●趙傳芳 趙志剛 趙 旭 劉方圓 賀實(shí)偉 于英婷
(1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所 吉林 長春 130112;2.河北省肅寧縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村工作局 河北 肅寧 062350;3.吉林特研生物技術(shù)有限責(zé)任公司 吉林 長春 130122;4.吉林永吉縣口前鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站 吉林 吉林 132200)
狐大腸桿菌病是仔狐的一種常見傳染病,是由埃希氏大腸桿菌引起的細(xì)菌性傳染病,常呈敗血癥經(jīng)過,伴有嚴(yán)重腹瀉,并可引起出血性肺炎和中樞神經(jīng)系統(tǒng)障礙,對仔狐危害較大。
狐大腸桿菌病近幾年來在肅寧地區(qū)廣泛流行,每年7月份仔狐分窩初期開始持續(xù)發(fā)病,仔狐發(fā)病率極高,可持續(xù)整個育成期。感染毛皮動物發(fā)病率達(dá)10%~15%。死亡率達(dá)100%。經(jīng)實(shí)驗(yàn)室分離鑒定和小白鼠動物實(shí)驗(yàn),確診是由大腸桿菌菌株引起的出血性肺炎。
狐感染大腸桿菌后逐漸拒食,不愿活動,病程持續(xù)1~7d后死亡,急性病例會突然死亡。慢性死亡病例,鼻腔、口腔均流血,前腿關(guān)節(jié)腫脹積液,甚至潰爛感染化膿,部分慢性病例顏面腫脹,后期出現(xiàn)敗血癥癥狀死亡。
剖檢可見肺出血、糜爛性潰瘍,有大面積出血點(diǎn),整個胸腔積有血水,實(shí)質(zhì)臟器肝、脾、腎均有腫大出血,胃和腸道癥狀不明顯,見下圖。
取病死狐的心、肝、脾、肺、腎及腦等組織,并刮取小腸內(nèi)壁進(jìn)行涂片,甲醇固定后革蘭氏染色,進(jìn)行鏡檢。鏡檢結(jié)果:脾、肺、腎涂片在鏡下可見革蘭氏陰性中等大小桿菌。
同時無菌采取病死狐的心、肝、脾、肺、腎、腦、小腸內(nèi)容物在PYG(自制)培養(yǎng)基上劃線分離培養(yǎng),將固體培養(yǎng)基放在生化培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)24h,分離純化細(xì)菌,并將純化菌無菌清洗,1份用于小白鼠攻毒,另1 份用于16SrRNA測序。
小白鼠動物實(shí)驗(yàn):將純化菌用無菌生理鹽水制成懸液,給予腹腔注射(18~20g),每只小白鼠注射0.1mL,觀察12~24h,記錄小白鼠死亡情況,小白鼠攻毒12~24h相繼死亡。將死亡小白鼠剖檢進(jìn)行純培養(yǎng)和鑒定。
16SrRNA測序結(jié)果:送檢病死狐和小鼠致死臟器中純化出的細(xì)菌樣品,經(jīng)16SrRNA測序結(jié)果鑒定一致,確診為致病性禽源大腸埃希氏桿菌。
根據(jù)流行特點(diǎn)、臨床癥狀和病理變化可作出初步診斷,要確診此病須作細(xì)菌分離和致病性試驗(yàn)。
分離菌對頭孢噻呋鈉、鹽酸洛美沙星、甲替沙星、阿米卡星較敏感。
用敏感藥物對發(fā)病動物進(jìn)行治療,有一定療效。由于近年來大腸桿菌發(fā)病率持續(xù)上升,狐養(yǎng)殖處于低谷時期,飼養(yǎng)管理差,環(huán)境惡劣,很容易造成此病的發(fā)生。大腸桿菌對環(huán)境的抵抗力很強(qiáng),附著在糞便、土壤、籠舍的塵埃等環(huán)境中的大腸桿菌能長期存活。對抗生素產(chǎn)生較強(qiáng)的耐藥性,治療效果并不顯著。
由于大腸桿菌血清型很多,并且產(chǎn)生大量毒素,研制大腸桿菌滅活疫苗進(jìn)行免疫預(yù)防有一定難度。從發(fā)病調(diào)查中發(fā)現(xiàn),養(yǎng)殖戶飼喂大量禽下腳料,生喂更易引起本病的發(fā)生,大腸桿菌在不同動物間相互傳播,因此切斷本病傳染源的關(guān)鍵是要飼喂新鮮的熟制的禽下腳料,杜絕本病發(fā)生,減少養(yǎng)殖戶的損失。