朱玲

【摘?要】 目的：研究白色念珠菌引發(fā)的腹瀉臨床檢驗(yàn)結(jié)果。方法：選擇本院50例小兒腹瀉患者，隨機(jī)分為兩組，治療組25例患者根據(jù)癥狀使用激素、抗生素和活菌劑等不同方法治療，對(duì)照組25例患者給予磷霉素鈉進(jìn)行治療。結(jié)果：對(duì)腹瀉患者的糞便進(jìn)行觀察發(fā)現(xiàn)，樣本呈現(xiàn)出奶油色，有濕潤(rùn)、光滑的不透明菌落，沒(méi)有雜菌，對(duì)菌落進(jìn)行血清芽管和糖發(fā)酵試驗(yàn)，檢查厚膜包子，結(jié)果均顯示為白色念珠菌，治療組患者在對(duì)癥下藥后治療7d有效率為96.00%，并且明顯高于對(duì)照組，P<0.05。結(jié)論：白色念珠菌引發(fā)的腹瀉具有一些特殊的表現(xiàn)，通過(guò)臨床檢驗(yàn)可正確分析，需要通過(guò)對(duì)癥下藥，才可以有較好的療效。

【關(guān)鍵詞】 白色念珠菌;臨床檢驗(yàn);小兒腹瀉;臨床治療

文章編號(hào)：WHR2019042040

[Abstract] Objective：To study the clinical test results of diarrhea induced by Candida albicans. Methods：50 children with diarrhea in our hospital were randomLy divided into 2 groups. Results： The stool of the patients with diarrhea was observed. The samples showed cream color， moist and smooth non-transparent colonies， no bacteria， and the test of the serum and sugar fermentation of the colonies， and the thick-film steamed stuffed buns were examined， and the results were shown as Candida albicans. After 7 days′ treatment，the effective rate of the treatment group was 96.00% and significantly higher than that of the control group （P<0.05）. Conclusion： the diarrhea caused by Candida albicans has some special manifestations， which can be correctly analyzed by clinical examination.

[Key words]Candida albicans; Clinical test; Infantile diarrhea; Clinical treatment

人類身體中存在一種較為常見的致病真菌為白色念珠菌，它引發(fā)腹瀉主要是由于白色念珠菌會(huì)依附在真菌表面的蛋白上，在人類腸道黏膜的上表皮上大量繁殖，隨后釋放出水解酶類，溶解腸道黏膜的蛋白質(zhì)層，最終破壞腸絨毛和腸胃絨毛[1]。本文分析了50例由于白色念珠菌引發(fā)的腹瀉患者分組治療情況，結(jié)果報(bào)告如下。

1?資料和方法

1.1?一般資料

2017年8月至2018年9月入住本院的50例小兒腹瀉患者，確診為由于白色念珠菌引發(fā)的腹瀉，其中男39例，女11例，年齡4～15歲，平均年齡為（10.2±6.8）歲，患者在入院后均進(jìn)行了常規(guī)的糞便檢查，隨機(jī)分為兩組，治療組和對(duì)照組均有25例患者，組別之間患者在年齡和性別上無(wú)明顯差異。

1.2?樣品鑒定

取患者的晨便，少量的0.9%的氯化鈉溶液和大便樣品各1滴，均勻地涂抹在涂片上，用高倍的顯微鏡觀察。沙氏培養(yǎng)基上的樣品在37℃的條件下培養(yǎng)2～3d后，觀察菌落的透明度、顏色，通過(guò)鏡檢進(jìn)行確認(rèn)。培養(yǎng)后菌落散發(fā)出類似酵母的氣味，對(duì)樣本進(jìn)行涂片染色后發(fā)自按菌落呈現(xiàn)出卵圓形、革蘭陽(yáng)性，高倍顯微鏡下還可以觀察到卵圓形會(huì)出芽，深層次中還會(huì)出現(xiàn)假菌絲。通過(guò)階段培養(yǎng)得到的真菌菌落，再接種于玉米培養(yǎng)基上，培養(yǎng)溫度為25℃，培養(yǎng)3d后在高倍顯微鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)菌體的假菌絲頂端長(zhǎng)有典型的厚膜孢子，將菌落放入0.3mL的血清中，在35℃條件下培養(yǎng)3h，再將接種環(huán)的血清放置于載玻片上，使用高倍顯微鏡觀察芽管的形成特點(diǎn)，顯示結(jié)果為陽(yáng)性。通過(guò)糖發(fā)酵試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，半乳糖、葡萄糖和麥芽糖會(huì)產(chǎn)氣產(chǎn)酸，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)有乳糖分解情況[2]。

1.3?病原的分離與鑒定

1.3.1?分離培養(yǎng)?患者入院后第4d與第7d分別采集黏液稀便，以麥康凱瓊脂培養(yǎng)基做分離培養(yǎng)，經(jīng)37°C 48h溫育，均長(zhǎng)出比較純的白色、閃光、圓形、隆起、邊緣整齊、濕潤(rùn)、直徑1mm大小的菌落。

1.3.2?染色鏡檢?為革蘭氏陽(yáng)性、直徑較大的卵圓形菌細(xì)胞，并有芽生孢子。

1.3.3?生化學(xué)鑒定?同化作用葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、半乳糖、木糖、蕈糖、海藻糖、乙酰葡糖胺、酮葡糖酸鹽、甲基-D-葡糖苷、山梨醇、側(cè)金盞花醇、木糖醇等呈陽(yáng)性;乳糖、棉子糖、阿拉伯糖、纖維二糖、松三糖、肌醇、衛(wèi)茅醇、甘油等呈陰性。發(fā)酵反應(yīng)葡萄糖、麥芽糖、半乳糖、蕈糖為陽(yáng)性;蔗糖第7天遲發(fā)酵;乳糖、棉子糖為陰性。

其它試驗(yàn)?zāi)蛩孛戈幮?，TTC試驗(yàn)陰性，硝酸鹽還原陽(yáng)性，芽管形成試驗(yàn)陽(yáng)性;在1%吐溫80米粉培養(yǎng)基上能生成假菌絲和厚膜孢子，在沙保氏瓊脂培養(yǎng)基上37℃生長(zhǎng)良好，長(zhǎng)出白色奶油樣、閃光、濕潤(rùn)的圓凸?fàn)罹洹?/p>

1.3.4?毒力試驗(yàn)?給體質(zhì)量20g小白鼠尾靜脈注射0.3mL該菌懸液（濃度約10cfu/mL），結(jié)果小鼠于第6d發(fā)病死亡，剖檢可見肝臟與腸系膜充血，右腎與肝葉上有少數(shù)化膿病灶，取心血和膿灶組織進(jìn)行分離培養(yǎng)，均有白色念珠菌生長(zhǎng)。

1.3.5?藥敏試驗(yàn)?結(jié)果表明對(duì)病人曾使用過(guò)的上述6種抗菌藥物均耐藥，但對(duì)5-氟胞嘧啶、兩性霉素B高度敏感，對(duì)咪康唑、益康唑、酮康唑和制霉菌素呈中度敏感?；谝陨咸卣鳎_診分離菌為典型的致病性白色念珠菌。

1.4?血清學(xué)試驗(yàn)

發(fā)病第11d取靜脈血分出血清，與其糞便中分得的白色念珠菌的菌懸液（濃度為10億個(gè)菌/mL，經(jīng)加溫100°C 1h處理）進(jìn)行試管定量凝集反應(yīng)。結(jié)果抗體滴度為1∶1280。

1.5?治療方法

對(duì)照組患者進(jìn)行磷霉素鈉靜滴，劑量為100mg/（kg·d）。治療組患者進(jìn)行臨床檢驗(yàn)，結(jié)果聯(lián)合抗生素、腎上腺皮質(zhì)激素、治療免疫調(diào)節(jié)制劑等，并且輔助使用鹽水和肥皂水對(duì)患者進(jìn)行灌腸處理，連續(xù)3～5d，每天1次。還使用雙歧桿菌活菌制劑（1.0g/d）對(duì)患者體內(nèi)菌群進(jìn)行平衡調(diào)節(jié)，抑制了白色念珠菌在身體內(nèi)的增殖，提升患者的免疫力。

評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：對(duì)不同組別患者的治療效果進(jìn)行評(píng)價(jià)：無(wú)效為治療3d內(nèi)患者的大便形狀和次數(shù)無(wú)緩解;有效為治療3d內(nèi)患者大便形狀及其次數(shù)均有好轉(zhuǎn)情況;顯效為治療3d內(nèi)患者大便形狀和次數(shù)恢復(fù)到正常水平。

1.6?統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

所有數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 13.0進(jìn)行分析，其中計(jì)量數(shù)據(jù)使用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)使用卡方檢驗(yàn)，P<0.05時(shí)表示數(shù)據(jù)比對(duì)具有顯著差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2?結(jié)果

對(duì)患者的糞便樣品進(jìn)行培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)50例患者糞便樣品有濕潤(rùn)和光滑的不透明菌落，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)雜菌，呈現(xiàn)出奶油色，將這些培養(yǎng)出的菌落進(jìn)行血清芽管、糖發(fā)酵試驗(yàn)，還需要檢查鑒定菌落厚膜孢子，結(jié)果發(fā)現(xiàn)菌落為白色念珠菌。在對(duì)癥下藥后觀察到治療組的25例患者治療7d后有效率（有效+顯效）為96.00%;而對(duì)照組的25例患者通過(guò)治療7d后有效率僅76.00%，治療效果顯著低于治療組（P<0.05）。見表1。

3?討論

白色念珠菌引發(fā)的腹瀉是患者深部真菌發(fā)生感染，一般的抗感染藥物毒性較強(qiáng)，使用這些藥物是有年齡限制的，一般對(duì)于兒童來(lái)說(shuō)不宜使用[3]。白色念珠菌主要通過(guò)甘露聚糖復(fù)合物（真菌表面蛋白）引發(fā)腹瀉，這種蛋白在人體的腸道黏膜上皮細(xì)胞開始增殖并且產(chǎn)生一系列的水解酶，可溶解腸道黏膜的蛋白質(zhì)層，最終破壞腸絨毛和腸胃絨毛的結(jié)構(gòu)，一般來(lái)說(shuō)盲目使用抗生素會(huì)破壞腸道里的正常有益菌落[3]。

白色念珠菌雖系腸道常居菌，但為機(jī)會(huì)致病菌。在一定條件下若發(fā)生超常增殖，就可能引起腸炎[4]。這是因?yàn)椋?）白色念珠菌的胞壁主要成分為肽-葡聚糖-甘露聚糖的復(fù)合結(jié)構(gòu)，此物不僅對(duì)機(jī)體細(xì)胞免疫有顯著的抑制作用，而且對(duì)粘膜上皮具有黏附特性，從而促使本菌定居繁殖[5];2）本菌所形成的芽管和假菌絲，有較強(qiáng)的抗吞噬活性，且對(duì)組織有很強(qiáng)的穿透力;3）白色念珠菌能產(chǎn)生多種有毒性的分泌型與結(jié)構(gòu)型的酶，如磷脂酶A、溶血磷脂酶和蛋白酶等，它們有損傷粘膜細(xì)胞、抵抗吞噬和降解IgA的作用，因而增強(qiáng)本菌的侵襲力[6]。若患者使用多種抗生素，則會(huì)對(duì)腸道合成維生素B的細(xì)菌產(chǎn)生強(qiáng)烈抑制，引起機(jī)體維生素B缺乏，致使腸粘膜屏障功能進(jìn)一步降低，可能會(huì)導(dǎo)致腸炎發(fā)生[7-8]。

本文通過(guò)糞便標(biāo)本的培養(yǎng)確認(rèn)患者引發(fā)腹瀉的原因，對(duì)患者的糞便樣品進(jìn)行培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)50例患者糞便樣品有濕潤(rùn)和光滑的不透明菌落，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)雜菌，呈現(xiàn)出奶油色，將這些培養(yǎng)出的菌落進(jìn)行血清芽管、糖發(fā)酵試驗(yàn)，還需要檢查鑒定菌落厚膜孢子，結(jié)果發(fā)現(xiàn)菌落為白色念珠菌。在鑒定并且分離出白色念珠菌后，對(duì)照組患者行磷霉素鈉靜滴，劑量為100mg/（kg·d）。治療組患者進(jìn)行臨床檢驗(yàn)，聯(lián)合抗生素、腎上腺皮質(zhì)激素、治療免疫調(diào)節(jié)制劑等，并且輔助使用鹽水和肥皂水對(duì)患者進(jìn)行灌腸處理，同時(shí)，使用雙歧桿菌活菌制劑（1.0g/d）對(duì)患者體內(nèi)菌群進(jìn)行調(diào)節(jié)平衡，最終有效抑制了白色念珠菌在身體內(nèi)的增殖并提升患者的免疫力[9]。對(duì)比結(jié)果發(fā)現(xiàn)，規(guī)范使用藥物的研究組患者，能夠有效地緩解病癥，最終有效率為96.00%，相比較對(duì)照組76.00%的有效率，效果更為明顯，P<0.05，證明多藥物聯(lián)合使用可以更為徹底地抑制白色念珠菌的活力，有效改善腹瀉癥狀。

參考文獻(xiàn)

[1] 李聰穎，李文凱，馬瑛.白色念珠菌引起抗菌藥物相關(guān)性腹瀉的臨床檢驗(yàn)特點(diǎn)分析[J].中國(guó)醫(yī)藥指南，2018，16（17）：26，28.

[2] 孟凡鑫.白色念珠菌引起抗菌藥物相關(guān)性腹瀉的臨床檢驗(yàn)特點(diǎn)分析[J].中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2017，（02）：152-153.

[3] 孫亞?wèn)|.白色念珠菌引起腹瀉的臨床檢驗(yàn)體會(huì)[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘，2017，（02）：178-179.

[4] 龍海燕，馮萍.抗生素相關(guān)性腹瀉患者艱難梭菌和白色念珠菌檢測(cè)與臨床特征分析[J].華西醫(yī)學(xué)，2018，33（05）：71-76.

[5] 伍金林，李晉輝，王華，等.早產(chǎn)兒白色念珠菌深部感染的臨床治療[J].中華婦幼臨床醫(yī)學(xué)雜志（電子版），2017，13（04）：397.

[6] 李慶艷，秦力.白色念珠菌引起抗菌藥物相關(guān)性腹瀉的臨床檢驗(yàn)分析[J].中國(guó)處方藥，2015，13（10）：134-135.

[7] 鄒前芽，劉國(guó)忠，周遇秀.白色念珠菌引起抗菌藥物相關(guān)性腹瀉的臨床檢驗(yàn)特點(diǎn)分析[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2014，（19）：2586-2588.

[8] 張志華.白色念珠菌引起抗菌藥物相關(guān)性腹瀉的臨床檢驗(yàn)特點(diǎn)研究[J].大家健康（學(xué)術(shù)版），2016，11（12）.

[9] 魏紅霞，曹露露，張明軍，等.小兒圍手術(shù)期醫(yī)院獲得性白色念珠菌血癥五例臨床分析[J].臨床誤診誤治，2017，（08）.