超聲引導(dǎo)下細(xì)針穿刺聯(lián)合CK19、Ki-67檢測在甲狀腺乳頭狀癌中的應(yīng)用價值分析

任利中

作者單位： 312400浙江省嵊州，嵊州市人民醫(yī)院

甲狀腺乳頭狀癌（PTC）是最為常見的甲狀腺惡性腫瘤之一，約占甲狀腺惡性腫瘤的80%，臨床通常依據(jù)其細(xì)胞核核溝、核內(nèi)含體及毛玻璃樣核等形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行診斷。但由于某些甲狀腺良性病變也伴有細(xì)胞核形態(tài)學(xué)的變化，PTC的臨床診斷相對困難[1-2]。近年來，隨著彩色多普勒超聲和細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)檢查在甲狀腺結(jié)節(jié)診斷中的廣泛應(yīng)用，超聲引導(dǎo)下細(xì)針穿刺（US-FNA）在PTC中的優(yōu)勢日益凸顯[3]。本研究分析US-FNA聯(lián)合CK19、Ki-67檢測在PTC中的應(yīng)用價值，旨在為PTC患者的臨床治療提供參考。現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取浙江省嵊州市人民醫(yī)院2015年6月至2017年5月診斷且符合納入標(biāo)準(zhǔn)（患者近1個月內(nèi)均未接受放、化療治療，臨床資料完整）的70例疑似PTC患者為研究對象，并已排除存在其他部位腫瘤或嚴(yán)重心、肝、腎等主要臟器疾病者。其中男31例，女39例；平均年齡（39.47±4.98）歲，甲狀腺腫塊直徑（1.36±0.25）cm。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)通過，所有患者均自愿參與且簽署知情同意書。

1.2 檢測方法

1.2.1 US-FNA細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測 所有患者均采用LOGIQE9超聲診斷儀進(jìn)行檢測，探頭類型為線陣探頭，頻率為9.0～15.0 MHz，患者取仰臥位，頭部后仰，充分暴露頸部，常規(guī)檢查甲狀腺峽部及雙葉，重點(diǎn)記錄甲狀腺縱橫比、邊界、數(shù)目、腫塊回聲及內(nèi)部血流。超聲確認(rèn)位置后進(jìn)行可疑結(jié)節(jié)穿刺。常規(guī)鋪巾消毒，利多卡因行全身麻醉，超聲引導(dǎo)下以23 GPTG穿刺針穿刺甲狀腺結(jié)節(jié)，多方位穿刺15～30次，當(dāng)組織難以取出時，可增加負(fù)壓抽吸，抽取部分樣本，制作1～3張涂片，并用95%乙醇固定，HE常規(guī)染色，光鏡下行細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查。根據(jù)細(xì)胞染色結(jié)果，由2名具有5年以上工作經(jīng)驗(yàn)的病理科醫(yī)生進(jìn)行獨(dú)立判斷，意見相左時應(yīng)協(xié)商取得一致。

1.2.2 細(xì)胞角蛋白（19CK19）、Ki-67檢測 手術(shù)切取患者的腫瘤組織，采用免疫組化法，檢測CK19、Ki-67蛋白表達(dá)，采用PBS代替一抗作空白對照，CK19、Ki-67均為即用型抗體（福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司），其他操作均按說明書要求嚴(yán)格進(jìn)行。CK19的檢測標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)胞膜出現(xiàn)棕黃色著色的細(xì)胞數(shù)＞10%，即為陽性；＜10%，為陰性；Ki-67的檢測標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色著色的細(xì)胞數(shù)＞1%，即為陽性，＜1%為陰性。

1.3 統(tǒng)計方法 采用SPSS20.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料采用x2檢驗(yàn)進(jìn)行比較。采用ROC曲線下面積（AUC）評價各檢測方法對PTC的診斷價值，當(dāng)0.5＜AUC＜0.7時，表示診斷價值較低；當(dāng)0.7≤AUC＜0.9時，表示診斷價值中等；當(dāng)AUC≥0.9時，表示診斷價值較高。一致性采用 Kappa檢驗(yàn)進(jìn)行分析，當(dāng)Kappa值≤0.45時，表示一致性差；當(dāng)Kappa值在0.45～0.75，表示一致性好；當(dāng)Kappa值≥0.75時，表示一致性非常好。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病理學(xué)診斷結(jié)果 70例PTC患者中，42例患者為惡性腫瘤，28例患者為良性腫瘤。

2.2 各檢測方法診斷結(jié)果

2.2.1 US-FNA檢測結(jié)果與病理學(xué)結(jié)果比較 US-FNA檢測顯示，惡性腫瘤41例，其中33例與病理學(xué)結(jié)果相符；良性腫瘤29例，其中20例與病理學(xué)診斷相符。與病理學(xué)結(jié)果比較，US-FNA檢測陽性預(yù)測值為0.805（33/41），陰性預(yù)測值為 0.690（20/29），靈敏度為 0.786（33/42），特異度為0.714（20/28），準(zhǔn)確度為0.757，一致性檢驗(yàn)Kappa值為0.497。見表1。

2.2.2 CK19檢測結(jié)果與病理學(xué)結(jié)果比較 CK19檢測結(jié)果為（11.13±2.35）%，其中，惡性腫瘤45例，32例與病理學(xué)結(jié)果相符；良性腫瘤25例，15例與病理學(xué)結(jié)果相符。與病理學(xué)結(jié)果比較，CK19檢測陽性預(yù)測值為0.711（32/45），陰性預(yù)測值為0.600（15/25），靈敏度為0.762（32/42），特異度為0.536（15/28），準(zhǔn)確度為0.671，一致性檢驗(yàn)Kappa值為0.303，見表2。

2.2.3 Ki-67檢測結(jié)果與病理學(xué)結(jié)果比較 Ki-67檢測結(jié)果為（1.11±0.22）%，其中，惡性腫瘤41例，32例與病理學(xué)結(jié)果相符；良性腫瘤29例，19例與病理學(xué)結(jié)果相符。與病理學(xué)結(jié)果比較，Ki-67檢測陽性預(yù)測值為0.780（32/41），陰性預(yù)測值為 0.655（19/29），靈敏度為 0.762（32/42），特異度為0.679（19/28），準(zhǔn)確度為0.729，一致性檢驗(yàn)Kappa值為0.438，見表3。

2.3 ROC曲線 以病理學(xué)診斷結(jié)果為狀態(tài)變量，分別以 US-FNA、CK19、Ki-67檢測的細(xì)胞染色結(jié)果及 US-FNA聯(lián)合CK19、Ki-67檢測的擬合度為檢驗(yàn)變量，做ROC曲線，結(jié)果顯示，US-FNA聯(lián)合CK19、Ki-67檢測PTC的AUC值同US-FNA檢測、CK19檢測及Ki-67檢測相比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表 4、封四彩圖 3。

任利中.超聲引導(dǎo)下細(xì)針穿刺聯(lián)合CK19、Ki-67檢測在甲狀腺乳頭狀癌中的應(yīng)用價值分析（見正文第1632頁）

圖3 各檢測方法診斷PTC的曲線

3 討論

PTC是一種起源于甲狀腺濾泡上皮的高分化、低惡性腫瘤，為臨床最常見的甲狀腺惡性腫瘤。PTC預(yù)后較好，若能及時確診并施以有效治療，患者甚至可達(dá)到治愈的效果。近年來，有研究表明[4]，甲狀腺結(jié)節(jié)的檢出率約為70%，而乳頭狀癌的檢出率僅占其5%左右，極低的檢出率阻礙了患者治療，影響患者預(yù)后。因此，早期的確診對改善PTC患者臨床癥狀有重要意義。

表1 US-FNA檢測結(jié)果與病理學(xué)結(jié)果比較 例

表2 CK19檢測結(jié)果與病理學(xué)結(jié)果比較例

表3 Ki-67檢測結(jié)果與病理學(xué)結(jié)果比較 例

表4 各檢測方法診斷PTC的曲線結(jié)果

表4 各檢測方法診斷PTC的曲線結(jié)果

方法95%US-FNA檢測 0.750 0.0620 0.632～0.846 CK19檢測 0.688 0.0662 0.566～0.793 Ki-67檢測 0.724 0.0608 0.604～0.824 US-FNA聯(lián)合CK19、Ki-67檢測 0.858 0.0450 0.754～0.930

近年來，臨床常用CK19和Ki-67檢測對PTC患者進(jìn)行診斷。CK19是最常見的細(xì)胞角蛋白類型之一，常用于甲狀腺、胰腺及肺等部位腫瘤的病理學(xué)診斷，其在PTC組織中多呈強(qiáng)陽性表達(dá)，對于惡性腫瘤的診斷有較高的敏感性；Ki-67作為一種與細(xì)胞周期相關(guān)的增生細(xì)胞抗原，僅存在于周期性細(xì)胞的細(xì)胞核內(nèi)，可準(zhǔn)確反應(yīng)細(xì)胞增殖活性[5]，多數(shù)惡性腫瘤中均存在Ki-67的過度表達(dá)；但本研究發(fā)現(xiàn)，CK19與 Ki-67檢測的一致性較差，影響了二者的臨床應(yīng)用價值。本研究采用US-FNA對患者進(jìn)行診斷發(fā)現(xiàn)，US-FNA檢測對PTC患者的診斷有較好的一致性，且 US-FNA聯(lián)合 CK19、Ki-67檢測 PTC的 AUC值高于 USFNA、CK19及Ki-67檢測。

US-FNA是在指在超聲儀器的實(shí)時監(jiān)控引導(dǎo)下對活體組織進(jìn)行穿刺，以取得細(xì)胞和病理組織的診斷方法。超聲具有精準(zhǔn)、無創(chuàng)及高效等優(yōu)點(diǎn)，其可通過不同超聲特征直接反應(yīng)患者的腫瘤發(fā)生情況，預(yù)測惡性腫瘤存在風(fēng)險，將超聲分為超聲高度、中度、低度和極低度懷疑及良性，并給出相應(yīng)的惡性概率；US-FNA可通過超聲精準(zhǔn)定位、負(fù)壓抽吸及多方位取材等方法，提高對微小病變的穿刺精準(zhǔn)度，從而提高US-FNA的成功率，加強(qiáng)了對直徑＜1 cm腫瘤的檢出率。何堅(jiān)沃等[6]的研究表明US-FNA檢測對PTC的檢出率高達(dá)90%，與本研究結(jié)果相近，但US-FNA檢查其尚不能識別包膜、血管浸潤等病理學(xué)組織，通過免疫組化法檢測CK19和Ki-67水平可較好地彌補(bǔ)這一不足。因此，采用 US-FNA聯(lián)合CK19、Ki-67檢測PTC具有較高的臨床應(yīng)用價值。

綜上所述，US-FNA聯(lián)合 CK19、Ki-67檢測對PTC的診斷有較好的診斷價值，能夠?yàn)镻TC患者的確診提供參考，臨床應(yīng)用價值高。