李辛晨
摘 要:H.‘moy grande(H. grandiflours×H. moscheutos)為美國鄉(xiāng)土種H. grandiflours和芙蓉葵(H. moscheutos)的雜交品種,在美國東部海岸生長適應(yīng)性良好。該研究采用盆栽試驗,比較了不同質(zhì)量分數(shù)NaCl脅迫下,新引進木槿屬植物Hibiscus ‘moy grande的SOD酶活性、細胞膜透性、可溶性糖含量以及根、莖、葉K+、Na+ 濃度等生理指標的變化。結(jié)果表明:NaCl脅迫對Hibiscus ‘moy grande生理指標的影響達顯著水平。
關(guān)鍵詞:木槿;NaCl脅迫;外來種質(zhì);生理相應(yīng)
中圖分類號 X173 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731(2019)07-0017-03
近年來,錦葵科(Malvaceae)木槿屬(Hibiscus)植物的研究和開發(fā)應(yīng)用日益受到人們的重視,栽培應(yīng)用的實踐表明,該屬植物多數(shù)種類對于干旱、瘠薄、鹽堿等不良土壤條件表現(xiàn)出較好的適應(yīng)性,是一類極具開發(fā)潛力、抗逆性強的植物類群[1]。本研究通過盆栽試驗,測定了NaCl脅迫下外來木槿屬種質(zhì)H.‘moy grande的SOD酶活性、細胞膜透性、可溶性糖含量以及根、莖、葉K+、Na+濃度等生理指標的變化,分析了不同質(zhì)量分數(shù)脅迫對H.‘moy grande生長的影響,為該屬植物在濱海鹽堿地造林的應(yīng)用提供理論依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 供試材料 選取Hibiscus‘moy grande粗細發(fā)育比較一致的當年生枝條,進行扦插繁殖育苗。H.‘moy grande(H. grandiflours×H. moscheutos)為美國鄉(xiāng)土種H. grandiflours和芙蓉葵(H. moscheutos)的雜交品種,在美國東部海岸生長適應(yīng)性良好,灌木狀,高可達3~4m,花期7—8月,花紅色至粉紅色,花朵巨大,直徑20cm以上。引種栽培后,其在南京及江蘇沿海種植能夠開花結(jié)實,適應(yīng)性良好[2]。
1.2 研究方法
1.2.1 試驗設(shè)計 試驗采用盆栽法在溫室中進行,3月下旬植株發(fā)芽萌動后,選取生長勢比較一致的材料,稱取等質(zhì)量培養(yǎng)基質(zhì)7kg每盆,測定基質(zhì)含水率,定植于規(guī)格為35cm×20cm的塑料花盆中,并置于試驗溫室內(nèi)進行緩苗,試驗溫室采用自然光照及自然溫度條件,水分管理一致。培養(yǎng)基質(zhì)為泥炭、珍珠巖、園土按3∶1∶6的質(zhì)量比例混合均勻。5月下旬植株恢復(fù)生長后,根據(jù)盆栽基質(zhì)的質(zhì)量設(shè)置0、2、4、6、8、10g·kg-1 6個NaCl脅迫處理水平,每處理5次重復(fù),每個重復(fù)1盆,每種材料共計30盆。完全隨機區(qū)組排列采用結(jié)合平衡水分蒸發(fā)逐次加入NaCl(分析純)溶液的加鹽方式[2]。為避免盆內(nèi)鹽分和水分流失,每個盆下放置托盤,鹽脅迫期間定期定量澆水,將澆水時流出的溶液重新倒回盆內(nèi)。定期清洗托盤內(nèi)滲出的鹽分和基質(zhì),倒回原盆中,鹽脅迫時間50d。
1.2.2 生理指標測定 各生理指標葉片相對電導(dǎo)率(組織液外滲電導(dǎo)法)[3]、葉片游離脯氨酸含量(茚三酮比色法)[3]、抗氧化酶活性(氮藍四唑光化還原法)[3]、丙二醛含量(硫代巴比妥酸法)[3]的測定參見上海植物生理所《現(xiàn)代植物生理學(xué)試驗指南》[3]。葉綠素含量(乙醇丙酮混合液提取法)[4]、葉片可溶性糖含量(蒽酮比色法)[4]測定方法參見李合生等主編《植物生理生化實驗原理和技術(shù)》[4]。
1.2.3 Na+和K+含量測定 將稱完干質(zhì)量的植物材料用粉碎機(FW80天津市泰斯特儀器有限公司)分根、莖、葉粉碎,過孔徑0.5mm篩稱取干樣0.3g,用1mol·l-1 HCl一次浸提后,置于振蕩機(HY-2,常州國華電器有限公司)上振搖1.5h,過濾,采用火焰光度法[4]測定植物體根、莖、葉內(nèi)的Na+和K+含量,并計算出K+/Na+比值。
1.3 數(shù)據(jù)分析 應(yīng)用方差分析軟件SPSS 16.0和Excel 2003軟件進行數(shù)據(jù)處理,采用新復(fù)極差法(Duncan法)進行多重比較。
2 結(jié)果與分析
2.1 葉片相對電導(dǎo)率、丙二醛含量及超氧化物歧化酶活性變化 在鹽脅迫條件下,植物細胞質(zhì)膜受到鹽離子脅迫的影響而產(chǎn)生脅變,導(dǎo)致質(zhì)膜受傷,細胞電導(dǎo)質(zhì)外滲。通常葉片電導(dǎo)率的大小被作為反映細胞質(zhì)膜透性變化的指標。NaCl脅迫對試驗材料葉片相對電導(dǎo)率的影響見圖1。由圖1可知,H.‘moy grande葉片相對電導(dǎo)率隨鹽脅迫濃度的升高呈上升趨勢,6g·kg-1處理水平時指標值顯著升高至對照的188.24%,隨著鹽濃度的進一步提高,指標值急劇升高,10g·kg-1處理水平時指標值顯著升高至對照的459.66%。
丙二醛是細胞膜脂過氧化的產(chǎn)物,其含量的變化間接反映了膜的受損狀況[5]。圖2反應(yīng)了供試材料丙二醛含量的變化情況,鹽分脅迫條件下H.‘moy grande丙二醛含量顯著升高,高濃度鹽脅迫時,指標值變化趨于平緩。2g·kg-1處理水平時,指標值顯著升高至對照的137.88%,中、高濃度鹽脅迫下指標值變化不大,維持在與2g·kg-1處理水平時的相當水平上。
超氧化物歧化酶(SOD)是植物體內(nèi)酶促抗氧化保護系統(tǒng)的重要活性物質(zhì),對清除逆境脅迫下植物體內(nèi)產(chǎn)生的活性氧(AOS)具有重要作用,對維持細胞膜的完整性和保證細胞的正常代謝活動都具有重要意義[6]。SOD酶活性測定結(jié)果見圖3,由圖3可知,指標值表現(xiàn)為先升高后下降的趨勢。2g·kg-1鹽處理水平時指標值略有升高,增幅為對照的2.06%,6g·kg-1處理水平時SOD酶活性維持了與2g·kg-1鹽脅迫下的相當水平,8g·kg-1鹽處理水平時指標值開始顯著下降,部分植株開始死亡。方差分析結(jié)果表明,NaCl脅迫對H.‘moy grande的SOD酶活性影響顯著。
2.2 滲透調(diào)節(jié)性物質(zhì)脯氨酸及可溶性糖含量變化 滲透調(diào)節(jié)機制是植物抗鹽的重要機理[3],可溶性糖及脯氨酸是目前研究較多的2類有機滲透調(diào)節(jié)劑物質(zhì)[6]。葉片可溶性糖含量測定結(jié)果見圖4。由圖4可知,低濃度鹽脅迫下H.‘moy grande指標值有所升高,2g·kg-1鹽處理水平時其葉片可溶性糖含量與對照無顯著變化,4g·kg-1處理水平時H.‘moy grande指標值顯著升高至對照的115.25%,并達到最大值,隨著鹽脅迫濃度的提高指標值呈下降趨勢,10g·kg-1處理水時指標值下降至對照的87.89%。
H.‘moy grande脯氨酸含量變化情況與葉片可溶性糖含量不同,測定結(jié)果表明(見圖5):2g·kg-1處理水平時,指標值與對照無顯著變化,4g·kg-1鹽濃度時均顯著下降至對照的66.67%。隨著鹽濃度的提高,指標值變化趨于平緩,到10g·kg-1鹽處理水平時,H.‘moy grande指標值下降至對照的77.27%。
2.3 根、莖、葉不同器官K+、Na+含量及K+/Na+的變化 NaCl脅迫下H.‘moy grande根系對K+、Na+的吸收,以及莖、葉中K+、Na+含量變化趨勢大致相同,如表1所示。試驗材料根系中的K+含量均隨鹽脅迫濃度的提高逐漸降低,莖中的K+含量表現(xiàn)為先升高后降低的趨勢,K+在葉片中的含量隨鹽脅迫濃度的提高而顯著升高。根、莖、葉中的Na+含量均隨鹽脅迫濃度的提高而升高。
3 結(jié)論與討論
NaCl脅迫對H.‘moy grande材料在SOD酶活性、細胞膜透性、可溶性糖含量以及根、莖、葉K+、Na+濃度等生理指標變化的影響均達到顯著水平。
當鹽脅迫水平上升時,H.‘moy grande的電導(dǎo)率指標值隨著鹽濃度的提高而急劇升高,10g·kg-1處理水平時指標值達到對照的459.66%。在中、高濃度鹽脅迫下,丙二醛含量指標值變化不大,維持在與2g·kg-1處理水平時的相當水平上。SOD酶活性指標值表現(xiàn)為先升高后下降的趨勢,在2g·kg-1鹽處理水平時指標值略有升高,增幅為對照的2.06%,6g·kg-1處理水平時SOD酶活性維持了與2g·kg-1鹽脅迫下的相當水平,8g·kg-1鹽處理水平時指標值開始顯著下降。
H.‘moy grande中的可溶性糖及脯氨酸指標值在低濃度鹽脅迫下有所升高,2g·kg-1鹽處理水平時,其葉片可溶性糖含量與對照無顯著變化,4g·kg-1之后隨著鹽脅迫濃度的進一步提高指標值呈下降趨勢,10g·kg-1處理水時指標值下降較為明顯。
在NaCl脅迫下,H.‘moy grande根系對K+、Na+的吸收,以及莖、葉中K+、Na+含量變化趨勢大致相同,根系中K+含量隨鹽脅迫濃度的提高逐漸降低,莖中的K+含量表現(xiàn)為先升高后降低,葉片中的K+含量隨鹽脅迫濃度的提高而顯著升高。根、莖、葉中的Na+含量均隨鹽脅迫濃度的提高而升高。
通過廣泛引進、選育優(yōu)良適生耐鹽植物資源,并配套與當?shù)貫I海氣候、土壤條件特點相適應(yīng)的綠化造林技術(shù),是促進沿海灘涂資源的開發(fā)利用的重要技術(shù)環(huán)節(jié)。上述指標的變化證明H.‘moy grande對于NaCl脅迫具有一定的抗性,對于沿海以及其他土壤鹽分以氯化鹽為主、土壤含鹽量在4~6g/kg以下的地區(qū)具有一定的應(yīng)用價值。
參考文獻
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