張 盼,疏 恒,張燕雨,王曉蕾

(無錫市兒童醫(yī)院新生兒科，江蘇無錫 214000)

由于新生兒自身特殊的生理、病理特點(diǎn)，感染性疾病發(fā)病率高，臨床癥狀不典型，病情進(jìn)展快，容易引起不良結(jié)局，甚至危及生命，尤其是極低和超低出生體質(zhì)量兒。因此，早期識別、快速診斷并合理應(yīng)用抗生素極其重要。目前降鈣素原(procalcitonin，PCT)已廣泛應(yīng)用于感染性疾病的診斷和鑒別診斷，其升高對細(xì)菌感染所致的膿毒癥特異性高，可作為診斷膿毒癥和鑒別嚴(yán)重細(xì)菌感染較好的標(biāo)志物[1-2]。臨床上常用的PCT檢測方法有定性檢測的免疫層析法、半定量的膠體金比色法及電化學(xué)發(fā)光法和酶聯(lián)免疫熒光法等。這些方法均采用靜脈血血清樣本進(jìn)行 PCT 定量檢測，存在檢測時(shí)間較長，對設(shè)備要求高、采血量大、結(jié)果回報(bào)時(shí)間長等不足之處。新生兒尤其是早產(chǎn)兒血管纖細(xì)，血容量少，靜脈采血難度大，反復(fù)靜脈采血會增加醫(yī)源性失血、貧血風(fēng)險(xiǎn)。因此，對于新生兒感染，選擇一種快速、準(zhǔn)確、采血量少、適合床邊操作的PCT檢測方法就顯得尤為重要。基于量子點(diǎn)標(biāo)記技術(shù)開發(fā)的PCT 全定量快速檢測具有靈敏度、特異度高，適合床旁檢測等優(yōu)點(diǎn)[3]。本研究旨在通過比較量子點(diǎn)末梢血PCT檢測和傳統(tǒng)靜脈血免疫熒光法PCT檢測結(jié)果的一致性，為量子點(diǎn)末梢血PCT檢測應(yīng)用于新生兒感染臨床快速診斷及指導(dǎo)抗生素合理使用提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2018年2-3月無錫市兒童醫(yī)院收治的40例日齡為3～28 d的新生兒感染患兒作為研究對象，所有研究對象在抽取血液標(biāo)本前均未使用抗生素。所有研究對象的家屬均簽署知情同意書，本研究由本院倫理委員會批準(zhǔn)通過?；純褐心?2例，女18例，日齡3～28 d，平均(15.65±6.95) d。

1.2方法

1.2.1靜脈血血清標(biāo)本PCT檢測 采用瑞萊生物科技江蘇有限公司PCT檢測試劑盒(免疫熒光法)及TZ-310型干式熒光免疫分析儀。在抗生素使用前采集研究對象靜脈血2 mL，3 000 r/min離心5～10 min分離血清，取血清進(jìn)行PCT檢測。

1.2.2末梢血全血標(biāo)本PCT檢測 采用深圳金準(zhǔn)生物醫(yī)學(xué)工程有限公司PCT定量測定試劑盒及單通道干式熒光免疫分析儀。在抗生素使用前采集研究對象末梢血30 μL，與樣板稀釋液充分混合，移液槍取100 μL混合液垂直加入檢測卡的加樣孔中，將檢測卡插入分析儀卡槽，點(diǎn)擊“測試” 菜單，儀器15 min自動完成檢測。

2 結(jié) 果

2.1兩種方法PCT檢測結(jié)果的比較 40例感染患兒，靜脈血血清PCT檢測結(jié)果為(1.40±0.21)ng/mL，末梢血全血PCT檢測結(jié)果為(1.50±0.20)ng/mL，兩種檢測方法PCT檢測結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.078,P=0.288>0.05)，結(jié)果見圖1。

圖1 兩種方法PCT檢測結(jié)果的比較

2.2兩種方法PCT檢測結(jié)果的回歸分析及相關(guān)性分析 以末梢血PCT檢測結(jié)果為X軸，靜脈血PCT檢測結(jié)果為Y軸，二者之間回歸方程為Y=0.866X+0.292，相關(guān)系數(shù)r=0.886(P<0.05)，見圖2。

圖2 兩種方法PCT檢測結(jié)果的回歸分析及相關(guān)性分析

2.3醫(yī)學(xué)決定水平處兩種檢測方法PCT檢測結(jié)果的比較 在0.5 ng/mL和2.0 ng/mL兩個醫(yī)學(xué)決定水平處，末梢血、靜脈血兩種類型樣本PCT檢測結(jié)果符合率分別為100.0%和97.5%，結(jié)果見表1、2。

表1 PCT在0.5 ng/mL醫(yī)學(xué)決定水平處兩種方法的符合率對比(n)

表2 PCT在2 ng/mL醫(yī)學(xué)決定水平處兩種方法的符合率對比(n)

3 討 論

PCT是無激素活性的降鈣素前肽物質(zhì)，是由116個氨基酸組成的糖蛋白[4]。PCT的半衰期為25～30 h，在體內(nèi)外穩(wěn)定性良好。在生理情況下，PCT表達(dá)主要局限于甲狀腺和肺的神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞，但是當(dāng)機(jī)體在出現(xiàn)細(xì)菌或真菌感染時(shí)，PCT含量快速升高，并且隨著感染進(jìn)展或控制而持續(xù)增高或者下降[5-6]。新生兒感染中主要致病菌為細(xì)菌，病情進(jìn)展快，常常缺乏典型臨床癥狀，容易被漏診或忽略，因此實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)在診斷和鑒別診斷中有著重要意義。研究表明，C反應(yīng)蛋白、PCT、血常規(guī)是極低和超低出生體質(zhì)量兒醫(yī)院感染敗血癥較敏感的早期實(shí)驗(yàn)室診斷指標(biāo)，PCT特異性最高[7]。李紹錦等[8]研究表明PCT能夠更早期、更準(zhǔn)確、更靈敏地診斷新生兒早期感染性疾病。任艷麗等[9]報(bào)道PCT在診斷新生兒敗血癥上的靈敏度明顯優(yōu)于血常規(guī)及血培養(yǎng)，且與敗血癥嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，其變化趨勢與感染控制情況基本同步。因此，PCT是早期診斷、鑒別新生兒感染及判斷治療效果非常理想的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。

但是，目前PCT檢測主要采用靜脈血血清樣本進(jìn)行檢測，耗時(shí)較長，新生兒尤其是極低和超低出生體質(zhì)量兒靜脈采血難度較大，反復(fù)靜脈采血會增加醫(yī)源性失血、貧血風(fēng)險(xiǎn)。張知洪等[10]研究疑似感染者末梢血全血和靜脈血血清樣本PCT檢測結(jié)果的一致性，結(jié)果表明，末梢血全血、靜脈血血清PCT檢測結(jié)果具有較高的一致性。該檢測方法中所需末梢血200～300 μL，PCT檢測方法采用免疫熒光層析法。近年來,利用量子點(diǎn)具有受激發(fā)光照射發(fā)出熒光,發(fā)射光穩(wěn)定性好等的特性，可以實(shí)現(xiàn)高靈敏度的快速定量檢測。何國煒等[3]收集靜脈血離心后血清PCT標(biāo)本150例，分別用量子點(diǎn)免疫熒光層析法和羅氏電化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行PCT檢測，發(fā)現(xiàn)兩種方法之間一致性和相關(guān)性均良好。但迄今為止，末梢血新型量子點(diǎn)PCT檢測在感染性疾病中的臨床應(yīng)用報(bào)道較少。

新生兒出生后血漿PCT存在生理性升高，3 d后可降至健康成人水平[11]，故本試驗(yàn)針對40例出生后3～28 d的感染患兒進(jìn)行PCT檢測研究。本研究結(jié)果顯示兩種檢測方法PCT結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有良好的一致性；相關(guān)性分析顯示兩種檢測方法相關(guān)系數(shù)(r)=0.886(P<0.05)，說明兩種PCT 檢測方法有良好的直線相關(guān)關(guān)系，在其線性檢測范圍內(nèi)具有高度一致性。此外，在0.5 ng/mL和2.0 ng/mL兩個醫(yī)學(xué)決定水平，兩種方法PCT 檢測結(jié)果符合率分別為 100.0%和 97.5%，這進(jìn)一步說明兩種PCT檢測方法具有高度的一致性。并且末梢血量子點(diǎn)PCT檢測采血量僅30 μL，為張知洪等[10]所用免疫熒光法末梢血PCT檢測所需血量的近1/10，更適合于血容量較少的新生兒尤其是早產(chǎn)兒，可減少醫(yī)源性失血性貧血的發(fā)生。同傳統(tǒng)靜脈血血清樣本PCT檢測相比，末梢血量子點(diǎn)PCT檢測操作簡單，不需離心，檢測時(shí)間大大縮短，僅需15 min，且由于儀器小，適合床旁檢測，更有利于癥狀不典型的新生兒感染性疾病的早期診斷及及時(shí)干預(yù)。

綜上所述，在新生兒感染性疾病診斷過程中，可以使用床旁微量血PCT檢測，替代傳統(tǒng)靜脈血血清PCT檢測，應(yīng)用于新生兒感染性疾病快速診斷及鑒別診斷。該方法突出優(yōu)勢在于取血量較少、操作簡單快捷、具有較高的靈敏性和特異性，適合床旁動態(tài)監(jiān)測，對判斷病情、預(yù)后、指導(dǎo)抗生素的合理使用等有重要意義，值得在臨床上進(jìn)一步推廣使用。