郭靜，柴慈江，通信作者，史燕山，駱建霞，江文

蘋果砧木G.11試管苗增殖與生根培養(yǎng)研究

郭靜1，柴慈江1，通信作者，史燕山1，駱建霞1，江文2

（1. 天津農(nóng)學(xué)院 園藝園林學(xué)院，天津 300384；2. 天津櫻桃谷農(nóng)業(yè)科技發(fā)展有限公司，天津 301908）

將蘋果砧木G.11試管苗莖段分別接種于含有不同濃度的6-BA或KT的MS培養(yǎng)基中，或接種于含有不同濃度6-BA的WPM培養(yǎng)基中進(jìn)行增殖培養(yǎng)。然后再將莖段接種于土壤做支撐物的培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)。結(jié)果表明，6-BA可以明顯促進(jìn)G.11試管苗莖段萌芽與增殖，KT則對此無效；與MS培養(yǎng)基相比，WPM培養(yǎng)基可以顯著降低G.11試管苗的玻璃化率；在含有6-BA 0.5 mg/L的WPM培養(yǎng)基中G.11試管苗的繁殖系數(shù)可達(dá)到4.9，玻璃化率為0；在以黏壤土或砂壤土做培養(yǎng)基支撐物的培養(yǎng)基中G.11試管苗的生根率分別為75.9%和76.7%，且試管苗生有根毛。本結(jié)果將為建立蘋果砧木G.11的離體快速繁殖技術(shù)體系提供依據(jù)。

蘋果砧木G.11；試管苗；增殖；生根

矮化密植栽培是世界蘋果栽培的主要模式，也是我國蘋果栽培發(fā)展的主要趨勢。采用矮化自根砧是國外蘋果矮化密植的主要措施，而我國目前尚缺乏優(yōu)良的矮化自根砧，蘋果矮化密植多采用矮化中間砧或利用短枝型品種的方式進(jìn)行。近些年，國內(nèi)一些單位陸續(xù)從國外引進(jìn)矮化自根砧進(jìn)行試驗(yàn)示范，并初見成效[1]。G.11是天津櫻桃谷農(nóng)業(yè)科技發(fā)展有限公司近年從美國引入的一個(gè)蘋果砧木，屬于半矮化砧[2]。為滿足試驗(yàn)與推廣中對G.11苗木的需求，課題組開展了G.11的離體快速繁殖技術(shù)研究。

目前，國內(nèi)關(guān)于蘋果矮化砧木組培快繁技術(shù)的研究已有許多報(bào)道。郭早霞研究了蘋果砧木M.26的脫毒技術(shù)并改進(jìn)了試管苗生根方法[3]。張慶田[4]、趙亮明等[5]和余亮[6]對M.9的初代、繼代培養(yǎng)、生根及移栽技術(shù)進(jìn)行了研究；周莉?qū).9、Mac9、B9、SH6、SH38、SH40等6種蘋果矮化砧木離體快繁技術(shù)的各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行了優(yōu)化研究[7]。張欣研究了蘋果砧木G.41葉片再生體系的建立并對試管苗的增殖、生根及移栽馴化進(jìn)行了研究[8]。關(guān)于蘋果砧木G.11的組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù)國內(nèi)尚未見研究報(bào)道。

1 材料與方法

以在含有0.5 mg/L 6-BA的MS培養(yǎng)基中繼代培養(yǎng)的蘋果砧木G.11試管苗為試材。生根培養(yǎng)用土為兩種土壤，一種為取自天津農(nóng)學(xué)院東校區(qū)地被植物園的黏壤土，6月份取土后裝入塑料花盆，放置在露天地表，經(jīng)一個(gè)雨季的雨水淋洗后，風(fēng)干，過1 mm篩備用。另一種土壤為取自薊州區(qū)的砂壤土，風(fēng)干后同樣過1 mm篩備用。

1.1 不同細(xì)胞分裂素影響G.11試管苗增殖的試驗(yàn)

以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中分別添加KT和6-BA 2種細(xì)胞分裂素，濃度分別為0.5、1.0、1.5、2.0 mg/L，以不添加植物激素為對照。每種培養(yǎng)基中均加入7 g/L瓊脂為固化劑，pH調(diào)整至5.9，分裝至100 mL三角瓶中，每瓶約40 mL培養(yǎng)基，在121 ℃下滅菌20 min。然后在超凈工作臺中每瓶接種4根長度約1 cm的G.11試管苗莖段，每個(gè)處理接種3瓶共12個(gè)莖段。接種后在恒溫培養(yǎng)室培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：溫度23～28 ℃，光照1 500～3 000 lx，每天光照14 h。培養(yǎng)40 d后調(diào)查試管苗形成的莖尖數(shù)、最大莖長、繁殖系數(shù)、玻璃化率等指標(biāo)。玻璃化率用卡平方法做獨(dú)立性測驗(yàn)，其他指標(biāo)均按照完全隨機(jī)試驗(yàn)單向分組資料的方法作方差分析，并按照鄧肯氏新復(fù)極差法作多重比較。

1.2 不同培養(yǎng)基影響G.11試管苗增殖的試驗(yàn)

分別采用MS和WPM兩種培養(yǎng)基，兩種培養(yǎng)基中均加入1.0 mg/L的6-BA，用7 g/L瓊脂做固化劑，pH調(diào)整至5.9，分裝至100 mL三角瓶中，每瓶約40 mL培養(yǎng)基，在121 ℃下滅菌20 min。然后接種G.11試管苗約1 cm長的莖段，接種莖段數(shù)量與培養(yǎng)條件同試驗(yàn)1.1。培養(yǎng)40 d后調(diào)查試管苗的增殖狀況，調(diào)查的各項(xiàng)指標(biāo)及統(tǒng)計(jì)分析方法均同試驗(yàn)1.1。

1.3 WPM培養(yǎng)基中6-BA濃度影響G.11試管苗增殖的試驗(yàn)

在WPM培養(yǎng)基中分別添加不同濃度的6-BA，設(shè)0、0.5、1.0、1.5 mg/L 4個(gè)處理，各種培養(yǎng)基均以7 g/L瓊脂做固化劑，pH調(diào)整至5.9，分裝至100 mL三角瓶中，每瓶約40 mL培養(yǎng)基，在121 ℃下滅菌20 min。每瓶接種4根長度約1 cm的G.11試管苗莖段，每個(gè)處理接種4瓶共16個(gè)莖段。接種后在恒溫培養(yǎng)室培養(yǎng)，培養(yǎng)條件同試驗(yàn)1.1。培養(yǎng)40 d后調(diào)查試管苗的增殖狀況，調(diào)查的各項(xiàng)指標(biāo)及統(tǒng)計(jì)分析方法均同試驗(yàn)1.1。

1.4 G.11試管苗的土壤支撐生根培養(yǎng)試驗(yàn)

本項(xiàng)試驗(yàn)設(shè)3個(gè)處理：

黏壤土支撐培養(yǎng)：以方形PC瓶為培養(yǎng)瓶，將上述黏壤土與蛭石按照1∶2的體積比混和后加入培養(yǎng)瓶，每瓶加入100 mL。然后每瓶加入60 mL培養(yǎng)液，培養(yǎng)液中含有0.5 mg/L IBA和15 g/L蔗糖的蒸餾水，pH 6.5。培養(yǎng)基配制完成后在121℃下滅菌20 min，然后在超凈工作臺中接種G.11試管苗莖段，每瓶接入8根長約1 cm的G.11試管苗莖段，共接種4瓶32個(gè)莖段。

砂壤土支撐培養(yǎng)：以方形PC瓶為培養(yǎng)瓶，將上述砂壤土與蛭石按照1∶2的體積比混和后加入培養(yǎng)瓶，每瓶加入100 mL。然后每瓶加入60 mL 培養(yǎng)液，培養(yǎng)液的成分和培養(yǎng)基滅菌方法以及G.11試管苗莖段的接種方法及數(shù)量同黏壤土支撐培養(yǎng)。

瓊脂支撐培養(yǎng)（對照）：以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中添加0.5 mg/L的IBA和15 g/L的蔗糖，以7 g/L瓊脂做固化劑，pH為5.9，以100 mL三角瓶為培養(yǎng)容器，每瓶裝入培養(yǎng)基約40 mL，培養(yǎng)基配制完成后在121 ℃下滅菌20 min，然后在超凈工作臺中接種G.11試管苗莖段，每瓶接入4根長約1 cm的G.11試管苗莖段，共接種8瓶32個(gè)莖段。

上述各處理接種后在恒溫培養(yǎng)室培養(yǎng)，培養(yǎng)條件同試驗(yàn)1.1。培養(yǎng)40 d后調(diào)查試管苗的生根率、根長、莖長、葉數(shù)等各項(xiàng)指標(biāo)，生根率用卡平方法作獨(dú)立性測驗(yàn)，其他各項(xiàng)指標(biāo)均按照完全隨機(jī)試驗(yàn)單向分組資料的方法做方差分析，并用鄧肯氏新復(fù)極差法進(jìn)行多重比較。調(diào)查同時(shí)，在顯微鏡下調(diào)查根毛發(fā)生狀況并拍照。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同細(xì)胞分裂素對G.11試管苗增殖培養(yǎng)的效果

由表1可見，除6-BA濃度為1.5 mg/L處理外，其余3個(gè)6-BA濃度處理的新生莖尖數(shù)均顯著高于各KT濃度處理和未添加激素的對照，而4個(gè)6-BA濃度處理之間的新生莖尖數(shù)差異不顯著，4個(gè)KT濃度處理之間以及與對照之間的新生莖尖數(shù)差異也不顯著。結(jié)果表明，6-BA可以明顯促進(jìn)G.11試管苗莖段萌芽，進(jìn)而增加分枝數(shù)量，并且濃度在0.5～2.0 mg/L范圍內(nèi)的6-BA對促進(jìn)G.11試管苗莖段萌芽的效果無明顯差異。在0.5～2.0 mg/L ，KT對G.11試管苗莖段的萌芽沒有促進(jìn)效果。

表1 不同細(xì)胞分裂素對G.11試管苗增殖的影響

KT濃度6-BA濃度新生莖尖數(shù)最大莖長繁殖系數(shù)玻璃化率/% mg·L-1mg·L-1個(gè)mm 0.00.0 0.83bc 1.42b0.90b0.0c 0.50.00.58c 2.75b0.92b0.0c 1.00.0 0.67bc 0.33b0.67b0.0c 1.50.00.50c 1.92b0.75b11.1c 2.00.0 0.83bc 3.00b1.10b0.0c 0.00.52.42a32.50a6.70a68.8b 0.01.02.25a33.13a6.30a86.0a 0.01.5 1.63ab34.38a5.60a86.7a 0.02.02.63a38.13a6.90a94.5a

注：表內(nèi)同列字母不同表示5%水平差異顯著。下同

從最大莖長看，4個(gè)6-BA濃度處理之間差異不顯著，但都顯著高于4個(gè)KT濃度處理及對照，4個(gè)KT濃度處理及對照之間差異均不顯著。這一結(jié)果表明6-BA不僅可以明顯促進(jìn)G.11試管苗莖段萌芽，而且也可以明顯促進(jìn)新生莖的生長。而KT對G.11試管苗莖段新生莖的生長也沒有促進(jìn)作用。

由于6-BA可以明顯促進(jìn)G.11試管苗莖段萌芽及新生莖的生長，因此提高了繁殖系數(shù)，表1中4個(gè)6-BA濃度處理的繁殖系數(shù)均顯著高于各KT濃度處理，6-BA各濃度處理之間差異不顯著，KT各個(gè)濃度處理之間及對照之間差異也不顯著。

從試管苗的玻璃化狀況看，4個(gè)6-BA濃度處理的玻璃化率均顯著高于KT處理及對照，而且隨著6-BA濃度增加玻璃化率有增高的趨勢，6-BA濃度1.0～2.0 mg/L各處理的玻璃化率隨6-BA濃度增加有所增高，但差異不顯著，這3個(gè)濃度處理的玻璃化率均顯著高于6-BA濃度0.5 mg/L處理。

綜合上述分析，在MS培養(yǎng)基中，0.5～2.0 mg/L的KT對G.11試管苗莖段的萌芽及新生莖的生長均沒有明顯的促進(jìn)效果，相同濃度范圍的6-BA 則可以明顯促進(jìn)G.11試管苗莖段萌芽及新生莖的生長，進(jìn)而明顯提高試管苗的繁殖系數(shù)（圖1）。但是6-BA各濃度處理的試管苗的玻璃化率較高，并且隨6-BA濃度增加玻璃化率有增高的趨勢。

圖1 不同細(xì)胞分裂素對G.11試管苗增殖的影響

注：從左至右激素含量為：0.0，KT 0.5，KT 1.0，KT 1.5，KT 2.0，6-BA 0.5，6-BA 1.0，6-BA 1.5，6-BA 2.0 mg/L

2.2 不同培養(yǎng)基對G.11試管苗增殖的影響

由表2可見，在WPM培養(yǎng)基上G.11試管苗的新生莖尖數(shù)略高于MS培養(yǎng)基，但兩者差異不顯著。在MS培養(yǎng)基上G.11形成的最長莖的長度顯著高于WPM培養(yǎng)基，表明MS培養(yǎng)基在促進(jìn)G.11試管苗莖生長方面明顯優(yōu)于WPM培養(yǎng)基。MS培養(yǎng)基的繁殖系數(shù)略高于WPM培養(yǎng)基，但差異也不顯著，而MS培養(yǎng)基上試管苗的玻璃化率則高達(dá)86.0%，顯著高于WPM培養(yǎng)基。

表2 WPM與MS培養(yǎng)基對G.11試管苗增殖的影響

培養(yǎng)基種類新生莖尖數(shù)最大莖長繁殖系數(shù)玻璃化率 個(gè)mm% MS2.6a33.1a6.3a86.0a WPM2.9a16.0b4.3a0.0b

綜合上述分析，WPM培養(yǎng)基上G.11試管苗的繁殖系數(shù)可以達(dá)到4.3并與MS培養(yǎng)基上的試管苗無顯著差異，而且試管苗的玻璃化率為0，明顯低于MS培養(yǎng)基，因此WPM培養(yǎng)基比MS培養(yǎng)基更適合用于G.11試管苗的增殖培養(yǎng)（圖2）。

圖2 G.11試管苗

注：左為WPM培養(yǎng)基，右為MS培養(yǎng)基

2.3 WPM培養(yǎng)基中6-BA濃度對G.11試管苗增殖的影響

由表3可見，6-BA濃度為1.0 mg/L處理的新生莖尖數(shù)最多為3.8個(gè)，顯著高于其他處理，所有添加6-BA處理的新生莖尖數(shù)均顯著高于未添加激素的對照，表明6-BA明顯促進(jìn)了G.11試管苗莖段腋芽的萌發(fā)以分生出新莖尖，并且以1.0 mg/L的6-BA促進(jìn)萌芽的效果最好。

在最大莖長方面則以0.5 mg/L 6-BA濃度處理最長，顯著長于6-BA濃度1.0、1.5 mg/L處理和對照。所有添加6-BA處理的最大莖長均顯著長于對照。這些結(jié)果表明，添加6-BA不僅促進(jìn)了萌芽，也可促進(jìn)新生莖的生長，并且0.5 mg/L 6-BA對新生莖生長的促進(jìn)效果明顯優(yōu)于1.0和1.5 mg/L等較高濃度的6-BA。

所有添加6-BA處理的繁殖系數(shù)均顯著高于對照，而3個(gè)添加6-BA的處理之間的繁殖系數(shù)則差異不顯著，分析其原因，可能是0.5 mg/L 6-BA處理雖然新生莖尖數(shù)較少，但新生莖較長，而較高濃度的6-BA處理的新生莖長較短而新生莖較多，因此，這就導(dǎo)致了各處理最終形成的可以用于再次接種的莖段總數(shù)差異不明顯。

從試管苗的玻璃化率看，6-BA濃度為0.5 mg/L時(shí)的玻璃化率為0，當(dāng)6-BA濃度增加到1.0 mg/L時(shí)玻璃化率顯著增加。6-BA濃度為1.5 mg/L時(shí)玻璃化率雖有增加但與1.0 mg/L處理差異不顯著。

綜上所述，在WPM培養(yǎng)基中加入濃度為0.5 mg/L的6-BAG.11試管苗增殖效果較好，繁殖系數(shù)可達(dá)4.9，而且無玻璃化現(xiàn)象，6-BA使用量也較小，有利于降低成本，因此，該處理為本試驗(yàn)最佳處理。

表3 WPM培養(yǎng)基中6-BA濃度對G.11試管苗增殖的影響

6-BA濃度新生莖尖數(shù)最大莖長繁殖系數(shù)玻璃化率 mg·L-1個(gè)mm% 0.00.4d 1.8c1.3b0.0b 0.52.7c19.2a4.9a0.0b 1.03.8a15.7b5.9a29.2a 1.53.4b12.7b5.1a42.7a

WPM培養(yǎng)基中不同6-BA濃度處理的G.11試管苗生長狀況如圖3所示。

圖3 WPM培養(yǎng)基中不同6-BA濃度對G.11試管苗生長的影響

注：由左至右6-BA濃度為：0.0、0.5、1.0、1.5 mg/L

2.4 G.11試管苗的土壤支撐生根培養(yǎng)效果

由表4可見，黏壤土與砂壤土做培養(yǎng)基支撐物處理的試管苗的生根率分別為76.7%和75.9%，兩者均高于瓊脂做培養(yǎng)基支撐物的處理，但卡平方測驗(yàn)表明，3個(gè)處理之間的生根率差異均不顯著。瓊脂做培養(yǎng)基支撐物處理的根長和根數(shù)均顯著高于兩個(gè)土壤支撐物處理。3個(gè)處理的莖長和葉數(shù)均無顯著差異。

通過顯微鏡下對根系表面的觀察，發(fā)現(xiàn)兩種土壤支撐物處理的根系表面均生有大量根毛，而瓊脂支撐物處理的根表面基本上無根毛。

綜合上述分析，黏壤土和砂壤土做培養(yǎng)基支撐物的處理雖然在根長與根數(shù)方面明顯低于瓊脂支撐物處理，但是生根率、莖長及葉數(shù)等指標(biāo)與瓊脂支撐物處理無明顯差異，而且試管苗根系表面生有根毛，根系形態(tài)結(jié)構(gòu)優(yōu)于瓊脂支撐物處理。因此，在G.11試管苗生根培養(yǎng)中，可以用黏壤土或砂壤土替代瓊脂做培養(yǎng)基支撐物，以降低成本，并為試管苗的帶坨移栽奠定基礎(chǔ)。

表4 不同培養(yǎng)基支撐物對G.11試管苗生根培養(yǎng)的影響

培養(yǎng)基支撐物生根率根長根數(shù)莖長葉數(shù) %mm個(gè)mm個(gè) 黏壤土76.70a124.80b2.60b12.80a4.80a 砂壤土75.90a99.90b2.40b12.90a4.80a 瓊脂56.25a284.33a5.55a10.25a10.59a

圖4、圖5分別為3種培養(yǎng)基支撐物處理的G.11試管苗生根和根毛發(fā)生狀況。

圖4 3種培養(yǎng)基支撐物處理的G.11試管苗生根狀況

注：左為黏壤土，中為砂壤土，右為瓊脂。下同

圖5 3種培養(yǎng)基支撐物處理的G.11試管苗根毛發(fā)生狀況

3 討論與結(jié)論

在蘋果屬植物試管苗的增殖培養(yǎng)中，通常采用促進(jìn)腋芽分枝以形成叢生枝的方式進(jìn)行，而培養(yǎng)基中使用的細(xì)胞分裂素主要是6-BA[9]。在蘋果矮化砧木的組織培養(yǎng)快速繁殖中，也都使用以6-BA為主的培養(yǎng)基[3-8]。在一些草本植物中，在試管苗的增殖培養(yǎng)中使用KT做主要激素取得了較好的效果[10-12]，張翔宇等研究表明，0.4 mg/L的KT可以促進(jìn)木本植物紅豆杉莖段的萌芽[13]，但在蘋果矮化砧木試管苗增殖培養(yǎng)中未見有使用KT的研究。本研究中，比較了6-BA與KT兩種細(xì)胞分裂素對G.11試管苗增殖的影響，表明6-BA可以明顯促進(jìn)G.11試管苗腋芽分枝，這與已有的研究結(jié)果一致。本研究也表明KT對G.11試管苗增殖沒有效果。因此，在G.11試管苗增殖培養(yǎng)中，應(yīng)以使用6-BA為主。

試管苗玻璃化是植物離體快繁中的難題之一。試管苗的玻璃化受多方面因素影響，其中培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素或銨態(tài)氮濃度過高都會加劇試管苗的玻璃化[14]。鄒恩強(qiáng)等研究表明，M.9試管苗玻璃化率隨著培養(yǎng)基中BA濃度的提高而提高，并且當(dāng)MS培養(yǎng)基中銨態(tài)氮減少約一半時(shí)玻璃化率明顯降低[15]。本項(xiàng)研究中，無論使用MS培養(yǎng)基還是使用WPM培養(yǎng)基，G.11試管苗的玻璃化率都隨著6-BA濃度的增加而呈現(xiàn)升高的趨勢，這一結(jié)果與鄒恩強(qiáng)等的研究一致。本項(xiàng)研究中，在WPM培養(yǎng)基中試管苗的玻璃化率明顯低于MS培養(yǎng)基，可能是WPM培養(yǎng)基中銨態(tài)氮的含量明顯少于MS培養(yǎng)基的緣故，對此有待于進(jìn)一步研究。

試管苗的生根培養(yǎng)一般分為瓶內(nèi)生根與瓶外生根兩種方式[16]。蘋果矮化砧木試管苗的瓶內(nèi)生根培養(yǎng)目前都是在瓊脂培養(yǎng)基中進(jìn)行的[3-8]。這種生根方式具有成本較高、移栽困難等不足。柴慈江等以土壤做培養(yǎng)基支撐物進(jìn)行珠美海棠試管苗的生根培養(yǎng)，顯著提高了試管苗的生根率，試管苗生有根毛，而且試管苗可以帶坨移栽并顯著提高成活率[17]。以土做培養(yǎng)基支撐物還可以將試管苗的生根培養(yǎng)放在溫室或露地環(huán)境中進(jìn)行[18-22]，從而進(jìn)一步降低成本。本項(xiàng)研究以黏壤土和砂壤土做培養(yǎng)基支撐物進(jìn)行G.11試管苗生根培養(yǎng)，雖然根長低于瓊脂培養(yǎng)基中的試管苗，但是生根率與瓊脂培養(yǎng)基中培養(yǎng)的試管苗無顯著差異，而且試管苗生有根毛，這與柴慈江等的研究結(jié)果基本一致[17]。

綜上所述，本項(xiàng)研究初步得出以下結(jié)論：6-BA可以明顯促進(jìn)G.11試管苗莖段萌芽與增殖，KT則對此無效；與MS培養(yǎng)基相比，WPM培養(yǎng)基可以顯著降低G.11試管苗的玻璃化率；在含有6-BA 0.5 mg/L的WPM培養(yǎng)基中G.11試管苗的繁殖系數(shù)可達(dá)到4.9，玻璃化率為0；在以黏壤土或砂壤土做培養(yǎng)基支撐物的培養(yǎng)基中，G.11試管苗的生根率分別為75.9%和76.7%，而且試管苗生有根毛，根系結(jié)構(gòu)優(yōu)于瓊脂培養(yǎng)基中的試管苗。本結(jié)果將為建立G.11離體快繁技術(shù)體系提供依據(jù)。

[1] 韓國粉，李紅偉. 介紹幾種蘋果砧木[J]. 西北園藝（果樹），2018（4）：30-33.

[2] 王大江，Bus Vincent G M，王昆，等. 美國蘋果砧木育種歷史、現(xiàn)狀及其商業(yè)化砧木特性[J]. 中國果樹，2018（6）：107-110，113.

[3] 郭早霞. 蘋果砧木‘M26’病毒脫除及生根技術(shù)研究[D].西安：西北大學(xué)，2015.

[4] 張慶田. 幾種蘋果砧木組培技術(shù)的研究[D]. 泰安：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2007.

[5] 趙亮明，王飛，韓明，等. 蘋果砧木組織培養(yǎng)與快繁技術(shù)研究[J]. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2011，20（7）：118-122.

[6] 余亮. 蘋果砧木M9和M26快繁體系的建立及移栽生理研究[D]. 楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2013.

[7] 周莉. 蘋果矮化砧木離體培養(yǎng)和快繁體系建立與優(yōu)化[D].楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2017.

[8] 張欣. 蘋果砧木G.41再生和遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立與優(yōu)化[D]. 楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2014.

[9] 付為國，韋晨，王醒. 蘋果屬植物組織培養(yǎng)的研究進(jìn)展[J].分子植物育種，2019，17（4）：1320-1325.

[10] 尹明華，曹振光. KT和NAA對黃芪帶芽莖段增殖、愈傷誘導(dǎo)和生根的影響[J]. 亞熱帶植物科學(xué)，2011，40（1）：41-44.

[11] 尹明華，王艾平，羅朝暉，等. KT、24-D和NAA對黃獨(dú)組培苗帶芽莖段生長發(fā)育的影響[J]. 亞熱帶植物科學(xué)，2010，39（2）：29-31.

[12] 尹明華. KT和NAA對知母試管苗生長發(fā)育的影響[J]. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，53（3）：607-608，612.

[13] 張翔宇，杜亞填，龔雪元. 南方紅豆杉試管微芽誘導(dǎo)培養(yǎng)及其紫杉醇類化合物的積累[J]. 植物生理學(xué)報(bào)，2012，48（9）：864-868.

[14] 鞏振輝，申書興. 植物組織培養(yǎng)[M]. 2版. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2013.

[15] 鄒恩強(qiáng)，杜希華，李成剛，等. 影響蘋果砧木M9組培苗玻璃化的因素與改善措施[J]. 山東林業(yè)科技，2010（5）：27-30.

[16] 沈海龍. 植物組織培養(yǎng)[M]. 北京：中國林業(yè)出版社，2005.

[17] 柴慈江，盧興霞，蘇衛(wèi)國，等. 珠美海棠試管苗的土壤支撐生根培養(yǎng)和帶坨移栽[J]. 植物生理學(xué)通訊，2010，46（1）：33-36.

[18] 柴慈江，曹海鵬，王瓊，等. 不同溫室培養(yǎng)條件對栒子微枝試管內(nèi)生根和成活的影響[J]. 天津農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，2015，22（2）：11-15.

[19] 韓會會，符玲巧，柴慈江，等. 溫室培養(yǎng)條件對無花果微枝試管內(nèi)生根與成活的影響[J]. 天津農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，2016，23（1）：23-27.

[20] 楊廣艷，王坤英，柴慈江，等. 環(huán)境條件對珠美海棠微枝試管內(nèi)生根與成活的影響[J]. 天津農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，2017，24（4）：17-18.

[21] 宋秋月，韋繞培，柴慈江，等. 露地與培養(yǎng)室環(huán)境對栒子微枝試管內(nèi)生根與成活的影響[J]. 天津農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，2018，25（2）：1-4.

[22] 王然，時(shí)海東，柴慈江，等. 栒子試管苗露地環(huán)境中瓶內(nèi)生根和直接入地移栽研究[J]. 天津農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，2018，25（4）：1-5.

Micro shoot proliferation and rooting of apple rootstock G.11

GUO Jing1, CHAI Ci-jiang1,Corresponding Author, SHI Yan-shan1, LUO Jian-xia1, JIANG Wen2

（1. College of Horticulture and Landscape, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China；2. Tianjin Cherry Valley Agricultural Technological Development Co. Ltd, Tianjin 301908, China）

The stem sections of apple rootstock G.11 plantletwere respectively inoculated in MS media with different concentrations of 6-BA or KT, or inoculated in WPM media with different concentrations of 6-BA for proliferation. The stem sections were respectively inoculated in soil supporting media for rooting. The results showed that 6-BA promoted G.11 micro stem sections budding and proliferation obviously,while KT had no effect on this. Compared with MS medium, WPM medium reduced vitrification rate of G.11 plantletsignificantly. In WPM medium containing 0.5 mg/L of 6-BA, micro shoot multiplication coefficient of G.11 was 4.9 and vitrification rate was 0. Rooting rate of the G.11 micro shoot cultured in clay soil or sandy soil supporting media were 75.9% and 76.7%, respectively. Moreover, the plantlet had root hair. These results provide basic data for establishing the micro rapid propagation technique of G.11.

apple rootstock G.11; micro shoot; multiplication; rooting

1008-5394（2019）04-0038-05

10.19640/j.cnki.jtau.2019.04.008

S604.3；S723.123.6

A

2019-07-16

天津市林果現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目（ITTFPRS2018002）

郭靜（1996-），女，本科在讀，主要從事園藝植物組織培養(yǎng)方面的研究。E-mail：1062594710@qq.com。

柴慈江（1960-），男，教授，碩士，主要從事園藝植物組織培養(yǎng)方面的研究。E-mail：cijiang666@163.com。

責(zé)任編輯：楊霞