趙寶景，鄔秀娣，忻霞菲，黃華，王庭輝，覃文

作者單位： 315010寧波，寧波市第一醫(yī)院

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）是一種慢性自身免疫性疾病，以多系統(tǒng)累及為特點(diǎn)，有廣泛的臨床表現(xiàn)和實(shí)驗(yàn)室檢查異常。目前監(jiān)測(cè) SLE病情的傳統(tǒng)生物標(biāo)記物有血沉、抗dsDNA抗體、補(bǔ)體c3/c4等，但診斷價(jià)值不夠理想。因此，尋找更有價(jià)值的生物標(biāo)記用于 SLE的病情評(píng)估是當(dāng)前需要解決的問題。有研究顯示血管細(xì)胞黏附分子1（VCAM-1）、白介素（IL）-6、IL-10、抗C1-q抗體等生物標(biāo)記物與SLE病情活動(dòng)有關(guān)[1-3]，但目前尚未形成廣泛共識(shí)。本研究通過分析SLE患者血漿細(xì)胞因子/趨化因子水平變化，探索可監(jiān)測(cè)病情活動(dòng)的生物標(biāo)記物，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取寧波市第一醫(yī)院2017年2月至2018年3月收治的SLE患者24例，均符合1997年美國(guó)風(fēng)濕病協(xié)會(huì)修訂的SLE分類標(biāo)準(zhǔn)，其中男3例，女21例；年齡22～51歲，平均（33.18±11.98）歲。另選同期健康志愿者17例設(shè)為對(duì)照組，其中男4例，女13例；年齡18～ 45歲，平均（25.86±3.79）歲。兩組年齡和性別比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05)。將24例患者根據(jù)疾病活動(dòng)指數(shù)（SLEDAI）積分分為活動(dòng)組（SLEDAI＞4）和穩(wěn)定組（SLEDAI≤4）。

1.2 方法 靜脈采血5 ml，EDTA管抗凝，4℃1 500 r/min離心5 min，留取血漿樣本―80℃凍存。細(xì)胞因子/趨化因子的檢測(cè)方法采用液相懸浮芯片技術(shù)。取出血漿樣本，4℃1000r/min離心10min，收集上清。在濾板孔中依次加入微珠和血漿樣本各50 l，混勻孵育30min，洗滌。再加入檢測(cè)抗體25 l，混勻孵育30min，洗滌。然后加入Streptavidin-PE熒光色素50 l，孵育10min，洗滌。最后用125 lassay buffer重懸微珠，密封，搖勻，上機(jī)讀板。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，符合正態(tài)分布采用t檢驗(yàn)；不符合正態(tài)分布則采用秩和檢驗(yàn)。相關(guān)性分析采用Pearson檢驗(yàn)。采用ROC曲線計(jì)算曲線下面積（AUC），并計(jì)算Cut-off值。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)胞因子/趨化因子水平檢測(cè)結(jié)果SLE組IL-1 、IL-1ra、IL-5、IL-6、IL-8、IL-18、VCAM-1、單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）、腫瘤壞死因子-（TNF-）、干擾素-（IFN-）、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（VEGF）、瘦素（Leptin）、干擾素誘導(dǎo)蛋白10、巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子（MIF）、可溶性E選擇蛋白（sE-selectin）、可溶性CD40配體（sCD40L）等16種細(xì)胞因子/趨化因子水平高于對(duì)照組（均 P＜0.05）。見表 1。

2.2 細(xì)胞因子/趨化因子水平與病情活動(dòng)關(guān)系 SLE病情活動(dòng)組血漿 IP-10、VCAM-1水平高于 SLE病情穩(wěn)定組（Z=2.08，t=3.02，均P＜ 0.05），見封四彩圖1。SLE患者 IP-10水平與 SLEDAI評(píng)分呈正相關(guān)（r=0.442，P=0.03），而VCAM-1水平與 SLEDAI不相關(guān)（r=0.165，P=0.44）。ROC曲線分析血漿IP-10水平對(duì)病情活動(dòng)的診斷價(jià)值：AUC=0.778（95%CI 0.586～ 0.970），P=0.021；Cut-off值=1 294.00 pg/ml（敏感性66.7%，特異性83.3%），見封四彩圖2。

趙寶景，鄔秀娣，忻霞菲，等.血漿IP-10水平與系統(tǒng)性紅斑狼瘡病情活動(dòng)相關(guān)（見正文第1621頁）

圖1 SLE病情活動(dòng)組血漿IP-10、VCAM-1水平

圖2 血漿IP-10水平診斷SLE病情活動(dòng)曲線

3 討論

本研究發(fā)現(xiàn) SLE患者血漿多種細(xì)胞因子/趨化因子水平升高，與既往報(bào)道一致[4-5]。這些異常升高的細(xì)胞因子/趨化因子水平在 SLE的發(fā)病機(jī)制中扮演了重要角色，它們刺激B細(xì)胞成熟產(chǎn)生自身抗體，誘導(dǎo)炎癥細(xì)胞分化成熟到達(dá)病變部位，并放大炎癥反應(yīng)，使得組織損傷加劇。既往報(bào)道有些細(xì)胞因子/趨化因子在特定器官中濃度較高，或在特定器官損傷較重時(shí)血清濃度明顯升高，提示其可能與靶器官損傷有關(guān)。

進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，SLE活動(dòng)組患者血漿IP-10和VCAM-1水平較穩(wěn)定組顯著升高，其中血漿IP-10水平與病情活動(dòng)度呈正相關(guān)。IP-10是一種CXC類趨化因子，可由外周血單個(gè)核細(xì)胞、成纖維細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞等產(chǎn)生。IP-10被IFN-誘導(dǎo)產(chǎn)生后與受體CXCR3結(jié)合，可促進(jìn)炎癥部位單核細(xì)胞、T細(xì)胞和NK細(xì)胞的募集，在炎癥反應(yīng)的誘導(dǎo)和維持中均起了重要作用[6]。既往報(bào)道，血清IP-10水平與SLE病情活動(dòng)、血液和皮膚黏膜損害有關(guān)，可作為SLE患者肺累及的血清標(biāo)記[7]；腦脊液IP-10升高可能與SLE累及中樞神經(jīng)系統(tǒng)有關(guān)[8]；血清和尿IP-10水平升高可提示 SLE病情活動(dòng)，但對(duì)狼瘡性腎炎的活動(dòng)與否沒有鑒別意義[9]。本研究也顯示，血漿IP-10水平對(duì)SLE病情活動(dòng)有診斷價(jià)值，敏感性和特異性分別為66.7%和83.3%，有臨床應(yīng)用價(jià)值。但血漿和體液中IP-10是否參與或反映了特定的靶器官損害需要更多的研究證實(shí)。

表1 SLE組和對(duì)照組血漿細(xì)胞因子/趨化因子水平比較 pg/ml