吳倩 周圍 董延江
摘要:通過對三種“瘦肉精”快速檢測技術(即膠體金免疫層析法、酶聯(lián)免疫吸附法和熒光定量免疫層析技術方法)及現(xiàn)階段遼寧省快速檢測配套技術的分析研究,關注國內外新型檢測技術,旨在拓展工作思路,完善遼寧省“瘦肉精”快速檢測技術,為進一步提高快速檢測技術水平和維護畜產品安全提供理論依據(jù)與參考。
關鍵詞:瘦肉精;快速檢測;畜產品;食品安全
食品安全關系到人民群眾的身體健康和生命安全,關系到經濟健康發(fā)展和社會穩(wěn)定。對大多數(shù)人而言,“瘦肉精”不是一個陌生名詞,每年都會曝出相關事件,將肉類食品安全問題一次次地擺到大眾面前。有效檢測家畜飼養(yǎng)戶在飼養(yǎng)過程中是否使用“瘦肉精”是各級畜產品安全監(jiān)察部門的重要職責。本文通過對遼寧省“瘦肉精”快速檢測技術現(xiàn)狀展開研究,對比分析三種快速檢測技術,對提升遼寧省畜產品“瘦肉精”檢測水平,優(yōu)化檢測技術方法,打擊與震懾有關違法行為,具有重要意義。
1遼寧省“瘦肉精”快速檢測工作開展情況
從2011年開始,遼寧省每年均對重點區(qū)域進行監(jiān)督監(jiān)測,并以每年5%~1 0%逐年遞增檢測頻次,監(jiān)測區(qū)域也從重點區(qū)域向遼寧省所有規(guī)模養(yǎng)殖企業(yè)全覆蓋推進。隨著監(jiān)督監(jiān)測批次逐年遞增,監(jiān)督抽檢人員已熟練掌握現(xiàn)場抽取動物尿液、快速檢測卡使用及抽樣單規(guī)范化填寫等業(yè)務工作,工作認真嚴謹,“瘦肉精”違法行為也在逐年下降。2013~2018年遼寧省“瘦肉精”檢測批次及案件查處數(shù)見圖1。因此,“瘦肉精”的日??焖佻F(xiàn)場檢測是“瘦肉精”監(jiān)督監(jiān)測行之有效的技術方法,對“瘦肉精”違法行為充分發(fā)揮震懾作用。
2現(xiàn)階段遼寧省采用的幾種“瘦肉精”快速檢測方法及配套技術
2.1膠體金免疫層析法
免疫膠體金檢測試劑實際上是免疫膠體金標記技術和抗原抗體反應相結合而形成的一種應用形式,相比ELISA試劑,除標記物不同外,同樣服從于抗原抗體反應的特性。此種檢測方法具有方便使用,操作簡單,業(yè)務人員無需經過特殊培訓等優(yōu)點。可短時間獲得檢測結果,一般5~10分鐘即可得出初步的定性結論。相比而言,其生產成本和檢測成本均較低。目前使用比較廣泛的是單一“瘦肉精”的快速檢測卡,近年來多合一的快速板也逐漸投入使用。
同時,經過了幾年的檢測和陽性確證,我們發(fā)現(xiàn)使用快速檢測試紙檢測,存在幾方面的不足。一是出現(xiàn)假陽性的較多,工作量提升,同時給工作帶來諸多問題;二是只有當標記物膠體金顆粒集聚到一定量時,才能觀察到膠體金的紅色條帶,檢測靈敏度低,難以達到國家要求;三是采用肉眼判讀檢測結果,當檢測線顯色比較模糊時,可能引起誤判或漏判。
2.2酶聯(lián)免疫吸附法
這種技術目前國內已經比較成熟,市場上有大量商品化的檢測試劑盒,一般縣級的檢測機構均可進行檢測。該技術在保留膠體金免疫層析技術操作簡便、檢測快速、便攜性強的優(yōu)點外,還通過熒光示蹤增強技術實現(xiàn)了檢測結果的精確定量,而傳統(tǒng)的膠體金免疫層析試紙條只能進行初步定性。
但該檢測法在現(xiàn)場快速檢測中就體現(xiàn)出其局限性,一是檢測過程需有經驗的實驗室人員使用酶標儀儀器進行操作,且需對樣品進行預處理,檢測繁瑣、時間較長;二是對試劑的選擇性高,以半定量為主,不能同時分析多種成分,對結構類似的化合物有一定程度的交叉反應,分析分子量很小的化合物或很不穩(wěn)定的化合物有一定的困難,也易產生假陽性;三是價格較膠體金測試紙昂貴很多。
2.5熒光定量免疫層析技術
李懷明建立了鹽酸克倫特羅熒光微球免疫層析試紙條定量檢測方法,通過實際樣品分析鹽酸克倫特羅熒光微球試紙條定量分析結果與相應的ELSA試劑盒具有較好的相關性。該技術與傳統(tǒng)快速檢測技術性能比較,具有一定優(yōu)勢:一是靈敏度更高,檢測信號具有較高的信噪比,更高的信號檢測量和檢測靈敏度;二是檢測范圍更寬,與傳統(tǒng)光度百分率分析及光密度掃描分析技術不同,該技術熒光直接激發(fā)發(fā)光,熒光信號強度與熒光微球數(shù)量呈直線相關,同時避免酶催化發(fā)光催化效率及底物量限制等問題,定量范圍與反應體系內參與反應的特異性蛋白量直接相關;三是價格低廉,與傳統(tǒng)定量檢測技術如酶聯(lián)免疫吸附法相比,該技術具有檢測快速、價格低廉等優(yōu)點。但就反應時間和造價方面與膠體金免疫層析法相比,不如膠體金反應迅速、價格低廉。而性能指標遠遠高于其它快速檢測技術,接近全自動化學發(fā)光檢測技術水平,該技術的其它缺點還需在試驗推廣過程中不斷總結發(fā)現(xiàn)。
2.4遼寧省快速檢測配套技術
一是遼寧省畜產品安全監(jiān)察所設計研發(fā)了新型家畜尿液采集裝置,可以更加方便、高效的采集家畜尿液;二是在全國率先研制出便攜式“瘦肉精”快速檢測恒溫箱,解決了“瘦肉精”快速檢測卡在低溫情況下檢測結果不準確問題;三是試點運用熒光定量免疫層析技術進行現(xiàn)場快速檢測。
3近年來新型檢測技術
我國在分析技術上,王培龍等采用分子印跡和質譜分析,建立家畜尿液中痕量β受體激動劑類藥物快速篩選和確證分析方法。中國農業(yè)科學院農業(yè)質量標準與檢測技術研究所,采用上轉發(fā)光法技術(uPT),研發(fā)了有毒有害物質高靈敏度速測系統(tǒng)以及克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇等3種“瘦肉精”的配套試劑,性能優(yōu)勢明顯。顏毅堅等研發(fā)出離子遷移譜儀可快速檢驗家畜毛發(fā)、尿液和飼料中的鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇和特布他林,進行定性。中國農業(yè)科學院北京畜牧獸醫(yī)研究所研發(fā)了利用反芻動物毛發(fā)檢測“瘦肉精”的方法,監(jiān)管技術實現(xiàn)突破。李志成利用表面增強拉曼光譜快速分析D受體激動劑,建立靈敏度高、簡單、快速的D受體激動劑檢測新方法以滿足監(jiān)管,特別是現(xiàn)場快速檢測需要。而外國學者,Lin等設計制作一種規(guī)模集成競爭免疫微流控芯片,可實現(xiàn)瘦肉精的高通量、快速、自動化分析。zhang等研制了基于納米金顏色變化的克倫特羅快速比色傳感器。He等研制一種用于克倫特羅測定無標記電子學免疫傳感器。
綜上所述,遼寧省畜產品“瘦肉精”檢測技術較為有效,達到國家要求,但仍存在假陽性率高、檢測靈敏度低、肉眼判讀易誤判或漏判、檢測繁瑣或時間較長等情況,需進一步完善。遼寧省畜產品安全監(jiān)察所現(xiàn)有的打擊“瘦肉精”違法行為配套技術如家畜尿液采集裝置、便捷式“瘦肉精”快速檢測恒溫箱均達到國內領先水平,具有廣泛推廣價值。而近年來的一些先進檢測技術仍需要特定的儀器或試劑,尚處于實驗室階段,還未推廣使用。
今后遼寧省還應從加快畜產品追溯體系建設、加強畜產品安全源頭監(jiān)管、健全法律法規(guī)、規(guī)范標準體系及繼續(xù)推進和完善畜產品安全監(jiān)管行政問責制度等方面進一步加強“瘦肉精”監(jiān)督管理。各級機構要不斷健全本級畜產品安全應急處置預案,適時組織“瘦肉精”應急演練,明確職責,熟悉流程。同時,開展輿情監(jiān)測,正確研判輿情,及時報送信息。嚴格落實“瘦肉精”監(jiān)督檢查機制,有效開展“瘦肉精”監(jiān)測,保持高壓嚴打態(tài)勢。