陳敏 高雄兵/.云南省計量測試技術(shù)研究院；.昆明源瑞制藥有限公司

0 引言

液相色譜儀[1]是化學(xué)分析中發(fā)展最快、應(yīng)用最廣的分析儀器，液相色譜法具有分析速度快、分離效能好和靈敏度高等優(yōu)點，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于藥品檢驗、產(chǎn)品檢測、農(nóng)殘檢測等各個方面。新購買未經(jīng)過檢定的液相色譜儀需要根據(jù)JJ G705-2014《液相色譜儀》檢定規(guī)程的規(guī)定進(jìn)行首次檢定，首次檢定[2]需要檢定的項目有：輸液系統(tǒng)的泵耐壓、泵流量設(shè)定值誤差和流量穩(wěn)定性、梯度誤差、柱溫箱中溫度設(shè)定值誤差和溫度穩(wěn)定性、檢測器中的基線噪聲、基線漂移、最小檢測濃度、波長示值誤差和重復(fù)性以及線性范圍、整機的定性定量重復(fù)性這十二個項目。本文就液相色譜儀紫外檢測器首次檢定項目中線性范圍的檢定，經(jīng)思考和實踐后提出一種新的檢定方法，并與文獻(xiàn)中的方法進(jìn)行比較。

1 實驗部分

根據(jù)JJG 705-2014的規(guī)定，液相色譜儀首次檢定中線性范圍是必檢項目。在后續(xù)檢定中，一些客戶也可能存在線性范圍檢定的需求。線性范圍是儀器檢測的準(zhǔn)確性指標(biāo)，儀器線性的好壞直接關(guān)系到該儀器定量是否準(zhǔn)確，是關(guān)乎儀器質(zhì)量的一項重要指標(biāo)。作者查閱了相關(guān)文獻(xiàn)，文獻(xiàn)[3]報道一種檢定線性范圍的方法是，將用于線性范圍檢定的不同濃度丙酮-2%異丙醇水溶液作為樣品，采用2%異丙醇水溶液作為流動相，進(jìn)相同體積不同濃度的丙酮-2%異丙醇水溶液，以丙酮的峰面積與濃度作標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)文獻(xiàn)方法進(jìn)行檢定得出的具體數(shù)據(jù)見表1（儀器型號：LC-2030C、編號：L21445403387AE，生產(chǎn)廠家：SHIMADZU），線性圖見圖1。

根據(jù)實際工作經(jīng)驗提出一種新的線性范圍檢定方法，將不同濃度丙酮-2%異丙醇水溶液作為成流動相（不過色譜柱），先用0.1%濃度的待測溶液作為流動相，等待基線穩(wěn)定后依次更換不同濃度的丙酮-2%異丙醇系列水溶液，每更換一個濃度的流動相需要等待儀器示值穩(wěn)定，記錄不同濃度下儀器基線穩(wěn)定后的響應(yīng)信號值（類似梯度誤差檢定方法）。作者用該方法對一臺液相色譜儀（型號：LC-2030C、編 號：L21445403387AE，生 產(chǎn)廠家：SHIMADZU）的線性范圍進(jìn)行檢定，數(shù)據(jù)見表2，線性圖見圖2。用該方法對另一臺液相色譜儀進(jìn)行2次實驗（型號：LC-3030C、編號：L21445510176AE，生產(chǎn)廠家：SHIMADZU），具體數(shù)據(jù)見表3，線性圖見圖3、圖4。

表1 將不同濃度的丙酮-2%異丙醇水當(dāng)做樣品進(jìn)樣的線性范圍數(shù)據(jù)

圖1 表1數(shù)據(jù)線性圖

表2 將不同濃度的丙酮-2%異丙醇水作為流動相的線性范圍數(shù)據(jù)

圖2 表2數(shù)據(jù)線性圖

2 結(jié)果討論

從圖1可以看出，將不同濃度的丙酮-2%異丙醇水溶液當(dāng)成樣品進(jìn)樣的方法進(jìn)行線性范圍的檢定得出的實驗數(shù)據(jù)線性較好，該方法容易操作，解決了直接將樣品注入檢測池中儀器響應(yīng)值不易穩(wěn)定下來的問題，且需要的樣品量少，所需時間也大大縮短。但是帶來更多的影響因素，泵流速和流量的穩(wěn)定性以及進(jìn)樣誤差的影響，因此在計算不確定度時應(yīng)考慮上述影響因素。

表3 將不同濃度的丙酮-2%異丙醇水作為流動相的線性范圍數(shù)據(jù)

圖3 表3第1組數(shù)據(jù)線性圖

從圖2、3、4可以看出，使用將不同濃度的丙酮-2%異丙醇水溶液作為流動相來進(jìn)行線性范圍的檢定方法，通過對不同儀器分別進(jìn)行三次實驗得出數(shù)據(jù)的線性均很好，證明這一方法是可行且可靠的。該方法較規(guī)程方法容易操作，也解決了直接將樣品注入檢測池中儀器響應(yīng)值不易穩(wěn)定下來的問題，但所需樣品量較文獻(xiàn)方法大，所需時間較長，對于更換了流動相需要排氣泡且基線自動歸零的儀器，這一方法不適用。使用該方法進(jìn)行線性范圍檢定，在計算不確定度時應(yīng)考慮泵流速和流量穩(wěn)定性兩個影響因素。

圖4 表3第2組數(shù)據(jù)線形性圖

需要特別注意的是，按照J(rèn)JG 705-2014中規(guī)定的方法進(jìn)行紫外檢測器線性范圍檢定時，應(yīng)同時用低濃度的丙酮-2%異丙醇水溶液進(jìn)行最小檢出濃度的檢定[計算公式同規(guī)程中公式（8）]，不能直接代入檢定規(guī)程中用萘-甲醇溶液做出的最小檢測濃度值來計算線性誤差，因為用丙酮溶液得出的最小檢出濃度與萘-甲醇溶液得出的最小檢出限值不一樣，且用同一溶液得出的檢出上限和最小檢出限才具有可比性，計算出的結(jié)果才更能反映儀器線性范圍的準(zhǔn)確性。根據(jù)實踐經(jīng)驗，做最小檢出限的丙酮-2%異丙醇水溶液的濃度通常較0.1%丙酮-2%異丙醇水溶液低至倍或更低，也可根據(jù)儀器自身情況來具體確定。

3 結(jié)語

本文針對液相色譜儀首次檢定中的線性范圍檢定方法進(jìn)行了探討，結(jié)合實際工作經(jīng)驗提出了一種新的方法，并與文獻(xiàn)方法進(jìn)行了比較，希望可以對液相色譜儀線性范圍的檢定有所幫助。