邢國榮

（襄陽職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)院，湖北襄陽 441000）

1 eb病毒與經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤的發(fā)病機(jī)制

eb病毒 （EBV）與幾種類型的B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤（NHL；Burkitt淋巴瘤，彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤）以及典型霍奇金淋巴瘤（cHL）的發(fā)病有關(guān)。這兩個(gè)主要的B細(xì)胞淋巴瘤亞群是根據(jù)組織病理學(xué)差異診斷的。cHL的特征是存在罕見的，通常是單一的、惡性的Hodgkin Reed Steberg（HRS）細(xì)胞，其周圍是非腫瘤細(xì)胞群，包括T和B淋巴細(xì)胞以及其他細(xì)胞類型。相反，在NHL中，惡性淋巴細(xì)胞是主要的群體。HRS細(xì)胞是在B細(xì)胞分化的生發(fā)中心（GC）或GC后階段被阻滯的B細(xì)胞，如通過檢測免疫球蛋白（IG）基因中的體細(xì)胞突變所證明的。約四分之一的cHL在IgV基因中具有所謂的殘缺突變，其特征在于無義突變或缺失，其破壞了基因編碼功能性IG蛋白的能力，導(dǎo)致缺乏功能性IG蛋白的細(xì)胞，表面B細(xì)胞受體（BCR）。攜帶這種有害突變的GC B細(xì)胞通常通過凋亡消除。為此，有人提出HRS細(xì)胞起源于通過轉(zhuǎn)化事件從細(xì)胞凋亡中獲救的凋亡前GC B細(xì)胞。

HRS細(xì)胞也有一個(gè)非常不尋常的轉(zhuǎn)錄程序，其特點(diǎn)是顯著下調(diào)B細(xì)胞譜系基因表達(dá)，包括BCR的成分，以及其他造血細(xì)胞類型的標(biāo)志物的異常共表達(dá)，包括T細(xì)胞、NK細(xì)胞和髓樣細(xì)胞身份的喪失被認(rèn)為是涉及PAX5、早期B細(xì)胞因子1（EBF1）和調(diào)節(jié)正常B細(xì)胞發(fā)育的TCF3的關(guān)鍵B細(xì)胞相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子網(wǎng)絡(luò)被破壞的結(jié)果。

HRS細(xì)胞中的異常轉(zhuǎn)錄也部分由幾個(gè)關(guān)鍵信號(hào)通路的組成型激活介導(dǎo)。HRS細(xì)胞的特征是組成性激活核因子κB（NF-B）轉(zhuǎn)錄因子。cHL細(xì)胞系中NF-B信號(hào)的抑制導(dǎo)致響應(yīng)于生長因子的停止而增強(qiáng)的細(xì)胞凋亡，并導(dǎo)致小鼠模型中腫瘤形成的減少。HRS細(xì)胞表達(dá)CD30、CD40、TACI、BCMA和 RANK，均可誘導(dǎo) NF-B活性,有證據(jù)表明cHL的腫瘤微環(huán)境可促進(jìn)這些受體的活化。關(guān)鍵調(diào)控基因的突變也可誘導(dǎo)異常的NF-B活化。因此，NF-B的c-REL亞基由于REL基因擴(kuò)增而過度表達(dá)。NF-B活性也可以通過編碼IB抑制蛋白IBα和IBε的基因突變來增加，這些基因通常在細(xì)胞質(zhì)中起到滅活NF-B的作用。非經(jīng)典的NF-B途徑對HRS細(xì)胞的存活也很重要，這是通過RelB介導(dǎo)的效應(yīng)。TNFAIP3 A20（一種 NF-B信號(hào)的負(fù)調(diào)控因子）的突變在HRS細(xì)胞中也很常見。

2 EBV潛伏膜蛋白在病毒持續(xù)性中的作用

對B細(xì)胞中EBV轉(zhuǎn)化特性的詳細(xì)了解主要利用了一個(gè)完善的體外系統(tǒng)，其中B細(xì)胞增殖和存活是由所有EBV潛在基因的協(xié)同作用誘導(dǎo)的（EBV基因表達(dá)模式稱為延遲III）。最終結(jié)果是產(chǎn)生稱為淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞系（LCL）的連續(xù)增殖的B細(xì)胞系。幾種EBV潛在基因，包括EBNA2和LMP1，以及EBNA3A和EBNA3C基因已被證明對該模型中B細(xì)胞的體外轉(zhuǎn)化至關(guān)重要。EBNA1也被認(rèn)為是必需的，因?yàn)樗蔷S持EBV感染所必需的，在病毒基因組復(fù)制中具有關(guān)鍵功能，并且在細(xì)胞分裂過程中病毒基因組與子細(xì)胞的分離。EBNA1也是病毒和細(xì)胞基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子。然而，與LCL模型相反，大多數(shù)EBV相關(guān)癌癥顯示出更多限制的病毒基因表達(dá)模式，其中EBNA2，EBNA3A和EBNA3C通常不表達(dá)。例如，HRS細(xì)胞中的EBV基因組表達(dá)病毒潛伏期的限制模式，稱為潛伏期II，其特征在于存在EBNA1，兩種潛伏膜蛋白LMP1和 LMP2，Epstein Barr編碼的 RNA（EBERs），以及病毒 miRNA。本文的重點(diǎn)是EBV潛伏膜蛋白對cHL發(fā)病機(jī)制的貢獻(xiàn)。

EBV持續(xù)存在于正常無癥狀病毒攜帶者的記憶B細(xì)胞中。病毒蛋白在大多數(shù)EBV感染的記憶B細(xì)胞中不表達(dá)，病毒基因表達(dá)模式稱為潛伏期0。雖然EBNA1不在靜息EBV感染的記憶B細(xì)胞庫中表達(dá)，但是當(dāng)這些細(xì)胞發(fā)生增殖時(shí)需要它。這種病毒基因表達(dá)模式被稱為延遲I。在無癥狀攜帶者中，潛伏膜蛋白LMP1和LMP2A在正常EBV感染的GC細(xì)胞向記憶B細(xì)胞的分化中具有關(guān)鍵作用，因此對于病毒持續(xù)性也是關(guān)鍵的。在所謂的病毒持續(xù)性“生發(fā)中心模型”中，LMP1是一種組成型活性CD40受體同源物，LMP2是BCR模擬物，被認(rèn)為提供了EBV感染的GC B細(xì)胞存活和抗原非依賴性分化成記憶B細(xì)胞所必需的信號(hào)。EBV感染的GC B細(xì)胞也可以分化為漿細(xì)胞，但有證據(jù)表明LMP1可以抑制這一過程，可能確保大多數(shù)EBV感染的GC B細(xì)胞被導(dǎo)入記憶B細(xì)胞區(qū)。顯然，一小部分EBV感染的B細(xì)胞確實(shí)會(huì)最終發(fā)展成為漿細(xì)胞，而這一過程可能部分由LMP2A驅(qū)動(dòng)。最終的結(jié)果是一些EBV感染的漿細(xì)胞到達(dá)扁桃體，在那里它們完成病毒復(fù)制周期并將新的病毒粒子釋放到唾液中以傳播給其他人類宿主。EBV感染的GC B細(xì)胞也可以分化為漿細(xì)胞，但有證據(jù)表明LMP1可以抑制這一過程，可能確保大多數(shù)EBV感染的GC B細(xì)胞被導(dǎo)入記憶B細(xì)胞區(qū)。

3 EBV潛伏膜蛋白與經(jīng)典霍奇金淋巴瘤的發(fā)病機(jī)制

雖然LMP1對于正常病毒的持續(xù)存在似乎很重要，但它也牽涉到細(xì)胞轉(zhuǎn)化。LMP1在體外表現(xiàn)為典型的癌基因，是LCL模型中EBV永生化B細(xì)胞不可缺少的因子。作為 CD40受體的組成型活性變體，LMP1誘導(dǎo)上述許多在 HRS細(xì)胞中異常激活的細(xì)胞信號(hào)通路，包括NF-B、JAK STAT、AP-1和（PI3K）AKT通路。LMP1激活這些信號(hào)通路有助于HRS細(xì)胞的異常轉(zhuǎn)錄程序。因此，以原代人GC B細(xì)胞為模型，我們發(fā)現(xiàn)單獨(dú)使用LMP1可以重現(xiàn)cHL細(xì)胞中觀察到的幾乎四分之一的轉(zhuǎn)錄變化，包括B細(xì)胞特性的特征性喪失。LMP1對于B細(xì)胞存活也很重要，并且還可以通過增加抗凋亡分子的表達(dá)來促進(jìn)EBV感染的BCR陰性HRS祖細(xì)胞的存活。

LMP2以兩種亞型存在，即 LMP2A和LMP2B，它們共有8個(gè)共同的編碼外顯子，但有不同的50個(gè)外顯子。LMP2A作為BCR模擬物發(fā)揮作用，使B細(xì)胞在缺乏正常BCR信號(hào)的情況下發(fā)育。LMP2A激活RAS PI3K AKT信號(hào)，這對于B細(xì)胞存活，以及mTOR途徑。

我們對已發(fā)表數(shù)據(jù)的重新分析顯示，EBV陽性和 EBV陰性 HRS細(xì)胞中存在的轉(zhuǎn)錄變化非常相似，支持了這樣的觀點(diǎn)：雖然EBV陽性和EBV陰性cHL中發(fā)生的致病機(jī)制可能不同，但它們大多聚合在相同的轉(zhuǎn)錄終點(diǎn)上。目前的模型是EBV感染可以在功能上替代細(xì)胞遺傳學(xué)改變的模型。為了支持這一點(diǎn)，已經(jīng)表明EBV感染與TNFAIP3突變之間存在反向關(guān)系。最近一項(xiàng)關(guān)于cHL全球基因組的研究進(jìn)一步支持了這種可能性，該研究表明，與EBV陽性的HRS細(xì)胞相比，EBV陰性的細(xì)胞突變更常見.然而，值得注意的是，在我們的再分析中，我們還觀察到僅在EBV陽性或EBV陰性HRS細(xì)胞中上調(diào)或下調(diào)的基因亞群，但在兩者中都沒有。

4 結(jié)論

許多研究試圖在使用不同的體外系統(tǒng)和動(dòng)物模型單獨(dú)表達(dá)或組合表達(dá)時(shí)揭示潛伏膜蛋白的表型效應(yīng)。然而，在許多情況下，這些研究產(chǎn)生了相互矛盾的結(jié)果，產(chǎn)生了潛伏膜蛋白在B細(xì)胞中的作用的令人困惑的畫面。盡管存在這些差異，但可以得出一些一般性結(jié)論。首先，已經(jīng)證明LMP1在不同的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)中一致地轉(zhuǎn)化B細(xì)胞。此外，由LMP1/CD40嵌合體遞送的組成型CD40信號(hào)也在轉(zhuǎn)化。相反，其中LMP1信號(hào)傳導(dǎo)受生理學(xué)CD40L刺激調(diào)節(jié)的CD40/LMP1嵌合體不會(huì)轉(zhuǎn)化。這些數(shù)據(jù)表明它正在轉(zhuǎn)變LMP1信號(hào)的本構(gòu)特性。第二，LMP2A可以在功能上替代B細(xì)胞中的BCR信號(hào)。盡管尚未顯示，但這對于BCR陰性HRS祖細(xì)胞的存活可能是重要的?！?/p>