張光云 陳 普

云南中醫(yī)藥大學(xué) 云南省傣醫(yī)藥與彝醫(yī)藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650500

癌癥又稱為惡性腫瘤，有研究顯示中國(guó)的癌癥成為2010年以來(lái)死亡的主要因素，且成為一個(gè)主要的公共衛(wèi)生問(wèn)題[1]。隨著現(xiàn)代人生活環(huán)境和生活方式的改變，癌癥患病率和死亡率的逐漸升高，嚴(yán)重危害人類的健康。為此，尋找到一種有效且副作用小的抗腫瘤藥物已然成為學(xué)者們最為關(guān)心的迫切問(wèn)題。近年來(lái)，藏藥在抗腫瘤方面的應(yīng)用價(jià)值越來(lái)越得到學(xué)者們的肯定，藏藥屬于天然藥物，因其藥用資源豐富，應(yīng)用價(jià)值高，已成為了挖掘新藥的重要研究方向。筆者以中國(guó)知網(wǎng)文獻(xiàn)檢索數(shù)據(jù)庫(kù)為主，以“藏藥/藏醫(yī)”、“抗腫瘤/癌癥”、“作用機(jī)制”為檢索關(guān)鍵詞，以近年來(lái)關(guān)于抗腫瘤的藏藥研究參考文獻(xiàn)和書目記載為基礎(chǔ)，對(duì)藏藥在抗腫瘤上的應(yīng)用概況綜述如下。

1 藏藥中抗腫瘤活性的成份

藏藥中的天然抗腫瘤活性成分是尋找抗腫瘤藥物的重點(diǎn)方向，對(duì)尋找到一種療效好且副作用小的抗腫瘤藥物具有重要的意義。為此，諸多學(xué)者一直在不斷的探索抗腫瘤藥物中的主要活性成分。如王曉琴[2]通過(guò)提取藏藥矮兔耳草中的總皂苷，使用其對(duì)人胃癌MGC-803細(xì)胞的增殖和凋亡進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示：藏藥矮兔耳草提取物可以抑制人胃癌MGC-803細(xì)胞的增殖，且抑制作用具有時(shí)效和量效關(guān)系；此外，且可誘導(dǎo)人胃癌MGC-803細(xì)胞系的凋亡。朱小牧等[3]首次研究從巴夏嘎中分離得到的鴨嘴花堿對(duì)A549、A2780、HepG2、LLC細(xì)胞增殖的抑制作用，結(jié)果顯示鴨嘴花堿對(duì)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株均有著不同程度的抑制作用，且細(xì)胞增殖抑制率與化合物濃度存在量效關(guān)系；其中，鴨嘴花堿對(duì)LLC的抑制作用最為顯著。令狐浪[4]應(yīng)用從藏藥巴朱中分離得到了兩種化合物進(jìn)行誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示兩種化合物均能抑制腫瘤細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞周期阻滯和細(xì)胞凋亡，且可增加促凋亡蛋白Bax的表達(dá)，降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)。雒艷萍[5]從藏藥裸莖金腰分離出DTFG和TTF兩種黃酮類化合物，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)DTFG可以抑制豚鼠的淋巴細(xì)胞活性，TTF對(duì)胃癌細(xì)胞SGC-7901及白血病耐藥細(xì)胞K562/ADM的增殖具有抑制作用；且可誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞SGC-7901發(fā)生凋亡，體外可促進(jìn)豚鼠EOS活性。CHANDRAN U等[6]研究發(fā)現(xiàn)三果湯在抗腫瘤上有較好的作用，其作用機(jī)制是通過(guò)藏藥三果湯散中的槲皮素、鞣花酸等13個(gè)生物活性成分與24種癌癥中的17個(gè)靶蛋白相互作用；而ZHAO Y等[7]在2018年的體外細(xì)胞試驗(yàn)也證實(shí)了三果湯散能對(duì)婦科腫瘤細(xì)胞發(fā)揮較好的促凋亡作用和抑制作用，能有效的抑制人子宮內(nèi)膜癌HEC-1-B細(xì)胞、人卵巢癌人宮頸癌HeLa細(xì)胞和SK-OV-3細(xì)胞的增殖，且有劑量相關(guān)性。劉波[8]對(duì)藏藥濕生扁蕾中口山酮類化合物(Compound 1-4)進(jìn)行抗癌活性篩選發(fā)現(xiàn)，Compound 1-4對(duì)HepG2和HL-60細(xì)胞均有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，且能夠引起兩種細(xì)胞不同程度的發(fā)生凋亡；其中Compound 2的抗癌活性最強(qiáng)，但高濃度時(shí)會(huì)造成對(duì)DNA的損傷。大量的研究證實(shí)藏藥余甘子抗腫瘤活性成分是沒(méi)食子酸、表兒茶素和鞣花酸[9-11]。李艷等[12]對(duì)藏藥寨卡有效部位的分離進(jìn)行鑒定及研究其抗腫瘤活性，結(jié)果顯示藏藥寨卡抗腫瘤的有效部位主要為硫代葡萄糖苷，并對(duì)小鼠S180和CT-26實(shí)體瘤的生長(zhǎng)存在明顯的抑制作用。張芳芳等[13]進(jìn)行鐮形棘豆提取物抗腫瘤活性的體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)鐮形棘豆抗腫瘤活性的主要部位是鐮形棘豆的揮發(fā)油和總黃酮，它們均可不同程度地抑制人癌細(xì)胞株的增殖，并呈現(xiàn)出一定的量效關(guān)系。

2 藏藥抗腫瘤機(jī)制研究

2.1 抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖 細(xì)胞增殖是生命體維持生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖和遺傳的生命體征，而腫瘤細(xì)胞增殖則會(huì)對(duì)人體的生命健康產(chǎn)生危害作用；因此，從抑制腫瘤細(xì)胞增殖方向出發(fā)，去尋找能顯著抑制腫瘤細(xì)胞的藥物就顯得更有價(jià)值。普布多吉等[14]采用MTT法研究藏藥大花綠絨蒿內(nèi)生真菌次級(jí)代謝對(duì)乳腺癌腫瘤細(xì)胞株MDA-MB-435的抑制活性，結(jié)果顯示抑制率大于80%內(nèi)生菌菌株有17株，抑制率介于50%～80%之間的內(nèi)生菌菌株13株，抑制率小于50%的內(nèi)生菌菌株有10株；抑制率大于80%內(nèi)生真菌菌株有9個(gè)種屬。結(jié)果表明，大多數(shù)大花綠絨蒿內(nèi)生真菌具有良好的抗乳腺癌腫瘤活性。傅永紅[15]使用藏藥甘青烏頭生物堿抑制人源肝癌細(xì)胞HepG-2和鼠源肺癌細(xì)胞Lewis的增殖，結(jié)果表明甘青烏頭脂溶性生物堿和水溶性生物堿對(duì)肝癌細(xì)胞HepG-2和肺癌細(xì)胞Lewis均具有一定的抑制作用，且水溶性生物堿比脂溶性生物堿的抑制作用更加明顯，而抑制作用會(huì)隨著作用時(shí)間的延長(zhǎng)和藥物濃度的增加而增強(qiáng)。顧青等[16]從藏藥鐮形棘豆中分離出7-甲氧基二氫黃酮( 7-methoxy flavanone，1)，7-羥基二氫黃酮 ( 7-hydroxy flavonone，2)，2'，4'-二羥基査耳酮(2'，4'-dihydroxy chalcone，3)，2'，4 '-二羥基4'-甲氧基查爾酮( 2'，4 'dihydroxy4'-methoxy chalcone，4)，N(2-苯乙基)肉桂酰胺(N2-phenylethyl cinnamamide，5)5中化合物，經(jīng)過(guò)MTT試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)化合物3(2'，4'-dihydroxy chalcone，3)對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG2、小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16F10、人肝癌細(xì)胞SMMC7721、人肝癌細(xì)胞HuH7以及人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB231的增殖具有明顯的抑制作用。程燕等[17]研究藏藥柳茶水提物對(duì)胃癌耐藥細(xì)胞 BGC823/5-FU增殖及藥物敏感性的影響，發(fā)現(xiàn)其可以較好的抑制胃癌耐藥細(xì)胞株BGC823/5-FU的生長(zhǎng)，并在一定程度上逆轉(zhuǎn)其化療耐藥，并且抑制抗凋亡蛋白的表達(dá)、激活促凋亡蛋白、誘導(dǎo)耐藥細(xì)胞發(fā)生凋亡可能是其作用的主要機(jī)制。吉立賓[18]運(yùn)用藏藥雪靈芝水提取物研究其對(duì)胃腺癌細(xì)胞MGC-803增殖抑制的影響，得出雪靈芝水提取物對(duì)MGC-803細(xì)胞增殖具有抑制作用，對(duì)MGC-803細(xì)胞G1期具有阻滯作用及在細(xì)胞凋亡中也具有一定的作用；此外，其可通過(guò)下調(diào)細(xì)胞周期正性調(diào)節(jié)因子CyclinD1和上調(diào)負(fù)性調(diào)節(jié)因子P21和P16的表達(dá)，發(fā)揮G1期阻滯作用；并且雪靈芝水提取物影響MGC-803細(xì)胞凋亡可能是通過(guò)降低Bc1-2基因表達(dá)和升高Bax的基因表達(dá)來(lái)完成的。

2.2 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡與抑制細(xì)胞增殖 腫瘤的生成不僅與細(xì)胞不斷增殖有關(guān)，還與細(xì)胞凋亡或死亡受阻關(guān)系密切；當(dāng)細(xì)胞凋亡通路受到阻斷，就有可能引發(fā)腫瘤。因此，人們?cè)谘芯靠鼓[瘤的藥物中，除了研究怎樣抑制腫瘤細(xì)胞增殖外，還通過(guò)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡來(lái)治療腫瘤。楊榮等[19]選用5種不同的人體癌細(xì)胞(A549、HepG2、SGC7901、 MM-A375、SHEP1)作為研究對(duì)象，為了觀察藏藥綠蘿花抗腫瘤的作用機(jī)制，通過(guò)MTT分析法篩選出具有顯著抑制效果的SGC7901細(xì)胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)綠蘿花水煎干膏制劑在體外能通過(guò)抑制人胃癌SGC7901細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞調(diào)亡而具有抗腫瘤作用；此外，本實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)綠蘿花具有增強(qiáng)小鼠機(jī)體免疫功能的作用；孫翠翠等[20]研究了綠蘿花水溶性多糖誘導(dǎo)腹水瘤S-180細(xì)胞、肝癌HepAl-6細(xì)胞和白血病L1210細(xì)胞凋亡的作用，結(jié)果顯示不同劑量綠蘿花水溶性多糖均具有誘導(dǎo)S-180細(xì)胞凋亡的作用，均可上調(diào)其早期和晚期凋亡率。有研究顯示[21]，余甘子水提物呈劑量依賴性延長(zhǎng)荷EAC或DLA細(xì)胞腹水癌小鼠生存期及抑制體外培養(yǎng)的L929細(xì)胞的生長(zhǎng)、抑制DLA細(xì)胞誘導(dǎo)的實(shí)體瘤的生長(zhǎng),并推測(cè)這種抑制作用與細(xì)胞周期阻滯有關(guān)；此外，余甘子提取物對(duì)人肺癌細(xì)胞A549和人肝癌細(xì)胞HepG2都有一定的抑制作用,而且其抑制作用和順鉑以及阿霉素存在協(xié)同效果[22]；陳靜等[23]發(fā)現(xiàn)余甘子鞣質(zhì)部位體外對(duì)人腫瘤細(xì)胞A549、BEL-7402均有明顯的生長(zhǎng)抑制作用,且這種抑制作用與誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡及細(xì)胞G2/M期阻滯有關(guān)；此外，余甘子目前在抗腫瘤方面的研究較為成熟，不僅從余甘子藥物中的不同單體進(jìn)行研究，在作用機(jī)制方面還具有抑制腫瘤血管生成[24-25]和調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力的功效[26]。趙螢[27]研究鐮形棘豆和藏醫(yī)學(xué)法炮制馬錢子醇提物對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖及凋亡的影響，結(jié)果表明鐮形棘豆和藏醫(yī)學(xué)法炮制馬錢子醇提物均能抑制細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，且均呈劑量依懶性。從藥物作用機(jī)制對(duì)抗腫瘤的藥物進(jìn)行分析，將有利于進(jìn)一步明確藥物作用于人體的具體靶點(diǎn)，可為今后開展藥物作用機(jī)制研究提供思路及參考。楊光明等[28]研究藏藥鐮形棘豆總黃酮的不同劑量作用于SMMC-7721細(xì)胞，觀察藥物對(duì)細(xì)胞的凋亡情況及其與凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)鐮形棘豆總黃酮作用SMMC-7721細(xì)胞后可凋亡細(xì)胞的比例明顯升高; Bcl-2蛋白表達(dá)下降，Bax蛋白表達(dá)與對(duì)照組比較有所降低，但Bcl-2/Bax比值明顯減小，說(shuō)明鐮形棘豆總黃酮具有抑制SMMC-772細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用，其分子機(jī)制可能與下調(diào)Bcl-2基因表達(dá)和降低Bcl-2/Bax的比值有關(guān)。藏藥濕生扁蕾關(guān)于抗腫瘤的作用機(jī)制較多，有研究報(bào)道[29]其對(duì)人結(jié)腸癌SW480細(xì)胞凋亡與調(diào)控因子Bcl-2及Bax的mRNA的表達(dá)密切相關(guān)，藏藥濕生扁蕾作用結(jié)腸癌SW480細(xì)胞24h后，Bcl-2的mRNA表達(dá)量減少，Bax的mRNA表達(dá)增多，并呈劑量依賴性；王雅莉等[30]觀察藏藥濕生扁蕾對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞SW480增殖調(diào)控因子CyclinD1、CDK4、PCNA和p21kip1·mRNA表達(dá)的影響，結(jié)果表明，藏藥濕生扁蕾作用結(jié)腸癌SW480細(xì)胞24h后，與對(duì)照組比較，CyclinD1、CDK4、PCNA mRNA的表達(dá)減少，p21kip1·mRNA 的表達(dá)增多，并有劑量依賴性，說(shuō)明濕生扁蕾引起結(jié)腸癌SW480細(xì)胞凋亡可能與其抑制CyclinD1、CDK4、PCNA mRNA的表達(dá)和促進(jìn)p21kip1·mRNA的表達(dá)有關(guān)；而盧年華[31]從NF-κB信號(hào)通路研究藏藥濕生扁蕾提取物誘導(dǎo)結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制，其發(fā)現(xiàn)一定的藏藥濕生扁蕾提取物濃度對(duì)NF-κB的表達(dá)具有下調(diào)作用，且能誘導(dǎo)結(jié)腸癌SW480細(xì)胞的凋亡。李紅芳等[32]研究發(fā)現(xiàn)藏藥中苯酚類衍生物通過(guò)上調(diào)核轉(zhuǎn)錄因子NF-KB 65可能激活凋亡通路從而誘導(dǎo)細(xì)胞的凋亡，抑制細(xì)胞的增值；此外，細(xì)胞內(nèi)連環(huán)蛋白β-catenin 的表達(dá)也上調(diào)，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞間的粘附性增強(qiáng)，從而抑制了腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。王飛[33]研究了余甘子抗癌化學(xué)物質(zhì)組分及作用機(jī)制，結(jié)果發(fā)現(xiàn)余甘子70%乙醇提取物的血漿整體對(duì)癌細(xì)胞的抑制率較高，特別是對(duì)肝癌細(xì)胞及宮頸癌細(xì)胞的抑制率較好，通過(guò)用流式細(xì)胞儀對(duì)凋亡細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞周期測(cè)定,發(fā)現(xiàn)余甘子能使癌細(xì)胞發(fā)生S期阻滯，影響細(xì)胞周期正常進(jìn)程；對(duì)肝癌細(xì)胞SMMC-7721和宮頸癌細(xì)胞Hela使用余甘子純化后總酚酸和總黃酮，結(jié)果均表現(xiàn)出較高的抑制率。

2.3 藏藥抗腫瘤藥物的篩選與新發(fā)現(xiàn) 藏藥在抗腫瘤方面的研究較多，不僅篩選出多種藏藥具有抗腫瘤作用的藥物，且還從逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥方面對(duì)藏藥進(jìn)行了研究。如黨合群等[34]對(duì)21種藏藥進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，以篩選出具有抗腫瘤作用的藥物，結(jié)果顯示在21種藏藥的各種制劑中，毛盔馬先篙、亞切瑪、沙生鳳毛菊的醇提物和唐古特烏頭生物鹼對(duì)小鼠肉瘤180，長(zhǎng)毛馬先篙、五脈錄絨篙的醇提物對(duì)L615小鼠白血病，禾葉鳳毛菊、五脈錄絨篙的醇提物對(duì)大鼠Walker癌肉瘤256有不同程度的抑制作用。宗玉英等[35]對(duì)110 種藏藥抗腫瘤體外篩選實(shí)驗(yàn)研究，結(jié)果顯示:五種藏藥桃兒七果實(shí)、藏木香、裸莖金腰、祁連圓柏、蒼耳草均具有較好的抗腫瘤作用。藏藥紅景天不僅在體外對(duì)某些腫瘤細(xì)胞有抑制作用，且對(duì)機(jī)體整體水平也具有抑瘤作用；但紅景天抗腫瘤的具有作用機(jī)制至今尚不完全清除,因此需要進(jìn)一步進(jìn)行深入研究[36]。黃旭峰等[37]通過(guò)文獻(xiàn)整理與訪談，整理出具有抗腫瘤功效的60種藥材和6種復(fù)方，發(fā)現(xiàn)這些品種中直接抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)與增殖的藥材有27種；誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的藥材有12種；誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化的藥材有2種；增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的藥材有3種；由此可看出，藏藥在抗腫瘤上的潛力巨大，將成為今后開展抗腫瘤研究的重要方向。此外，劉慶山等[38]研究藏藥“齋毒”中5個(gè)創(chuàng)新活性化合物在腫瘤多藥耐藥的逆轉(zhuǎn)作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)5個(gè)化合物分子具有創(chuàng)新的GsT抑制活性，特別對(duì)GST兀、GsTp1-1型活性很高，且活性遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于陽(yáng)性藥依他尼酸，說(shuō)明這5個(gè)化合物具有逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥的前景，可能成為未來(lái)新的抗癌藥和增敏劑來(lái)治療腫瘤，其具有較好的藥物開發(fā)前景，因此有必要進(jìn)行進(jìn)一步整體水平和細(xì)胞的研究。

3 小結(jié)

藏藥是我國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)藥的重要組成部分，藥用資源豐富。其在抗腫瘤上的藥用價(jià)值較廣，但目前關(guān)于藏藥抗腫瘤的研究還不多，因此今后應(yīng)該加強(qiáng)藏藥在抗腫瘤應(yīng)用價(jià)值上的研究，以期為解決抗腫瘤治療這一世界難題提供更為有效的治療方案和途徑。筆者從收集整理的文獻(xiàn)可以看出，目前藏藥被研究出具有抗腫瘤效果的藥物仍然很少，且存在以下問(wèn)題：①大部分藥物研究主要基于體外的細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡這兩方面，關(guān)于體內(nèi)的研究報(bào)道較少；②研究出來(lái)的藥物在臨床上是否有療效少有報(bào)道；且大部分的藥物作用機(jī)制不清楚，只是從細(xì)胞增殖的抑制和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡來(lái)進(jìn)行探索；③藥物發(fā)揮抗腫瘤的具體成分研究較少，大部分主要集中在水提取物和醇提取物的研究上。因此，為了充分挖掘藏藥在抗腫瘤上的應(yīng)用價(jià)值，筆者建議從以下方面進(jìn)行：①增加動(dòng)物體內(nèi)的實(shí)驗(yàn)研究，以期為臨床的應(yīng)用奠定基礎(chǔ)；②充分利用現(xiàn)代技術(shù)對(duì)具有抗腫瘤的藏藥化學(xué)成分進(jìn)行分離，明確其具體的有效部位或?qū)鼓[瘤有用化合物，再進(jìn)一步使用有效部分或化合物進(jìn)行抗腫瘤作用機(jī)制的研究；③充分收集整理民間治療腫瘤疾病有效的單驗(yàn)方，以擴(kuò)大藏藥抗腫瘤的藥物庫(kù)，為尋找到更多有利于治療腫瘤疾病的藥物提供充足資源。