發(fā)酵豆粕對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能和酶活性的影響

燕 磊， 趙 敏， 朱 偉， 席慶凱， 劉天驥，

吳月明1， 王正國(guó)1， 孫春華1，李 巍3，李洪琴1， 朱正鵬1*

（1.新希望六和股份有限公司，北京朝陽(yáng) 100102；2.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)，山東青島 266109；3.成都楓瀾科技有限公司，四川成都 611731）

豆粕作為一種優(yōu)質(zhì)飼料原料，不僅蛋白質(zhì)含量高，而且氨基酸種類豐富，已在飼料工業(yè)中廣泛應(yīng)用（胡夢(mèng)紅等，2007）。但與魚(yú)粉相比，豆粕蛋氨酸含量低，且含多種抗?fàn)I養(yǎng)因子，從而降低了水產(chǎn)動(dòng)物對(duì)其營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和利用率，而且還會(huì)對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的免疫系統(tǒng)造成破壞（楊玉娟等，2016）。利用微生物發(fā)酵技術(shù)可以有效降解豆粕中的抗?fàn)I養(yǎng)因子，并將大豆蛋白降解為優(yōu)質(zhì)小肽蛋白源，大大提高豆粕的營(yíng)養(yǎng)性能和使用價(jià)值 （楊耐德等，2008）。然而，不同加工工藝對(duì)發(fā)酵豆粕的質(zhì)量影響很大，其飼喂效果存在很大差異 （張代等，2017）。目前，鮮有關(guān)于發(fā)酵豆粕對(duì)凡納濱對(duì)蝦作用效果比較的報(bào)道，因此，本研究將不同加工工藝生產(chǎn)的豆粕添加到飼料中飼喂對(duì)蝦，研究其對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能和酶活性的影響，以期為發(fā)酵豆粕在對(duì)蝦飼料中的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)豆粕及飼料配方 本試驗(yàn)所用去皮豆粕和干發(fā)酵豆粕均購(gòu)于市場(chǎng)，濕基發(fā)酵豆粕由公司內(nèi)部提供。試驗(yàn)配制3種飼料，分別添加6%去皮豆粕、4%干發(fā)酵豆粕、7%濕發(fā)酵豆粕，調(diào)整魚(yú)粉、花生粕、玉米DDGS比例，保證蛋白質(zhì)含量一致。試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及飼養(yǎng)管理 本試驗(yàn)在新希望飼料研究院即墨特水養(yǎng)殖基地進(jìn)行，試驗(yàn)選取初始體質(zhì)量為3.6~4.2 g體格壯、活力好、規(guī)格整齊、無(wú)明顯疾病的對(duì)蝦99900尾，隨機(jī)分成3組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5550尾對(duì)蝦。分別投喂以上三種飼料，即去皮豆粕、干發(fā)酵豆粕、濕發(fā)酵豆粕飼料。試驗(yàn)期為73 d。

表1 試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平%

飼養(yǎng)管理參照劉君華（2017）的研究方法，每日投料 4 次（06:00、10:00、14:00、18:00），每周對(duì)投餌量進(jìn)行調(diào)整。水池內(nèi)配置充氧設(shè)施，并定時(shí)開(kāi)啟，以保證蝦池中溶解氧>5 mg/L，鹽度為30‰自然海水，水溫23~32℃，pH 7.5~8.5，氨氮濃度低于1.0 mg/L，亞硝酸鹽濃度低于0.01 mg/L。

1.3 樣品收集 飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，將試驗(yàn)蝦禁食24 h，然后計(jì)算每個(gè)水泥池試驗(yàn)蝦的數(shù)量并稱取總重量，用于計(jì)算試驗(yàn)蝦存活率 （SR）、末重（FBW）、質(zhì)量增加率（WG）、特定生長(zhǎng)率（SGR）和飼料轉(zhuǎn)化率（FE）。生長(zhǎng)性能計(jì)算公式如下：

質(zhì)量增加率/%=（W2-W1）/W1×100；

特定生長(zhǎng)率/%=（lnW2-lnW1）/T×100；飼料轉(zhuǎn)化率/%=F/（W2-W1）×100；

成活率/%=終末蝦尾數(shù)/初始蝦尾數(shù)×100。

式中：T為試驗(yàn)天數(shù)，d；W2為試驗(yàn)結(jié)束時(shí)各處理魚(yú)的平均體質(zhì)量，g；W1為試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)各處理魚(yú)的平均體質(zhì)量，g；F為試驗(yàn)期間所用飼料總重，g。

試驗(yàn)結(jié)束，每池隨機(jī)選取6尾試驗(yàn)蝦取肝胰臟，并置于-80℃冰箱保存，用于分析酚氧化酶（PO）、總抗氧化能力（TAS）、超氧化物歧化酶（SOD）活性。

1.4 樣品分析 將飼料樣品烘干 （105℃）至恒重，采用凱式定氮法（VELP，UDK142自動(dòng)蒸餾裝置，意大利）測(cè)定粗蛋白質(zhì)含量，索氏抽提法測(cè)定脂肪含量（SOX416，Gerhardt，瑞典），失重法測(cè)定灰分含量；參照國(guó)標(biāo)測(cè)定方法 （GB/T5009.124-2003），使用日立L-8800型氨基酸分析儀測(cè)定飼料氨基酸組成；肝胰臟樣品送至南京建成生物科技有限公司測(cè)定相關(guān)酶活性。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 采用SPSS 17.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行單因素方差分析（One-way ANOVA），差異顯著后進(jìn)行Duncan’s多重比較，數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，差異顯著水平為0.05。

2 結(jié)果

2.1 生長(zhǎng)性能和飼料效率 發(fā)酵豆粕對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能和飼料效率的影響如表2所示，其中干發(fā)酵豆粕和濕發(fā)酵豆粕兩組之間終末均重?zé)o顯著性差異（P＞0.05），但分別顯著高于去皮豆粕組 2.74、4.14 g（P ＜ 0.05）；濕發(fā)酵豆粕組質(zhì)量增加率和特定生長(zhǎng)率顯著高于另外兩組（P＜0.05），其中濕發(fā)酵豆粕組質(zhì)量增加率和特定生長(zhǎng)率顯著高于去皮豆粕組96.03%、0.38%/d；干發(fā)酵豆粕和濕發(fā)酵豆粕組成活率高于去皮豆粕組3.1%、1.8%，但差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 酶活指標(biāo) 發(fā)酵豆粕對(duì)凡納濱對(duì)蝦酶活性的影響如表3所示，干發(fā)酵豆粕組超氧化物歧化酶活性、總抗氧化能力及酚氧化酶活性高于去皮豆粕組 3.86、0.21 U/mg prot、0.18 U/mL，低于濕發(fā)酵豆粕組 1.74、0.16 U/mg prot、0.24 U/mL，但各試驗(yàn)組之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。

表2 發(fā)酵豆粕對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能及飼料效率的影響

表3 發(fā)酵豆粕對(duì)凡納濱對(duì)蝦酶活性的影響

3 討論

3.1 發(fā)酵豆粕對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能及飼料效率的影響 目前，已有研究表明，一定量的發(fā)酵豆粕替代魚(yú)粉對(duì)魚(yú)類生長(zhǎng)性能無(wú)顯著性影響 （王立改等 ，2018；Liang 等 ，2017；Barnes 等 ，2015；Barnes等，2012）。彭松等（2015）在凡納濱對(duì)蝦的研究中發(fā)現(xiàn)，以6%發(fā)酵豆粕等氮替代魚(yú)粉，對(duì)蝦的生長(zhǎng)性能和飼料效率未受影響；另外，試驗(yàn)動(dòng)物個(gè)體大小對(duì)植物蛋白的敏感程度不一樣。冷向軍等（2007）研究表明，發(fā)酵豆粕代替魚(yú)粉的比例超過(guò)20%時(shí)，對(duì)蝦（0.1 g）體質(zhì)量增加率有下降的趨勢(shì)。楊耐德等（2008）研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵豆粕替代量低于33.33%時(shí)，對(duì)蝦（1.82 g）生長(zhǎng)性能和飼料效率無(wú)顯著差異。本試驗(yàn)中發(fā)酵豆粕組終末均重、質(zhì)量增加率及特定生長(zhǎng)率均高于去皮豆粕組，且濕基發(fā)酵豆粕組生長(zhǎng)性能顯著高于去皮豆粕組，這與李小梅等（2012）研究結(jié)果一致。這可能是豆粕經(jīng)微生物發(fā)酵之后，大量高分子蛋白質(zhì)被分解成利于消化吸收的小分子多肽，這些小肽提高了機(jī)體蛋白質(zhì)的合成效率，進(jìn)而提高了對(duì)蝦的生長(zhǎng)性能。而濕發(fā)酵豆粕，未經(jīng)過(guò)烘干過(guò)程，而直接進(jìn)入了飼料生產(chǎn)制粒過(guò)程，更多的保留了發(fā)酵中產(chǎn)生的有益菌次生代謝產(chǎn)物，更有利于對(duì)蝦的攝食和生長(zhǎng)。另外，楊玉芬等（2009）研究發(fā)現(xiàn)，在發(fā)酵過(guò)程中，適當(dāng)增加水分含量，可以促進(jìn)乳酸菌的繁殖，進(jìn)一步促進(jìn)其對(duì)底物發(fā)酵產(chǎn)生有機(jī)酸，而有機(jī)酸是衡量發(fā)酵質(zhì)量的重要指標(biāo)，乳酸含量越高，表示發(fā)酵質(zhì)量越好（劉媛媛等，2006）；另外，蔡國(guó)林等（2008）研究發(fā)現(xiàn)，有機(jī)酸具有獨(dú)特的芳香，可掩蓋飼料中的不適氣味，提高飼料適口性，這可能是濕基發(fā)酵豆粕應(yīng)用效果優(yōu)于干發(fā)酵豆粕的原因。

3.2 發(fā)酵豆粕對(duì)凡納濱對(duì)蝦酶活性的影響 眾所周知，免疫學(xué)指標(biāo)能夠反映機(jī)體的免疫功能和生理狀況，而飼料中添加適量的發(fā)酵豆粕可以提高魚(yú)類免疫機(jī)能（陳萱等，2005）。宋文新（2009）研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵豆粕替代10%的魚(yú)粉可以提高黑鯛幼魚(yú)堿性磷酸酶、超氧化物歧化酶及血清溶菌酶活性；吳釗（2016）研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵豆粕替代魚(yú)粉可以顯著提高大黃魚(yú)肝臟中超氧化物歧化酶活性，但對(duì)肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶沒(méi)有顯著性影響。在本研究中發(fā)現(xiàn)，干發(fā)酵豆粕和濕發(fā)酵豆粕組超氧化物歧化酶活性均高于去皮豆粕組，而且濕發(fā)酵豆粕組總抗氧化能力顯著高于去皮豆粕組，這可能是發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生了游離型大豆異黃酮，從而提高了其生物活性，這與彭松等（2015）的研究結(jié)果一致。Sang等（2016）研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加發(fā)酵豆粕可以顯著提高生長(zhǎng)期巖魚(yú)血清抗氧化酶活性；豆粕中的抗?fàn)I養(yǎng)因子會(huì)引起魚(yú)體的氧化脅迫現(xiàn)象，造成魚(yú)體的應(yīng)激反應(yīng)，而發(fā)酵工藝可以有效降低豆粕中的抗?fàn)I養(yǎng)因子，這可能是發(fā)酵豆粕組對(duì)蝦總抗氧化能力高于去皮豆粕組的原因。

4 結(jié)論

本次試驗(yàn)條件下，飼料中添加發(fā)酵豆粕能改善凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能及飼料效率，而且濕基發(fā)酵豆粕效果優(yōu)于干發(fā)酵豆粕。