孟羿彬，黃云飛，賈帥軍，賀 欣，李 帆，劉德印

脊柱頸段創(chuàng)傷是骨科較常見的創(chuàng)傷性疾病之一，其發(fā)生的主要影響因素除交通事故及意外傷害外，也與現(xiàn)代人不良生活方式(如長(zhǎng)期使用電子產(chǎn)品造成長(zhǎng)期低頭、屈頸的不良姿勢(shì))有關(guān)，長(zhǎng)此以往頸部正常生理彎曲被破壞，使得頸椎生理功能發(fā)生退化，繼而導(dǎo)致脊柱頸段創(chuàng)傷的患病風(fēng)險(xiǎn)上升[1-2]。IL-15是近年來研究較多的細(xì)胞因子之一，據(jù)報(bào)道[3]其主要的生理功能是刺激血清脂聯(lián)素分泌以及調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的增殖及分化。近年來研究[4-5]發(fā)現(xiàn)IL-15 mRNA在全身可檢測(cè)到的部位非常廣泛，但其表達(dá)水平與相關(guān)部位病變及其嚴(yán)重程度關(guān)系尚未得到驗(yàn)證，因此IL-15與許多疾病的潛在聯(lián)系具有一定的研究?jī)r(jià)值。本研究中，頸段創(chuàng)傷主要包括上(下)頸段椎體骨折、椎體滑脫伴椎間小關(guān)節(jié)脫位、椎間盤損傷、椎間盤突出、椎間盤破裂、脊髓內(nèi)水腫、脊髓內(nèi)血腫、韌帶剝離、韌帶撕裂、椎旁血腫等，此類疾病與IL-15的關(guān)聯(lián)尚未有文獻(xiàn)進(jìn)行系統(tǒng)報(bào)道，因此本研究才將其作為立題依據(jù)進(jìn)行初步研究。本研究旨在分析脊柱頸段創(chuàng)傷IL-15表達(dá)水平及其與脊柱頸段創(chuàng)傷預(yù)后之間的關(guān)系，進(jìn)一步驗(yàn)證IL-15對(duì)脊柱頸段創(chuàng)傷的監(jiān)測(cè)價(jià)值。

資料與方法

1 研究對(duì)象

2016年8月-2018年4月，采用定群抽樣的方法選取西安市紅會(huì)醫(yī)院骨科收治的脊柱頸段創(chuàng)傷并在該院接受手術(shù)治療的患者85例，男性49例，女性36例，平均年齡(47.25±8.96)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)術(shù)前及術(shù)后基本體征平穩(wěn)，意識(shí)清晰；(2)在了解調(diào)查目的后自愿參與并遵循本研究的規(guī)定流程；(3)患者家屬同意并簽署同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)患者術(shù)后出現(xiàn)嚴(yán)重并發(fā)癥或出現(xiàn)不可控的病情突變(如心跳、呼吸驟停)；(2)存在精神心理衛(wèi)生問題及語言交流障礙；(3)兩年內(nèi)參與過同類型調(diào)查研究。最終收集到有效研究對(duì)象85例。其中，13例合并其他開放性創(chuàng)傷感染，2例合并脊柱胸段創(chuàng)傷，2例合并脊柱腰段創(chuàng)傷。手術(shù)均采用靜吸復(fù)合全麻，于病變的椎間盤右側(cè)作一斜向切口，完全分離皮膚和筋膜后置入融合器，行X線透視定位。有69例患者為首次接受開放性手術(shù)。

2 研究方法

在向患者說明研究目的后于患者術(shù)前，術(shù)后24、48、96h分4次抽取患者空腹靜脈血10mL，3 000r/min離心取上清，等量分裝為2份于-20℃低溫環(huán)境下保存，并測(cè)定患者血清IL-15水平。本研究于患者術(shù)前，術(shù)后24h、48h、96h分4次采用ELISA法測(cè)定患者血清IL-15水平，選取的監(jiān)測(cè)時(shí)點(diǎn)基本屬于圍手術(shù)期范圍，也是醫(yī)務(wù)人員對(duì)患者實(shí)施干預(yù)較為可行的時(shí)間范圍，對(duì)預(yù)后評(píng)價(jià)也具有一定意義。IL-15定量分析采用ELISA法(試劑盒生產(chǎn)商：深圳華大基因生物制劑有限公司；實(shí)驗(yàn)方法：雙抗夾心法；編號(hào)：SEC172Ra；物種:Rattus norvegicus)，結(jié)果于最大吸收光波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè)(血清IL-15對(duì)應(yīng)最大吸收光波長(zhǎng)為275nm)，用吸光度值(A)反映待測(cè)樣品的濃度。同時(shí)采用臨床癥狀評(píng)分(自擬量表，具有良好的信度和效度)及生活質(zhì)量評(píng)估量表(具有良好的信度和效度)評(píng)估患者的預(yù)后狀況，其中臨床癥狀自評(píng)量表[6]包括5個(gè)維度(消化系統(tǒng)功能、呼吸系統(tǒng)功能、循環(huán)系統(tǒng)功能、泌尿功能、神經(jīng)系統(tǒng)功能)，每個(gè)維度得分區(qū)間為0～20分，總得分區(qū)間為0～100分，得分越低代表對(duì)應(yīng)的臨床癥狀越嚴(yán)重。生活質(zhì)量量表(EORTC QLQ-C30)[7]則包括4個(gè)維度(軀體功能、認(rèn)知功能、情緒功能、社會(huì)功能)，每個(gè)維度得分區(qū)間為0～20分，總得分區(qū)間為0～80分，得分越低代表對(duì)應(yīng)的生活質(zhì)量越差。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。采用描述性統(tǒng)計(jì)學(xué)指標(biāo)(均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差、中位數(shù)、率、構(gòu)成比等)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)描述。依據(jù)數(shù)據(jù)是否服從正態(tài)分布，分別采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)或兩組資料的秩和檢驗(yàn)進(jìn)行組間資料的比較，三組及以上的計(jì)量資料則采用方差分析或多組資料的秩和檢驗(yàn)，兩兩比較采用SNK法，相關(guān)性分析分別采用Pearson法完成。采用ROC受試者特征曲線評(píng)估脊柱頸段創(chuàng)傷患者血清IL-15對(duì)患者預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值，研究中顯著性水平為ɑ=0.05。

結(jié) 果

1 不同監(jiān)測(cè)時(shí)點(diǎn)患者的IL-15水平變化情況

表1 不同監(jiān)測(cè)時(shí)點(diǎn)患者的IL-15水平變化情況

與術(shù)前相比，aP<0.05；與術(shù)后24h相比，bP<0.05；與術(shù)后48h相比，cP<0.05；與術(shù)后96h相比，dP<0.05

2 不同監(jiān)測(cè)時(shí)點(diǎn)患者的IL-15水平與其預(yù)后狀況的相關(guān)性

對(duì)脊柱頸段創(chuàng)傷患者臨床癥狀評(píng)分及生活質(zhì)量量表得分進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)二者均服從正態(tài)分布(P>0.05)，故采用Pearson法分析不同監(jiān)測(cè)時(shí)點(diǎn)患者的IL-15水平與其預(yù)后狀況的相關(guān)性。結(jié)果顯示，術(shù)前IL-15水平與循環(huán)系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)以及軀體和情緒功能評(píng)分存在正相關(guān)關(guān)系；術(shù)后24h檢測(cè)IL-15水平與循環(huán)系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)以及軀體功能評(píng)分存在正相關(guān)關(guān)系；術(shù)后48h 和96h的IL-15水平均與循環(huán)系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)和情緒功能評(píng)分存在正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)。見表2。

表2 不同監(jiān)測(cè)時(shí)點(diǎn)患者的IL-15水平與其預(yù)后狀況的相關(guān)性(rp)

*P<0.05，**P<0.001

3 脊柱頸段創(chuàng)傷患者血清IL-15對(duì)患者預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值ROC曲線分析

以脊柱頸段創(chuàng)傷患者術(shù)后96h的血清IL-15水平及臨床癥狀評(píng)分及生活質(zhì)量量表得分總和為篩檢試驗(yàn)定性依據(jù)(以本研究觀察的85例患者術(shù)后96h的血清IL-15水平及臨床癥狀評(píng)分及生活質(zhì)量量表得分總和的均值作為閾值，將患者血清IL-15水平及預(yù)后等級(jí)劃分為兩類)進(jìn)行脊柱頸段創(chuàng)傷患者血清IL-15對(duì)患者預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值ROC曲線分析。結(jié)果顯示ROC曲線下面積為0.824(95%CI：0.748，0.916)，均超過優(yōu)質(zhì)篩檢指標(biāo)的閾值水準(zhǔn)(曲線下面積>0.6)，表明脊柱頸段創(chuàng)傷患者血清IL-15水平對(duì)患者預(yù)后的預(yù)測(cè)具有良好的臨床診斷價(jià)值(圖1)。

圖1 脊柱頸段創(chuàng)傷患者血清IL-15對(duì)患者預(yù)后預(yù)測(cè)價(jià)值的ROC曲線

討 論

本研究發(fā)現(xiàn)，脊柱頸段創(chuàng)傷患者術(shù)前IL-15水平顯著低于術(shù)后24、48、96h，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但術(shù)后24、48、96h之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。據(jù)國(guó)內(nèi)外[3-8]相關(guān)研究報(bào)道，血清IL-15對(duì)于創(chuàng)傷患者急性期增高的意義在于血清IL-15的升高可誘導(dǎo)T細(xì)胞分化，而對(duì)于本研究而言，脊柱頸段創(chuàng)傷患者術(shù)前由于傷口暴露導(dǎo)致內(nèi)源性免疫的相關(guān)通路被激活，且手術(shù)過程本身對(duì)患者而言也是一個(gè)非常強(qiáng)烈的應(yīng)激環(huán)節(jié)，因此術(shù)前到術(shù)后24h血清IL-15水平的急劇上升可能與患者本身病情暴露所形成的外界環(huán)境的刺激有一定的關(guān)聯(lián)。而術(shù)后階段，一方面由于常規(guī)抗感染免疫的使用保證了機(jī)體抗感染功能的基本維持，另一方面由于病情趨于穩(wěn)定機(jī)體所承受的應(yīng)激壓力也相對(duì)下降，因而患者的血清IL-15基本可以維持在較穩(wěn)定的水平。

從脊柱頸段創(chuàng)傷患者各個(gè)監(jiān)測(cè)時(shí)段IL-15水平與其臨床表現(xiàn)、生活質(zhì)量的相關(guān)性來看，患者的IL-15水平主要與其循環(huán)系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、軀體功能、情緒功能存在正相關(guān)，與其他項(xiàng)目則無明顯相關(guān)。有研究[9-10]曾報(bào)道脊柱頸段創(chuàng)傷大多伴有不同嚴(yán)重程度的神經(jīng)系統(tǒng)功能及軀體運(yùn)動(dòng)功能損傷，且二者的損傷機(jī)制存在較多的共同影響因素，從本研究得到的結(jié)論來看IL-15水平可能是其影響因素的其中一環(huán)，但其作用機(jī)制有待進(jìn)一步驗(yàn)證。另外脊柱頸段創(chuàng)傷患者泌尿系統(tǒng)和循環(huán)系統(tǒng)功能的變化可能是由于患者在治療過程中急性炎癥反應(yīng)蛋白的合成量短時(shí)間劇增，給患者的泌尿系統(tǒng)和循環(huán)系統(tǒng)造成一定的動(dòng)力學(xué)負(fù)荷，同時(shí)患者本身在接受治療過程中所使用的某些藥物也可能影響其泌尿系統(tǒng)和循環(huán)系統(tǒng)功能，而相關(guān)的研究顯示IL-15對(duì)于藥物代謝途徑中某些重要酶促反應(yīng)的調(diào)節(jié)具有一定的意義，這也可能是IL-15與對(duì)應(yīng)臨床表現(xiàn)存在相關(guān)性的潛在因素。

最后，本研究結(jié)論表明脊柱頸段創(chuàng)傷患者血清IL-15水平對(duì)患者手術(shù)預(yù)后的預(yù)測(cè)具有良好的臨床診斷價(jià)值，但在臨床上可應(yīng)用于脊柱頸段創(chuàng)傷患者的非特異性指標(biāo)還有很多, 如血清C反應(yīng)蛋白CRP)、降鈣素原(PCT)等[11-12]，這些指標(biāo)大多也可從抗感染的角度提示機(jī)體的免疫功能，因此聯(lián)合上述指標(biāo)與血清IL-15對(duì)脊柱頸段創(chuàng)傷患者進(jìn)行預(yù)后評(píng)估可能具有更好的應(yīng)用前景。