王斐

（黑龍江省齊齊哈爾市畜牧總站 161000）

20世紀90年代以來，中國乳牛的存欄量大增，奶牛養(yǎng)殖量不斷增加。高效養(yǎng)牛模式是目前養(yǎng)殖場追求的方式，早期妊娠診斷可提高奶牛繁殖率，從而提高奶牛養(yǎng)殖的經(jīng)濟效益。近年來，奶牛早孕診斷技術出現(xiàn)了很多新的方法與技術。

1 奶牛的早期妊娠診斷主要技術

1.1 早孕因子診斷法

早孕因子是一種妊娠相關蛋白復合物，通過抑制雌性動物的細胞免疫，使胎兒能正常存活，從而達到避免母體免疫排斥的目的。早孕因子的診斷方法主要是確定早孕因子的含量，以此作為早孕診斷的重要指標[1]。

1.2 乳膠凝集抑制試驗

當精子和卵子結合形成合子時，胚胎和胎盤在母牛體內發(fā)育，絨毛膜促性腺激素是由絨毛膜滋養(yǎng)細胞和囊胚子葉分泌出來的，通過乳膠凝集抑制試驗測定懷孕雌性動物的尿液和奶中的激素可作為早期妊娠診斷的方法[2]。

1.3 超聲波診斷法

超聲波有A超、B超、D超，其中多普勒超聲被廣泛應用。其原理是利用超聲波對動物子宮掃描，根據(jù)信號判斷動物是否懷孕[3]。我國運用超聲波在動物早孕的診斷進行大量研究。鄧甘珍等在2004年用B超檢測了137只處于不同妊娠階段的雌性動物，在交配后第30天的診斷準確率為89%，在交配后31～35d的診斷準確率為97%，35d以上的診斷準確率為100%。

1.4 宮頸-陰道黏液電導率測定法

有研究者通過測定宮頸-陰道黏液電導率在妊娠早期和發(fā)情周期有規(guī)律的變化發(fā)現(xiàn)，健康奶牛發(fā)情時導電性水平較低，從發(fā)情開始逐漸上升到發(fā)情后期逐漸下降；在發(fā)情后受精過程中，孕牛的電導率變化與空牛不同。發(fā)情周期的每個階段，懷孕奶牛的導電性都明顯低于未懷孕奶牛。

1.5 血小板計數(shù)法

在交配7d后懷孕奶牛的血小板顯著下降，而未懷孕奶牛的血小板計數(shù)無顯著改變。利用這個原理在育種前后，根據(jù)血小板計數(shù)的變化對198頭奶牛的血小板計數(shù)進行測定，并與交配后約50d的直接試驗結果進行比較。結果表明，血小板計數(shù)檢出奶牛妊娠率分別為81%和90%。

1.6 血清酸滴定法

懷孕期間懷孕奶牛產(chǎn)生一些特定的免疫球蛋白，在酸性環(huán)境中與其他蛋白質形成不溶性復合物，實際中多以血清素滴定法檢測免疫球蛋白[4]。

1.7 堿性磷酸酶活力測定法

在桑葚胚階段，懷孕奶牛血液中堿性磷酸酶活性高于未孕奶牛，妊娠第一個月血清中堿性磷酸酶活性升高，在妊娠第2～3個月顯著升高。

1.8 放射免疫測定法

放射免疫分析(RIA)是將放射性方法與免疫方法同時結合的一種新型方法。蔡志強等用抗孕激素單克隆抗體建立黃體酮包覆固相RIA測定奶牛交配后21～58d奶或血樣中黃體酮含量。結果表明，懷孕的檢出率為90%～95%。RIA方法準確性、靈敏度高，但設備昂貴、技術要求高、輻射危害大，該技術的臨床應用受到一定限制。Wang等分別檢測了10頭妊娠奶牛和10頭發(fā)情奶牛牛奶中黃體酮的含量，發(fā)現(xiàn)妊娠奶牛黃體酮含量明顯高于發(fā)情奶牛。

2 小結

目前，早孕診斷的各種方法基本已經(jīng)十分成熟，奶牛早孕診斷方法越來越多，早孕診斷技術越來越成熟。一些較為新式的診斷方法卻使用不多，甚至基層很少使用，有些方法在生產(chǎn)實踐中無法得到廣泛有效的應用，一些診斷方法的準確性與可靠性還有待進一步驗證。隨著世界奶牛養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展和進步，早孕診斷技術的重要性越來越凸顯，新技術的出現(xiàn)也會使診斷效率越來越高。