(浙江誠意藥業(yè)股份有限公司，浙江 溫州 325700)

骨關(guān)節(jié)炎是一種非炎癥性的退行性關(guān)節(jié)病，表現(xiàn)為關(guān)節(jié)疼痛和僵硬。世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)，50歲以上人群中，骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病率為50%，55歲以上的人群中，發(fā)病率為80%。近年來骨關(guān)節(jié)炎患者數(shù)越來越多，年齡也越來越提前。骨關(guān)節(jié)炎的一大病因是關(guān)節(jié)軟骨蛋白多糖生物合成異常而呈現(xiàn)退行性變[1]。氨基葡萄糖是一種天然的氨基單糖，是蛋白多糖合成的前體物質(zhì)，可以刺激軟骨細(xì)胞產(chǎn)生具有正常多聚體結(jié)構(gòu)的蛋白多糖，提高軟骨細(xì)胞的修復(fù)能力，抑制損傷軟骨的酶(如膠原酶和磷酯酶A2)，防止損傷細(xì)胞的超氧化自由基的產(chǎn)生，促進(jìn)軟骨基質(zhì)的修復(fù)和重建，從而延緩骨關(guān)節(jié)疼痛的病理過程和疾病的進(jìn)程，改善關(guān)節(jié)活動(dòng)，緩解疼痛[2-3]。

鹽酸氨基葡萄糖為白色或類白色結(jié)晶性粉末，無臭，味微甜。鹽酸氨基葡萄糖原料比較穩(wěn)定，但在制備制劑時(shí)，在高溫高濕條件下，原料與輔料硬脂酸鎂、羧甲基淀粉鈉和淀粉等會(huì)發(fā)生相容性反應(yīng)，產(chǎn)生雜質(zhì)2，5-脫氧果糖嗪(雜質(zhì)C)[4-6]，故制劑較不穩(wěn)定，并且雜質(zhì)C含量(脫氧果糖嗪)較難控制。我國對(duì)藥品制劑的相關(guān)物質(zhì)控制越來越嚴(yán)，對(duì)產(chǎn)品的穩(wěn)定性要求也越來越高。針對(duì)這一問題，筆者研究團(tuán)隊(duì)對(duì)產(chǎn)品配方進(jìn)行篩選、優(yōu)化工藝。

1 材料與方法

1.1 材 料

1.1.1 儀 器

ZRS-8型溶出儀，天津大學(xué)精密儀器廠；TU-1800型紫外可見分光光度計(jì)，北京普析通用儀器有限公司；安捷倫1260高效液相色譜儀。

1.1.2 設(shè) 備

20B型萬能粉碎機(jī)，江陰市偉翔機(jī)械制造有限公司；HLSY-100B高效混合制粒機(jī)，瑞安市東華制藥機(jī)械公司；YK系列搖擺顆粒機(jī)，江陰瑰寶集團(tuán)有限公司；FZG-熱風(fēng)真空干燥機(jī)，江陰市創(chuàng)宏干燥設(shè)備有限公司；HD-100多向運(yùn)動(dòng)混合機(jī)，溫州市制藥設(shè)備廠制造；ZP1000旋轉(zhuǎn)式壓片機(jī)，上海天祥健臺(tái)制藥機(jī)械有限公司；BGB-10F型包衣機(jī)，溫州小倫包衣機(jī)械有限公司；DPB-250F平板式自動(dòng)泡罩包裝機(jī)，浙江華聯(lián)制藥機(jī)械股份有限公司。

1.2 方 法

1.2.1 檢測方法

采用高效液相色譜法[7-9]對(duì)相關(guān)物質(zhì)進(jìn)行檢測，主要參數(shù)及方法為

1) 液相柱：氨基硅烷鍵合硅膠為填充劑。

2) 流動(dòng)相：稱取7.0 g磷酸氫二鉀溶解在適量水中，加水稀釋至2 000 mL，用磷酸調(diào)節(jié)pH至7.5，制得磷酸鹽溶液。按V(乙腈)∶V(磷酸鹽溶液)=75∶25配制乙腈-磷酸鹽緩沖溶液。

3) 流速：1.5 mL/min。

4) 柱溫：35 ℃。

5) 進(jìn)樣量：10 μL。

6) 供試品溶液的配制：取供試樣品500 mg，精密稱定，置于50 mL量瓶中，加入乙腈-水溶液(V(乙腈)∶V(水)=1∶1)適量，振動(dòng)搖晃，使樣品溶解并稀釋至定容量，搖勻，過濾。

7) 果糖嗪和脫氧果糖嗪對(duì)照品溶液配制：稱取果糖嗪和脫氧果糖嗪對(duì)照品各10 mg，加入到100 mL容量瓶中，溶解定容，再取1 mL溶液加入到10 mL容量瓶中，用乙腈-水溶液定容，制成質(zhì)量濃度為10 μg/ mL的果糖嗪和脫氧果糖嗪溶液。

8) 系統(tǒng)適用性溶液配制：稱取N-乙酰氨基葡萄糖10 mg、果糖嗪10 mg、脫氧果糖嗪10 mg和鹽酸氨基葡萄糖10 g，用乙腈-水溶液溶解定容100 mL，取1 mL溶液加入到10 mL容量瓶中，用乙腈-水溶液定容，制成每1 mL溶液中約含N-乙酰氨基葡萄糖、果糖嗪、脫氧果糖嗪各10 μg，鹽酸氨基葡萄糖約10 mg的混合溶液。

取系統(tǒng)適用性溶液10 μL注入液相色譜儀，各雜質(zhì)之間及雜質(zhì)與主峰之間的分離度均不得低于1.5。精密量取供試品溶液和對(duì)照品溶液各10 μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的3倍。供試品溶液的色譜圖中，在波長274 nm下記錄脫氧果糖嗪含量(雜質(zhì)C)，在波長195 nm下，扣除氯離子峰和輔料峰，記錄各雜質(zhì)峰和總雜。

1.2.2 常規(guī)制劑工藝

取鹽酸氨基葡萄糖、淀粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉和硬脂酸鎂適量，分別過100目篩備用。取淀粉15 g，采用煮漿法，配制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的淀粉漿100 g。稱取配方量的鹽酸氨基葡萄糖、淀粉、微晶纖維素和羧甲基淀粉鈉，混合均勻，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的淀粉漿制軟材，過16目篩制粒，干燥至水質(zhì)量分?jǐn)?shù)在5%以下，16目篩整粒，隨后加入配方量的硬脂酸鎂混合均勻，壓片、包衣。

2 結(jié)果與討論

2.1 輔料中填充劑的選擇

選擇常用的無活性的輔料進(jìn)行原輔料相容性研究，按一定比例將原輔料混合，選擇出合適的輔料，其中微晶纖維素、淀粉、乳糖和羥丙基纖維素作為填充劑，硬脂酸鎂作為潤滑劑，羧甲基淀粉鈉作為崩解劑，聚維酮K30和淀粉漿作為粘合劑，胃溶性LE(包衣粉)作為包衣劑[10]。在不同實(shí)驗(yàn)條件下測定雜質(zhì)含量，結(jié)果如表1所示。

表1 原輔料相容性實(shí)驗(yàn)Table 1 The compatibility test of raw materials and excipient %

由表1可知：相比于淀粉、乳糖和羥丙基纖維素，選擇微晶纖維素作為填充劑時(shí)，總雜質(zhì)及最大單個(gè)雜質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)最小，在光照與高溫條件下基本未檢出雜質(zhì)，在高濕10 d條件下，總雜質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)只有0.03%，最大單個(gè)雜質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)僅有0.03%。

2.2 黏合劑種類和濃度的篩選

黏合劑的主要作用是將藥物活性成分和非活性成分黏合在一起，從而方便制粒、壓片。黏合劑的種類和用量要恰當(dāng)，如果黏性不足或用量太少，則壓成的片劑疏松易碎；如果黏性過強(qiáng)或用量太多，則壓成的片劑過于堅(jiān)硬，不易崩解。因此黏合劑的種類和用量必須進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，選擇不同配方，制成100 g片劑，篩選見表2。

由表2可知：R1配方的片劑硬度偏低，脆碎度不合格；R3和R4配方的片劑脆碎度不合格，有的片劑有頂裂現(xiàn)象；R2配方的片劑硬度適中，脆碎度合格，較為適宜。因此選質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的淀粉漿作為黏合劑。

2.3 顆粒干燥時(shí)間篩選

干燥時(shí)間會(huì)影響顆粒的水分大小。干燥時(shí)間太短，會(huì)導(dǎo)致含水量過高，硬度不夠；干燥時(shí)間過長，則含水量較低，硬度過大，片劑容易脆碎。因此，筆者將干燥箱溫度設(shè)為常用的(60±5) ℃，選擇不同的干燥時(shí)間，考察干燥效果，結(jié)果見表3。

表3 干燥時(shí)間篩選Table 3 The screening of drying time

由表3可知：干燥時(shí)間2.6 h和3.1 h時(shí)，顆粒中水質(zhì)量分?jǐn)?shù)偏高，硬度不符合要求；干燥4 h左右，顆粒的水質(zhì)量分?jǐn)?shù)降為4.4%，水分適中，片劑硬度符合要求，表面光潔度好，能使顆粒有較好的壓片效果，因此采用(60±5) ℃干燥4 h的工藝。

2.4 潤滑劑量的篩選

設(shè)計(jì)素片重為1.0 g/片，其中原料0.75 g/片，輔料(包含填充劑、潤滑劑和崩解劑)0.25 g/片，采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的淀粉漿為黏合劑，制粒干燥后，再加入潤滑劑進(jìn)行壓片。配方中原料質(zhì)量分?jǐn)?shù)為75%，輔料質(zhì)量分?jǐn)?shù)較小，片劑厚度為0.63 mm，該厚度的片劑在沖內(nèi)行程較長，如果潤滑劑量較小，則很容易在片劑邊緣留下痕跡，并導(dǎo)致裂片，所以需要對(duì)潤滑劑硬脂酸鎂的加入量進(jìn)行篩選。制成100 g片劑的潤滑劑用量的選擇及實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表4。

表4 潤滑劑量的篩選Table 4 The screening of lubricating dosage

由表4可知： R5和R6黏沖嚴(yán)重，片硬度偏低，有頂裂現(xiàn)象；R7有輕微沖脫現(xiàn)象；R8和R9脫沖順利，邊緣光潔，選用R8。另外由于本品片大，故硬脂酸鎂選用較小的2.0 g用量較合適。

2.5 包衣工藝的研究

原來的制劑采用的包衣劑為胃溶性LE包衣劑，是普通包衣。本實(shí)驗(yàn)采用的包衣粉由溫州小倫包衣技術(shù)公司研制，配方編號(hào)為G.06305，固體質(zhì)量分?jǐn)?shù)為14%。實(shí)驗(yàn)主要考察了包衣增重對(duì)片劑工藝對(duì)影響，結(jié)果見表5。

表5 包衣增重篩選Table 5 The screening of coat weight

由表5可知：包衣增重在2.0%～4.0%，外觀色澤均符合要求，市售品增重約為2.1%，所以包衣增重可以選擇2.0%～3.0%。

2.6 影響因素及穩(wěn)定性研究

綜合上述優(yōu)選配方工藝，壓片包衣后進(jìn)行影響因素實(shí)驗(yàn)、加速穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)和長期穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)，與市售品作對(duì)比，采用HPLC方法測定雜質(zhì)含量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表6～8。

表6 影響因素實(shí)驗(yàn)(面積歸一法)Table 6 The influence factor test (area normalization method)

影響因素實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明：三批自制產(chǎn)品和市售品在光照條件下都較穩(wěn)定，總雜質(zhì)升高不多；在高溫條件下較不穩(wěn)定，三批自制品總雜質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)從0.07%分別升高到0.75%，0.34%和0.52%，但均低于市售品的1.06%；在高濕條件下最不穩(wěn)定，三批自制品總雜質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)從0.07%分別升高到3.13%，3.39%和3.28%，均遠(yuǎn)低于市售品的6.35%。

表7 加速穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)(溫度(40±2) ℃，濕度(75±5)%)Table 7 Total impurity of accelerated test (temperature (40±2) ℃, humidity (75±5)%)

加速穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明：三批自制產(chǎn)品在0，1，2，3，6 個(gè)月總雜質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為由0.07%升高至0.28%～0.29%左右；而市售品總雜質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)則由0.28%升高至0.42%，明顯高于自制產(chǎn)品。

表8 長期穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)(溫度(25±2) ℃，濕度(60±10)%)Table 8 Total impurity of long-term test (temperature(25±2) ℃, humidity (60±10)%)

長期穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明：三批自制產(chǎn)品在0，3，6，9，12 個(gè)月總雜質(zhì)分別為0.07%，0.15%，0.18%～0.19%，0.16%～0.17%和0.17%～0.18%；市售品則分別為0.28%，0.26%，0.28%，0.29%和0.25%，市售品總雜質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)明顯高于自制產(chǎn)品。

以上影響因素和穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)表明本工藝制備產(chǎn)品雜質(zhì)可控，較市售品質(zhì)量更穩(wěn)定。

3 結(jié) 論

在高溫高濕條件下，原料鹽酸氨基葡萄糖與硬脂酸鎂和羧甲基淀粉鈉等輔料會(huì)發(fā)生相容性反應(yīng)，產(chǎn)生雜質(zhì)2,5-脫氧果糖嗪或果糖嗪(雜質(zhì)C)，導(dǎo)致制劑不穩(wěn)定。筆者開展了鹽酸氨基葡萄糖片配方與制劑工藝的研究，進(jìn)行了填充劑、黏合劑種類和質(zhì)量濃度、干燥條件、潤滑劑量以及包衣增重的研究。選定了如下最優(yōu)配方工藝：鹽酸氨基葡萄糖75%，淀粉7.75%，微晶纖維素7.75%，羧甲基淀粉鈉1.5%，質(zhì)量濃度為15%的淀粉漿40%，混勻后60 ℃干燥4 h，用2.0%硬脂酸鎂作為潤滑劑進(jìn)行壓片，最后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%的藥用薄膜包衣預(yù)混輔料(加6倍包衣輔料用量的水稀釋溶解)進(jìn)行包衣。通過影響因素和穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)研究，表明此工藝產(chǎn)品的最初雜質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)明顯低于市售品，且質(zhì)量比市售品更穩(wěn)定，更適用于長期保存。