌實驗表明對克氏肺炎桿菌抑制作用顯著,并且保護了小鼠白細胞,對白血病、腫瘤疾病都有著一定作用,但仍需臨床對狼毒結(jié)構(gòu)、特性和藥理學(xué)的進一步研究。
綜上所述,瑞香科狼毒和大戟科狼毒毒理及藥理藥效方面差異較大,只有明確狼毒的有效成分,掌握藥理活性,才能為臨床治療提供有效參考依據(jù)。