李曉軍,陶麗梅,朱占弟,聶元華,陳敏學(xué),王 琛*

(蘭州大學(xué)第二醫(yī)院a.普外科四病區(qū);b.婦產(chǎn)科,中國甘肅蘭州730030)

周期蛋白依賴性激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)是調(diào)節(jié)各種細(xì)胞過程的重要激酶,可分為細(xì)胞周期相關(guān)的CDKs(如CDK1/2/4/6)及轉(zhuǎn)錄相關(guān)的CDKs(如CDK7/8/9/11/12/13)。細(xì)胞周期相關(guān)的CDKs主要通過調(diào)控機(jī)體細(xì)胞周期中各個時期的進(jìn)展,直接影響細(xì)胞的增殖;轉(zhuǎn)錄相關(guān)的CDKs主要通過磷酸化C末端域的RNA結(jié)合蛋白1(RNA binding protein 1,Rbp1),調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄(表1)。Rbp1是RNA聚合酶Ⅱ(RNA polymeraseⅡ,RNA polⅡ)的最大亞基,也是主要的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子。由于腫瘤細(xì)胞中廣泛存在CDK失控及Rbp1等轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的異常轉(zhuǎn)錄,因此Rbp1很有可能成為新的腫瘤治療靶點[1～2]。

CDK12是一種轉(zhuǎn)錄相關(guān)的CDK,可使RNA聚合酶Ⅱ碳端氨基酸(carboxy terminal domain of RNA polymerase Ⅱ,RNA pol II CTD)磷酸化,這對于DNA損傷修復(fù)(DNA damage repair,DDR)、mRNA剪接以及細(xì)胞增殖和分化至關(guān)重要[9]。研究表明,在多種惡性腫瘤(特別是乳腺癌)中廣泛存在CDK12的基因突變和過表達(dá),抑制腫瘤中CDK12的表達(dá),將有助于人們對CDK12具體生理功能的了解[10]。目前,CDK12抑制劑的相關(guān)研究日益受到人們關(guān)注,此類抑制劑作為部分腫瘤靶向藥物治療的前景廣闊[10～11]。本文初步探討了當(dāng)前CDK12在正常細(xì)胞及某些腫瘤細(xì)胞發(fā)生、發(fā)展中的作用,這可能為存在CDK12表達(dá)異常的腫瘤的靶向藥物研究提供幫助。

表1 轉(zhuǎn)錄相關(guān)CDKs的比較Table 1 The comparison of transcription-related CDKs

1 CDK12簡介

2001年,Ko等[12]通過對HeLa細(xì)胞cDNA的研究發(fā)現(xiàn)了一種新的轉(zhuǎn)錄相關(guān)激酶,并將其命名為CrkRS(Cdc2-related kinase with an arginine/serinerich domain)。CrkRS由1 490個氨基酸組成,具有一個激酶結(jié)構(gòu)域和脯氨酸、絲氨酸富集區(qū),屬于典型的RS蛋白(arginine/serine-rich proteins,RS proteins)家族反式作用因子[12]。2006 年,Chen 等[13]研究發(fā)現(xiàn)CDK12主要結(jié)合細(xì)胞周期蛋白L1和L2,而細(xì)胞周期蛋白L1和L2位于剪接因子區(qū),C端含精氨酸和絲氨酸富集的結(jié)構(gòu)域,故CrkRS被重新命名為CDK12。CDK12主要定位于人染色體17q12-pter[14]。Moradian 等[15]通過針對果蠅 CDK12的克隆實驗發(fā)現(xiàn),細(xì)胞周期蛋白K(cyclin K)為主要的CDK12結(jié)合的細(xì)胞周期蛋白。在體外,cyclin K/CDK12復(fù)合物可使RNA polⅡCTD磷酸化,即CDK12為RNA polⅡCTD致活酶[15]。與此同時,通過開展哺乳動物細(xì)胞中cyclin K與CDK12的免疫沉淀反應(yīng)和質(zhì)譜分析,Bla?ek等[16]得出CDK12與cyclin K的結(jié)合不但可使RNA polⅡCTD磷酸化,促進(jìn)細(xì)胞轉(zhuǎn)錄,而且還與BRCA1(breast cancer susceptibility gene 1)、ATR(ataxia telangiectasia and Rad3-related)、FANC1(Fanconi anemia complementation group 1)和FANCD2(Fanconi anemia complementation group D2)等維持細(xì)胞基因穩(wěn)定性和參與DDR的關(guān)鍵因子表達(dá)有關(guān)。此外,B?sken等[17]研究發(fā)現(xiàn)CDK12也可能作用于RNA polⅡCTD以外的底物,如轉(zhuǎn)錄因子或剪接因子等。這些研究表明CDK12可能與轉(zhuǎn)錄調(diào)控及RNA剪接等細(xì)胞過程具有相關(guān)性。然而,除RNA polⅡCTD以外,CDK12其他的磷酸化作用靶點和其相關(guān)的生物學(xué)機(jī)制仍有待闡明。

在人類基因組中,最接近CDK12的同源基因是CDK13。CDK13也被稱為CDC2L5(cell division cycle 2-like protein kinase 5),含有一個與CDK12激酶域高度序列一致性的激酶結(jié)構(gòu)域(圖1)[18]。與CDK12相類似,CDK13也能使RNA polⅡCTD磷酸化,且也能結(jié)合cyclin K形成一個獨立的復(fù)合物[19],但是CDK13的作用靶點并不在RNA polⅡCTD Ser2/5。目前對于CDK13的研究遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于CDK12,其功能和作用機(jī)制不甚清楚[19]。由于CDK13與CDK12的基因編碼序列相似,也有人認(rèn)為這兩個激酶可能具有相似的生理功能[19]。

2 CDK12生理功能

2.1 CDK12參與轉(zhuǎn)錄調(diào)控

圖1 CDK12與CDK13的結(jié)構(gòu)示意圖(參照文獻(xiàn)[18]修改)CDK12與CDK13都具有富含精氨酸/絲氨酸(arginine/serine-rich,RS)、富含脯氨酸(proline-rich,PRM)的結(jié)構(gòu)域以及激酶結(jié)構(gòu)域(kinase domain,KD),但與CDK13相比,CDK12中富含丙氨酸(alanine-rich,Ala)、絲氨酸(serine-rich,SR)結(jié)構(gòu)域相對較少。Fig.1 The structure schematics of CDK12 and CDK13(revised by reference[18])CDK12 and CDK13 both have arginine/serine-rich(RS),proline-rich(PRM)domains and kinase domain(KD),but compared with CDK13,CDK12 has less alanine-rich(Ala)and serine-rich(SR)domains.

研究表明CDK12可使果蠅和人類細(xì)胞中RNA polⅡCTD的2號位絲氨酸(Ser2)磷酸化,促進(jìn)細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄延伸,但下調(diào)CDK12活性并不影響整體轉(zhuǎn)錄速率[16～17]。Li等[20]研究發(fā)現(xiàn) CDK12 是果蠅細(xì)胞中核呼吸因子2(nuclear respiratory factor 2,Nrf2)相關(guān)基因表達(dá)的關(guān)鍵酶之一,然而抑制CDK12活性,并不影響大量的DNA轉(zhuǎn)錄和mRNA翻譯。因此,CDK12可能只是促進(jìn)某一組特定基因轉(zhuǎn)錄的蛋白激酶,抑制CDK12的表達(dá)在一定程度上并不影響轉(zhuǎn)錄的整體速率[20]。最近有研究指出,在短暫沉默的RNA PolⅡ釋放進(jìn)入轉(zhuǎn)錄延伸階段后,CDK12可通過完全調(diào)控PolⅡ相關(guān)因子1(PolⅡ-associated factor 1,Paf1)而募集機(jī)體轉(zhuǎn)錄的基因[21];在使用特異性抗CDK12抗體進(jìn)行染色質(zhì)免疫共沉淀測序(chromatin immunoprecipitation sequencing,ChIP-Seq)實驗時Chirackal等[22]發(fā)現(xiàn),CDK12能夠與RNA polⅡ編碼基因、啟動子以及具有轉(zhuǎn)錄活性的增強(qiáng)子結(jié)合,而且ChIP-Seq結(jié)果顯示CDK12與RNA polⅡ部分序列相重疊。這似乎進(jìn)一步解釋了CDK12可能只促進(jìn)某一組特定基因的轉(zhuǎn)錄。Johannes等[23]研發(fā)了一種CDK12抑制劑,即dinaciclib(SCH 727965),研究表明低劑量的dinaciclib(SCH 727965)會降低核心DDR基因如 BRCA1、FANCF(Fanconi anemia complementation group F)和ERCC4(excision repair cross-complementing group 4)的轉(zhuǎn)錄速率;而高劑量的dinaciclib(SCH 727965)卻只會降低超級增強(qiáng)子相關(guān)基因的表達(dá),與轉(zhuǎn)錄的整體速率無明顯相關(guān)性。

CDK12調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄的特異性主要與CTD中特定絲氨酸有關(guān)。之前的研究表明,在體內(nèi)外CDK12均可使RNA polⅡCTD Ser2磷酸化,促進(jìn)轉(zhuǎn)錄[16～17]。為了明確 CDK12 底物的性質(zhì),B?sken等[17]進(jìn)行了體外激酶實驗和免疫沉淀反應(yīng)實驗,結(jié)果表明CDK12可使RNA polⅡCTD Ser2和Ser5磷酸化,但此過程需要在RNA polⅡCTD Ser7輔助的基礎(chǔ)上進(jìn)行(圖2)[24]。盡管抑制HeLa中CDK12的活性將導(dǎo)致細(xì)胞生長障礙,但這種改變對HeLa中RNA polⅡCTD相關(guān)絲氨酸整體磷酸化水平的影響不大[10～11]。Zhang等[11]研究表明抑制CDK12活性將導(dǎo)致RNA polⅡCTD Ser2磷酸化效率降低,但RNA polⅡCTD Ser5或Ser7的磷酸化卻不受影響。RNA polⅡCTD底物特異性研究一直依賴于CTD特異性抗體,如H5、H14抗體等,但這些抗體的特異性易受到CTD修飾底物的影響[25],使結(jié)果產(chǎn)生偏倚,故所得出的結(jié)論也容易受到質(zhì)疑。Schuller等[26]研發(fā)了一種適用于修飾RNA polⅡCTD及質(zhì)譜分析的細(xì)胞株,這可能為闡明CDK12及其他CDKs中單個CTD絲氨酸的特異性提供了一種有價值的途徑。

CDK12除了調(diào)控轉(zhuǎn)錄延伸外,還參與轉(zhuǎn)錄終止(圖3)[24]。裂解刺激因子77(cleavage stimulation factor 77,CstF77)是多聚腺苷酸化的重要因子之一,CDK12可通過招募CstF77使RNA polⅡCTD Ser2磷酸化,后者與MYC(myelocytomatosis oncogene)基因多聚腺苷酸化相偶聯(lián)并共同作用于mRNA 3＇末端,從而終止轉(zhuǎn)錄[27]。CDK12的缺失使RNA polⅡCTD Ser2磷酸化效率減弱、裂解刺激因子64(cleavage stimulation factor 64,CstF64)減少,導(dǎo)致EGF(epidermal growth factor)信號激活后c-Fos(cellular oncogene fos)基因的3＇端修復(fù)受損,進(jìn)而影響mRNA的轉(zhuǎn)錄終止[17]。

轉(zhuǎn)錄延伸和終止是基因表達(dá)的重要調(diào)控步驟,這些過程的失調(diào)可能會改變抑癌基因或致癌基因的表達(dá)水平,從而影響腫瘤的發(fā)生發(fā)展。目前,CDK12在轉(zhuǎn)錄調(diào)控中的具體作用機(jī)制尚不完全清楚。CDK12是否會影響細(xì)胞整體轉(zhuǎn)錄或者它是否作為一種特異性的激酶作用于某一組獨特的基因(如DDR或增強(qiáng)子相關(guān)基因)而調(diào)控轉(zhuǎn)錄這一根本性問題仍未闡明。

2.2 CDK12參與RNA剪接

圖2 CDK12參與轉(zhuǎn)錄延伸(參照文獻(xiàn)[24]修改)CDK12在RNA PolⅡCTD Ser7的輔助下使RNA PolⅡCTD Ser2/Ser5磷酸化,促進(jìn)轉(zhuǎn)錄延伸。Fig.2 CDK12 is involved in transcriptional extension(revised by reference[24])CDK12 phosphorylates RNA PolⅡCTD Ser2/Ser5 with the help of RNA PolⅡCTD Ser7,facilitating transcriptional elongation.

Moradian等[15]應(yīng)用質(zhì)譜分析確定了組成剪接體的幾個因子,包括splicing factor 2;SF2/alternative splicing factor;ASF、splicing component 35;SC35、serine/arginine rich protein 40、55、75;SRp40、SRp55和SRp75等。后續(xù)研究表明這些因子與CDK12調(diào)控的RNA剪接密切相關(guān),但其中大多數(shù)尚未被分子內(nèi)剪接測定和免疫沉淀反應(yīng)所證實[10,12]。相關(guān)研究表明在果蠅神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程中,CDK12參與了軸突蛋白IV與mRNA結(jié)合蛋白HOW的選擇性剪接[21]。另外,在RNA序列檢測實驗中,Tien等[28]通過對Her2陽性的乳腺癌細(xì)胞、三陰乳腺癌細(xì)胞、正常乳腺上皮細(xì)胞MISO進(jìn)行可變剪接分析,發(fā)現(xiàn)CDK12可選擇性地調(diào)控3＇端外顯子的可變剪接以及最后一個外顯子的可變剪接。盡管越來越多的研究表明CDK12參與RNA剪接(圖4)[24],但CDK12在RNA剪接這一過程中的具體作用及可能的作用機(jī)制仍有待研究。

圖3 CDK12參與轉(zhuǎn)錄終止(參照文獻(xiàn)[24]修改)CDK12通過募集CstF77等多聚腺苷酸化因子使RNA聚合酶Ⅱ磷酸化,后者作用于mRNA 3＇端,終止基因表達(dá),促進(jìn)轉(zhuǎn)錄終止。Fig.3 CDK12 is connected to the transcription termination(revised by reference[24])CDK12 phosphorylates RNA polymeraseⅡby recruiting polyadenylation factors such as CstF77,which acts on the 3＇end of mRNA to block gene expression and terminate transcription.

2.3 CDK12參與細(xì)胞成熟和分化

盡管目前已經(jīng)檢測到哺乳動物組織、細(xì)胞中存在CDK12的廣泛表達(dá),但不同組織、器官中CDK12的表達(dá)水平均有差異。比如：mRNA檢測發(fā)現(xiàn)在人類睪丸、卵巢、白細(xì)胞和腎上腺中CDK12表達(dá)水平較高[16]。此外,在小鼠胚胎干細(xì)胞、睪丸細(xì)胞中CDK12蛋白水平普遍高于其他分化程度較高的小鼠細(xì)胞[29],這表明隨著分化程度的增高CDK12的表達(dá)水平越低。Chen等[30]研究發(fā)現(xiàn)CDK12和(或)CDK13的缺失可能會降低CDK5的表達(dá),導(dǎo)致軸突生長減少,抑制神經(jīng)元發(fā)育和分化。與之相類似的小鼠胚胎研究發(fā)現(xiàn),體外培養(yǎng)去除CDK12或(和)cyclin K的囊胚,由于細(xì)胞凋亡增加和DNA損傷修復(fù)機(jī)制的受損,導(dǎo)致細(xì)胞無法大量增殖[31]。免疫沉淀與免疫印跡檢測發(fā)現(xiàn)CDK12在小鼠胚胎干細(xì)胞中高表達(dá),但CDK12/cyclin K復(fù)合物的表達(dá)卻不明顯[32],且cyclin K的表達(dá)水平隨著小鼠胚胎干細(xì)胞分化程度的增高而降低,并與Oct4(octamer-binding transcription factor 4)、Sox(Sryrelated high mobility group box)和Nanog等維持細(xì)胞多能性蛋白質(zhì)的表達(dá)水平相關(guān)[32]。另有研究報道,提高秀麗隱桿線蟲細(xì)胞中CDK12/cyclin K復(fù)合物的活性,可增強(qiáng)秀麗隱桿線蟲生殖系中RNA polⅡCTD Ser2的磷酸化水平,使其繁殖能力大幅度提高[33]。雖然,上述研究大部分證實CDK12在促進(jìn)細(xì)胞的分化成熟方面扮演了極為重要的角色,但其發(fā)揮作用的可能機(jī)制尚未見報道,仍有待于進(jìn)一步探索。

圖4 CDK12參與RNA剪接(參照文獻(xiàn)[24]修改)CDK12與剪接體組成因子共同作用于pre-RNA,調(diào)節(jié)pre-mRNA剪接。Fig.4 CDK12 is linked with RNA splicing(revised by reference[24])CDK12 associates with a component factor of the splicing body to act on RNA sequences and regulate pre-mRNA splicing.

2.4 CDK12參與DNA損傷修復(fù)

雖然CDK12在細(xì)胞中的具體功能及作用機(jī)制尚不完全清楚,但很明顯它在DDR中發(fā)揮著極為重要的作用[30]。研究表明,抑制CDK12使得BRCA1、ATR、FANCI、FANCD2 等維持基因穩(wěn)定性關(guān)鍵因子的表達(dá)減低,同源重組(homologous recombination,HR)轉(zhuǎn)錄活性受到抑制,DNA雙鏈斷裂修復(fù)效率減低,DDR過程受阻[8,13];CDK12/cyclin K復(fù)合物的失活,一方面導(dǎo)致內(nèi)源性DNA損傷增加,另一方面使細(xì)胞中有效執(zhí)行同源重組的能力受損,進(jìn)而導(dǎo)致DDR障礙[20,34]。盡管CDK12在DDR中的具體作用機(jī)制尚不完全清楚,但可以肯定的是CDK12在維持基因組穩(wěn)定性和HR轉(zhuǎn)錄活性、促進(jìn)DNA損傷修復(fù)中具有不可替代的作用。DDR受損和DNA損傷累積是癌癥的典型特征之一[35],以上結(jié)果表明CDK12缺乏與腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。

3 CDK12與腫瘤的發(fā)生發(fā)展

3.1 CDK12缺失可能促進(jìn)腫瘤的發(fā)生

通過對乳腺細(xì)胞中DNA損傷修復(fù)基因的研究,Bla?ek 等[16]發(fā)現(xiàn) CDK12 和(或)cyclin K 的缺失導(dǎo)致乳腺細(xì)胞中長片段基因(＞10 kb)和含外顯子數(shù)量較多的基因表達(dá)減少,DDR相關(guān)基因表達(dá)降低,包括維持基因組穩(wěn)定性的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子BRCA1、ATR、FANCI和 FANCD2的編碼基因,CDK12/Cyc K復(fù)合物通過調(diào)節(jié)DDR基因的表達(dá)來維持基因組穩(wěn)定性,CDK12的缺失可能促進(jìn)乳腺細(xì)胞的突變,以及乳腺癌的發(fā)生。研究表明參與調(diào)控轉(zhuǎn)錄、剪接的因子(如CDK12)缺失,一方面直接影響哺乳動物的轉(zhuǎn)錄進(jìn)程,改變大多數(shù)細(xì)胞的增殖、分化進(jìn)程,進(jìn)而使細(xì)胞異型性增加;另一方面導(dǎo)致pre-RNA異常選擇性剪接,基因序列改變,以上兩種改變大大增加了細(xì)胞癌變的概率[36～37]?？傊?CDK12的缺失可能會導(dǎo)致基因轉(zhuǎn)錄或mRNA剪接等細(xì)胞過程失控,使細(xì)胞異型性增加,從而促進(jìn)腫瘤的發(fā)生,但CDK12缺失后細(xì)胞出現(xiàn)異常的具體機(jī)制尚未闡明,對CDK12失活的腫瘤細(xì)胞進(jìn)行質(zhì)譜分析及基因檢測可能會對揭示這一規(guī)律提供幫助。

3.2 CDK12的缺失使腫瘤細(xì)胞對PARP1/2抑制劑敏感

PARP1/2(poly ADP-ribose polymerase 1/2)是DNA修復(fù)酶,是細(xì)胞凋亡核心成員半胱天冬酶(caspase)的切割底物,主要通過與DNA單、雙鏈斷裂處結(jié)合而被激活,參與調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的DDR過程[38～39]。PARP1/2抑制劑主要作用于有缺陷的同源重組,抑制腫瘤細(xì)胞DDR,發(fā)揮其抗癌活性[35]。最近研究表明在高級別漿液性卵巢癌中,CDK12的缺失使得同源重組基因受損,進(jìn)而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞對PARP1/2抑制劑的敏感性增加[40]。雖然最近PARP1/2抑制劑已初步應(yīng)用于臨床治療,但由于某些腫瘤對PARP1/2抑制劑產(chǎn)生了耐藥性,所以目前急需新的治療方案增加腫瘤對PARP1/2抑制劑的敏感性[41]。

Bajrami等[39]通過腫瘤綜合致死率的篩選發(fā)現(xiàn),CDK12是增加PARP1/2抑制劑奧拉帕尼敏感性的重要因子。CDK12表達(dá)較低的卵巢癌細(xì)胞對奧拉帕尼治療更敏感,在體內(nèi)異種移植實驗中奧拉帕尼對CDK12短暫失活的腫瘤細(xì)胞的治療作用得到證實[39]。Joshi等[42]也發(fā)現(xiàn)在CDK12失活的卵巢癌細(xì)胞系中,癌細(xì)胞對順鉑、烷基化劑美法侖和PARP1/2抑制劑奧拉帕尼的敏感性增加。此外,在Her2陽性乳腺癌細(xì)胞中下調(diào)CDK12的表達(dá),腫瘤細(xì)胞對PARP1/2抑制劑的敏感性也明顯增強(qiáng)[43]。Johnson等[10]通過三陰乳腺癌及人源性乳腺腫瘤異種移植模型的研究發(fā)現(xiàn),CDK12抑制劑dinaciclib可減低奧拉帕尼耐藥腫瘤細(xì)胞中受損同源重組基因的恢復(fù),聯(lián)合應(yīng)用dinaciclib及奧拉帕尼可明顯抑制腫瘤生長。因此,CDK12抑制劑的開發(fā)可作為減少腫瘤對PARP1/2抑制劑或其他DDR修復(fù)系統(tǒng)抑制劑耐藥性的一種治療方案。

4 展望

CDK12是一種與轉(zhuǎn)錄相關(guān)的周期蛋白依賴性激酶,對DDR、mRNA的剪接及細(xì)胞分化、成熟等多個細(xì)胞過程的運作至關(guān)重要,盡管近些年來CDK12得到了較為廣泛的研究,但我們對其功能及作用機(jī)制的了解仍然十分有限。建立裸鼠腫瘤模型,上調(diào)或沉默CDK12的表達(dá),觀察腫瘤的生長及侵襲轉(zhuǎn)移等可能會有助于我們評估CDK12及其相關(guān)激酶在腫瘤細(xì)胞中的功能。另外,選用特異性CDK12抑制劑和腫瘤相關(guān)基因的質(zhì)譜分析也將有助于鑒別CDK12究竟是一種通用的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子,還是某個轉(zhuǎn)錄階段的特殊因子。所有這些都可能為后期揭示CDK12在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的具體作用機(jī)制以及腫瘤靶向治療藥物的研究提供幫助。

越來越多的研究表明腫瘤中的確存在CDK12的突變和擴(kuò)增[10,28,42]。最近研發(fā)的特異性CDK12抑制劑(如THZ531)不僅是強(qiáng)有力的CDK12研究工具,而且更具有腫瘤靶向藥物治療的前景[11]。目前,已經(jīng)證明THZ531單藥治療對于CDK12過表達(dá)和活化的腫瘤(如乳腺癌等)患者是有效的[10]。此外,CDK12特異性抑制劑的研究也可為PARP1/2抑制劑耐藥的腫瘤(如三陰乳腺癌等)進(jìn)行靶向藥物治療提供一種有效的治療方案。然而,目前關(guān)于細(xì)胞中CDK12失活或缺失后將引起怎樣的細(xì)胞生理、病理反應(yīng);某些實體腫瘤(如胰腺癌、胃癌等)是否存在CDK12的異常突變;對化療或靶向治療藥物不敏感、易耐藥的腫瘤組織和細(xì)胞中是否廣泛存在CDK12抑制劑耐藥性;改變這些腫瘤組織和細(xì)胞中CDK12的表達(dá)水平是否能對腫瘤的靶向治療進(jìn)行分子水平的預(yù)測等研究難題,國內(nèi)、外文獻(xiàn)尚無相關(guān)的報道,期待進(jìn)一步的研究闡明。