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(云南省德宏州瑞麗市弄島鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心 云南德宏678603)
1.1.1 青貯原料
中國南方玉米以及制糖區(qū)的玉米和甘蔗秸稈。
1.1.2 青貯添加劑
根據(jù)中國國標(biāo)中的規(guī)范,選用乳酸菌添加劑Chikuso-1(CH)和纖維素酶(AC)作為2種青儲飼料的添加劑。
1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
本次試驗(yàn)主要有4 個(gè)實(shí)驗(yàn)組分,分別是對照組、乳酸菌組、纖維素酶組、復(fù)合組,每組3個(gè)處理式樣。乳酸菌以每千克飼料5 mg的量進(jìn)行添加。纖維素酶以每千克飼料10 mg的量進(jìn)行添加。試劑都是噴霧噴灑添加,對照組噴灑等量蒸餾水[1]。
1.2.2 青貯調(diào)制
本文將收獲后的玉米以及甘蔗秸稈粉碎為1.5 cm 左右的小段,以新鮮樣品的質(zhì)量加入添加劑。每組8 kg樣品,裝入20 L的圓桶中青儲發(fā)酵,常溫、避光、密封、保濕保存2個(gè)月后,開桶檢測其對應(yīng)的發(fā)酵品質(zhì)。
1.2.3 微生物菌數(shù)的測量
在超凈工作臺進(jìn)行測樣,首先稱取20 g樣品粉碎,裝入三角瓶中,震蕩30 min,依次稀釋10~104倍,之后涂布到MRS培養(yǎng)基中、分為厭氧、有氧2組進(jìn)行培養(yǎng)然后計(jì)數(shù)。
1.2.4 青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)的測定
本實(shí)驗(yàn)在超凈臺中取青貯樣品20 g,加水搖勻,4℃靜置一天,之后測定其對應(yīng)濾液的pH值;同時(shí)我們還要利用分光光度法來檢測其對應(yīng)濾液中氨態(tài)氮的量;用HPLC法測定有機(jī)酸的量;同時(shí)我們還要利用烘箱測定其干物質(zhì)的量,并且還要進(jìn)一步的測定其粗蛋白質(zhì)、脂肪、中性洗滌纖維的量。
1.2.5 乳酸菌的形態(tài)、生理生化試驗(yàn)
我們將已經(jīng)分離的乳酸菌首先進(jìn)行革蘭氏染色以及其形態(tài)學(xué)特征的鑒定,初步的分離后就可以進(jìn)行一下實(shí)驗(yàn)。
(1)耐溫試驗(yàn) 我們將經(jīng)過實(shí)驗(yàn)分離的菌株接種到MRS液體培養(yǎng)基中,在不同的溫度梯度下恒溫培養(yǎng)72 h。培養(yǎng)結(jié)束后,再和無乳酸菌液體培養(yǎng)基比對其溶液的濁度來進(jìn)行相關(guān)的比較,檢測不同溫度對其生長的影響。
(2)耐酸試驗(yàn) 我們將分離得到的菌株按照不同的pH 梯度接種到其對應(yīng)的液體培養(yǎng)基中,30℃培養(yǎng)72 h。培養(yǎng)結(jié)束后,再和無菌的液體培養(yǎng)基比對其溶液的濁度來進(jìn)行相關(guān)的比較,觀察其生長情況[2]。
(3)發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)氣試驗(yàn) 將分離得到的乳酸菌單菌落按照國標(biāo)中的規(guī)定接種到玻璃試管中,在這其中提前加好杜氏小管,72 h后觀察其對應(yīng)的小管中有無氣泡,記錄結(jié)果。
2.1.1 化學(xué)成分
2種秸稈在青貯發(fā)酵前,我們首先取新鮮的2種秸稈樣品,按照國標(biāo)中的規(guī)定來測定其各種化學(xué)成分的對應(yīng)含量。這2種秸稈的風(fēng)干樣品種中其DM占比為42%、25 %;而其余的CP以及EE含量二者基本上沒有大的不同,同時(shí)二者數(shù)據(jù)無顯著性差異(p>0.05)。
2.1.2 微生物構(gòu)成
2種原料中的微生物種類繁多,經(jīng)過分類總結(jié)分析,以及對應(yīng)的菌種鑒定,其新鮮的秸稈中主要含有的菌種如下:乳酸菌和大腸桿菌都是5~6 cfu/g,好氧菌是8 cfu/g,酵母菌是6 cfu/g,霉菌是3.5 cfu/g。我們可以利用的主要菌種是植物乳桿菌、短乳桿菌、韋氏菌、嗜酸小球菌、乳桿菌等。
2.2.1 化學(xué)成分
2種秸稈在分組青貯2個(gè)月之后,其化學(xué)成分的變化還是不太顯著的,對于2種秸稈而言,實(shí)驗(yàn)組的CP含量和空白對照組差異不大(p>0.05)。實(shí)驗(yàn)組的NDF 含量和空白對照組差異也不明顯(p>0.05)。玉米和甘蔗的秸稈品質(zhì)相近,同時(shí)二者的青儲流程也可以相互參照,二者在青儲后的化學(xué)成分也是差異不大,我們通過與對照組的對比,就會發(fā)現(xiàn)青儲品質(zhì)最好的是AC這一復(fù)合處理組,且這2組的NDF含量與空白對照組差異顯著。
2.2.2 發(fā)酵品質(zhì)
2種秸稈青貯2個(gè)月之后,我們通過對比其對應(yīng)的pH值以及LA值可以發(fā)現(xiàn),玉米秸稈的變化不明顯,且各種發(fā)酵數(shù)據(jù)都是變化得沒有這么大,其對應(yīng)的秸稈品質(zhì)基本穩(wěn)定,而甘蔗秸稈實(shí)驗(yàn)組的pH值下降顯著,并且 LA含量也是要比空白對照組要高。
2.2.3 乳酸菌菌種構(gòu)成與生理生化指標(biāo)
我們還對得到的青貯飼料中的乳酸菌菌種構(gòu)成比例進(jìn)行了相應(yīng)的分析對比。我們分離到的主要的乳酸菌菌種的分類是Lactobacillus plautarum 和 Weissellau cibaria 2 種,二者在我們的總菌落中占比超出50%。同時(shí)經(jīng)過逐步的檢驗(yàn),我們發(fā)現(xiàn)青貯2個(gè)月后,植物乳桿菌為我們青儲飼料中的優(yōu)勢菌種,3組實(shí)驗(yàn)組都是如此。
一般情況下,熱帶地區(qū)的雨季動(dòng)物都不會缺乏飼料,而到了旱季其牧草多枯萎,這時(shí),我們就可以通過雨季青儲的飼料來解決旱季飼料不足的問題。玉米和甘蔗的秸稈飼料青儲就是解決這一問題的良好途徑。在本研究中,經(jīng)過實(shí)驗(yàn)證明,玉米秸稈相比于甘蔗秸稈其表現(xiàn)出來的青貯特性更好,并且其所具有的水分含量、pH值、WSC含量等特點(diǎn),更加適合進(jìn)行青儲。
本文通過試驗(yàn)對比,發(fā)現(xiàn)本次實(shí)驗(yàn)的青儲飼料中,乳酸菌、好氧細(xì)菌、大腸桿菌、霉菌、酵母菌都是存在的,但是其中的優(yōu)勢菌群是乳酸菌。通常青貯發(fā)酵的基礎(chǔ)是自然發(fā)酵,其青貯時(shí),因?yàn)轱暳现械挠袡C(jī)化合物會被其中的各種菌轉(zhuǎn)化為有機(jī)酸,使其pH值降低,這樣我們就可以將飼料保存得更久了。同時(shí)因?yàn)槟敛輹缴樗峋?,所以我們可以通過定量地添加活菌來保持我們青儲飼料中的活菌數(shù)量、種類和特性,而這些將會是預(yù)測青貯發(fā)酵規(guī)律的關(guān)鍵所在。
總的來說,熱帶地區(qū)的玉米和甘蔗還是很豐富的,而二者的新鮮秸稈也是有一定的營養(yǎng)價(jià)值的,是當(dāng)?shù)睾导緝?yōu)良的飼料來源,并且玉米以及甘蔗的秸稈上還會附著大量的乳酸菌,這樣我們即使額外的添加生物添加劑,其青貯特性也是很優(yōu)良的,并且青貯發(fā)酵過后飼料的品質(zhì)也更適合家畜的攝取。這項(xiàng)研究表明,本文所涉及的2種農(nóng)作物秸稈,都可以作為青貯飼料的良好原料,并且該技術(shù)的技術(shù)含量較低,適合在旱季地區(qū)進(jìn)行大規(guī)模地推廣,并將其作為粗飼料來解決其家畜的飼料問題。