韓 帥, 朱曉偉, 包思成, 張 瑋
(內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心,內(nèi)蒙古呼和浩特010110)
實(shí)驗(yàn)動物廣泛應(yīng)用于科研、教學(xué)、生產(chǎn)、檢驗(yàn)等重要領(lǐng)域(鄭長生等,2009),且用量逐年增加。為了滿足實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性的要求,實(shí)驗(yàn)動物必須具備良好的靈敏度、準(zhǔn)確性和可重復(fù)性(龐文彪,2012),因此必須對實(shí)驗(yàn)動物進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化來保證實(shí)驗(yàn)動物的質(zhì)量。營養(yǎng)是影響實(shí)驗(yàn)動物質(zhì)量的最重要因素之一,而實(shí)驗(yàn)動物飼料的品質(zhì)直接影響到動物的營養(yǎng)供給。飼料是影響實(shí)驗(yàn)動物生長、繁殖及各種生物學(xué)特性表達(dá)的最直接、最重要的因素,飼料的質(zhì)量對于實(shí)驗(yàn)動物標(biāo)準(zhǔn)化有著極其重要的意義。
畜牧飼料是以生長速率、飼料利用率等經(jīng)濟(jì)效益指標(biāo)來做價值判斷,同時考慮生產(chǎn)對環(huán)境影響而帶來的社會效益,而實(shí)驗(yàn)動物飼料的效益表現(xiàn)為獲得標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)動物、提高研究或檢測結(jié)果的精確性。畜牧養(yǎng)殖業(yè)飼料一般是由飼料生產(chǎn)企業(yè)預(yù)先設(shè)計(jì)好配方的濃縮飼料,然后由養(yǎng)殖戶按照比例與糧食混合飼喂;而實(shí)驗(yàn)動物由于飼養(yǎng)要求必須采用配合飼料。畜牧飼料的原料研究可以考慮在成本低、營養(yǎng)價值等同的情況下尋找可替代的原料,而實(shí)驗(yàn)動物在飼養(yǎng)過程中,各種營養(yǎng)素的代謝、缺乏、過量以及中毒均與實(shí)驗(yàn)動物質(zhì)量有著重要的關(guān)系,為保證準(zhǔn)確性好、重復(fù)性好、精確度高,實(shí)驗(yàn)動物飼料的原料用料比養(yǎng)殖生產(chǎn)中更為精細(xì),且不宜有過大的變動,只能使用規(guī)定的原料類型,以免影響實(shí)驗(yàn)動物品質(zhì)。因此,不能以研究、生產(chǎn)畜禽飼料的方法來解決實(shí)驗(yàn)動物飼料的研究、生產(chǎn)和供應(yīng)問題,而要根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)、實(shí)驗(yàn)動物生產(chǎn)特點(diǎn),嚴(yán)格控制飼料的質(zhì)量進(jìn)行生產(chǎn)供應(yīng),才能保證實(shí)驗(yàn)動物質(zhì)量。
2.1 營養(yǎng)成分對實(shí)驗(yàn)動物的影響 實(shí)驗(yàn)動物的生長、繁殖、體質(zhì)增強(qiáng)和疾病防御等一切生命活動都要依賴于營養(yǎng)。飼料是動物攝入營養(yǎng)的主要來源,飼料品質(zhì)的優(yōu)劣對實(shí)驗(yàn)動物質(zhì)量和動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果均有直接影響。實(shí)驗(yàn)動物飼料中所含的蛋白質(zhì)、脂肪、維生素等各類營養(yǎng)物質(zhì)含量應(yīng)當(dāng)符合實(shí)驗(yàn)動物自身的生理需求。加強(qiáng)飼料質(zhì)量控制是實(shí)驗(yàn)動物標(biāo)準(zhǔn)化的重要條件之一。飼料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化的重點(diǎn)在于選擇優(yōu)質(zhì)的原料、合理恒定的配方、飼料的顆粒化及適宜的滅菌方法。
2.2 建立實(shí)驗(yàn)動物飼料檢測體系的必要性 原料、加工、材質(zhì)等多種因素均會影響實(shí)驗(yàn)動物的種子篩選、純化以及繁殖、發(fā)育整個過程。實(shí)驗(yàn)動物從購進(jìn)到研究的整個飼養(yǎng)過程均可受到飼料因素的影響,這可能會導(dǎo)致基因表達(dá)、代謝、機(jī)能狀態(tài)甚至是形態(tài)改變。這些改變的發(fā)生,一方面造成離體標(biāo)本的標(biāo)本反應(yīng),另一方面造成動物體的反應(yīng)。這兩個方面的數(shù)據(jù)、圖片資料的影響,導(dǎo)致分析結(jié)果可重復(fù)性差,結(jié)論不可靠或者不正確,從而影響研究報(bào)告的質(zhì)量,影響研究價值。
2.3 實(shí)驗(yàn)動物飼料分類 實(shí)驗(yàn)動物飼料按照不同的動物種類可以分為不同動物的飼料,同一種動物又根據(jù)不同時期的營養(yǎng)需求分為不同的飼料,如維持、生長、繁育飼料;根據(jù)配合飼料原料組成的明確程度,又可分為日糧配合飼料、純化配合飼料、化學(xué)合成飼料;根據(jù)飼料外形和質(zhì)地,分為粉狀飼料、顆粒飼料、膨化飼料和液體飼料四種類型;根據(jù)實(shí)驗(yàn)性質(zhì)和用途分為標(biāo)準(zhǔn)飼料、模型飼料及對照飼料三種類型。
3.1 我國實(shí)驗(yàn)動物法規(guī)與飼料標(biāo)準(zhǔn) 《實(shí)驗(yàn)動物管理?xiàng)l例》和《實(shí)驗(yàn)動物管理辦法》是目前現(xiàn)行的國家法規(guī)?!秾?shí)驗(yàn)動物管理?xiàng)l例》于1988年國家科學(xué)技術(shù)委員會令第2號發(fā)布,2013年第二次修訂?!秾?shí)驗(yàn)動物管理辦法》是于1997年國家科委與國家技術(shù)監(jiān)督局聯(lián)合下發(fā)的,是我國主管部門制定的第一個有關(guān)實(shí)驗(yàn)動物質(zhì)量管理的專門規(guī)范性文件,該文件第一次明確提出了全國執(zhí)行統(tǒng)一的實(shí)驗(yàn)動物質(zhì)量國家標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)動物飼料的國家標(biāo)準(zhǔn)于1994年首次發(fā)布在實(shí)驗(yàn)動物系列標(biāo)準(zhǔn)中。配合飼料通用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(GB14924.1-1994)于2001年修訂;配合飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(GB14924.2-1994)于2001年修訂;國家于2010年制定了實(shí)驗(yàn)動物配合飼料營養(yǎng)成分標(biāo)準(zhǔn)(GB14924.3-2010)和實(shí)驗(yàn)動物環(huán)境及設(shè)施(GB14925-2010),于2011年10月1日正式實(shí)行。
實(shí)驗(yàn)動物地方法規(guī)是各省根據(jù)不同的管理需要和實(shí)際情況頒布制定的。據(jù)報(bào)道,截至2011年,北京、湖北等6個省市完成對實(shí)驗(yàn)動物管理的立法工作,上海、湖南兩省市正在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)動物立法前期調(diào)研階段工作。江西、青海、江蘇、河北等省份的實(shí)驗(yàn)動物管理均以政府通知文件的形式下發(fā)(龐文彪,2012)。
3.2 各地實(shí)驗(yàn)動物飼料檢測結(jié)果 郭中坤等(2015)對山東省7個大、小鼠配合飼料樣品的常規(guī)營養(yǎng)進(jìn)行檢測,其中5份樣品的指標(biāo)完全符合要求,而另外2份樣品的檢測結(jié)果為水分含量高和鈣磷比例低。抽檢了4份豚鼠飼料和5份兔飼料樣品,合格率均為0%。劉騰等(2011)對北京市場供應(yīng)的兩家公司的實(shí)驗(yàn)動物配合飼料進(jìn)行常規(guī)成分測定,結(jié)果顯示大、小鼠飼料、犬飼料為合格,但豬、猴和兔飼料不合格。蘇衛(wèi)等(1999)對全國范圍內(nèi)的37份飼料樣品進(jìn)行了常規(guī)檢測,達(dá)到國家標(biāo)準(zhǔn)的大、小鼠飼料為20.8%,五項(xiàng)指標(biāo)均達(dá)到國家標(biāo)準(zhǔn)的家兔飼料為22.2%,檢測的共計(jì)4種犬和獼猴飼料均未達(dá)標(biāo)。宋小華等(1996)對黑龍江省的幾家實(shí)驗(yàn)動物中心使用的鼠料及兔料2次抽檢,兩種實(shí)驗(yàn)動物飼料均不合格,并且常規(guī)營養(yǎng)成分有較大變動,這表明,飼料中存在營養(yǎng)不平衡,質(zhì)量不穩(wěn)定的問題。
綜上,我國各地的實(shí)驗(yàn)動物飼料質(zhì)量良莠不齊。目前我國實(shí)驗(yàn)動物飼料已初步形成社會化(柯賢福,2012),規(guī)范實(shí)驗(yàn)動物飼料標(biāo)準(zhǔn),建立實(shí)驗(yàn)動物營養(yǎng)檢測體系,實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)動物飼料的標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn),是我國實(shí)驗(yàn)動物行業(yè)迫切需要解決的問題。
內(nèi)蒙古自治區(qū)科技廳每年組織進(jìn)行一次實(shí)驗(yàn)動物人員從業(yè)培訓(xùn),當(dāng)?shù)氐膶?shí)驗(yàn)動物主要供給學(xué)校教學(xué)及高校和社會科研。建有內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物檢測中心,分為微生物檢測室和飼料化驗(yàn)室。對供教學(xué)使用的實(shí)驗(yàn)動物進(jìn)行每年四次的微生物檢測,和每年兩次的飼料抽樣檢查。配有飼料加工間,可以生產(chǎn)普通級實(shí)驗(yàn)動物飼料(圖1)。
檢測抽取供給實(shí)驗(yàn)動物生產(chǎn)用的外購SPF級維持鼠糧、繁殖鼠糧各1份,普通級維持兔糧、繁殖兔糧各1份,抽取當(dāng)?shù)厣a(chǎn)的普通兔糧1份,高脂兔糧1份,每樣抽取200 g,4分法粉碎機(jī)粉碎后裝入自封袋中待測。采用國標(biāo)進(jìn)行測量。每個樣品設(shè)兩個平行。檢測指標(biāo)及依據(jù)國標(biāo)見表1。
圖1 實(shí)驗(yàn)動物檢測中心流程圖
用于測定的主要檢測儀器設(shè)備有熱鼓風(fēng)干燥箱(天津泰斯特儀器有限公司W(wǎng)GL-125B);馬弗爐(山東鄆城華魯電熱儀器SX2-4-10A);分析天平(上海洪記儀器設(shè)備有限公司CP214);試樣粉碎機(jī) (北京開創(chuàng)同和科技發(fā)展有限公司KC-08);粗脂肪測定儀(FOSS ST255 SoxtecTM);凱式定氮儀 ( FOSS KjeltecTM8100/8200)。
根據(jù)2018年度第二季度檢測結(jié)果來看,中心外購的SPF級維持鼠糧、生長繁育鼠糧、維持兔糧、生長繁育兔糧,水分、粗蛋白質(zhì)、粗灰分、粗脂肪、鈣、總磷、鈣磷比都符合國家標(biāo)準(zhǔn)。此次測定了當(dāng)?shù)厣a(chǎn)的普通級維持兔糧1種,高脂肪兔糧1種,結(jié)果表明,當(dāng)?shù)鼐S持兔糧粗灰分高于國家標(biāo)準(zhǔn),粗脂肪含量低于國家標(biāo)準(zhǔn),鈣和磷含量符合國家標(biāo)準(zhǔn),但是鈣磷比偏高。當(dāng)?shù)氐母咧眉Z除鈣磷比偏高之外,其他指標(biāo)也都符合國家標(biāo)準(zhǔn)(表2和表3)。本次所有飼料檢測結(jié)果允許誤差的判定見表4。平行樣品有效性依照各個檢測項(xiàng)目的國標(biāo)要求(表1)。內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心自制繁殖兔糧的常規(guī)營養(yǎng)水平檢測均符合國家標(biāo)準(zhǔn),飼料配方見表5。
表1 實(shí)驗(yàn)動物飼料常規(guī)指標(biāo)檢測方法
表2 2018年度第二季度抽樣結(jié)果
表3 實(shí)驗(yàn)動物配合飼料營養(yǎng)成分國家標(biāo)準(zhǔn)(GB14924.3-2010)
表4 飼料檢測結(jié)果判定的允許誤差(GB14924.3-2010)%
5.1 實(shí)驗(yàn)動物飼料檢測項(xiàng)目不完善 李雅楠和崔建忠(2012)報(bào)道,目前,我國飼料行業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系并不健全,動物飼料的檢測同國外相比相對落后。實(shí)驗(yàn)動物飼料的營養(yǎng)成分測定,除了飼料的常規(guī)測定之外,氨基酸、維生素、礦物質(zhì)的含量等也需重視。顏淑芹等(2003)報(bào)道,飼料供給的氨基酸不足或是比例不當(dāng),嚴(yán)重者會導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)動物代謝障礙和一系列功能性紊亂。此外實(shí)驗(yàn)動物飼料中的化學(xué)因素、微生物、農(nóng)藥污染也會對實(shí)驗(yàn)動物的質(zhì)量造成影響,需要進(jìn)行測定和監(jiān)管。有研究報(bào)道,抽取山東省的大、小鼠樣品中,氨基酸、維生素、微生物的合格率分別為57.1%、0%、42.9%;兔飼料的三項(xiàng)指標(biāo)合格率為25.0%、0%、80.0%;豚鼠飼料的合格率分別為40.0%、0%、75.0%(郭中坤等,2015)。
5.2 實(shí)驗(yàn)動物飼料質(zhì)量行政監(jiān)管存在盲區(qū) 目前實(shí)驗(yàn)動物飼料監(jiān)管并不完善,仍有很多地區(qū)處于無人監(jiān)管的狀態(tài)。內(nèi)蒙古地區(qū)還沒有建立起專門的實(shí)驗(yàn)動物飼料質(zhì)量的監(jiān)管單位。農(nóng)牧業(yè)的飼料監(jiān)管部門由于畜牧業(yè)飼料監(jiān)督檢測同實(shí)驗(yàn)動物飼料存在根本性質(zhì)的差異,不能一并進(jìn)行管理。據(jù)報(bào)道,湖北省實(shí)驗(yàn)動物相關(guān)產(chǎn)業(yè)滯后,無一家專業(yè)生產(chǎn)飼料、墊料的廠家,被調(diào)查的35家單位,取得實(shí)驗(yàn)動物生產(chǎn)許可證的單位僅有15家(張慶德,2007)。內(nèi)蒙古相對北京、江蘇、上海等地滯后,當(dāng)?shù)貙?shí)驗(yàn)動物飼料生產(chǎn)并無標(biāo)簽,為自配料。
5.3 實(shí)驗(yàn)飼料質(zhì)量管理仍需探索 畜牧業(yè)有著豐富的飼料管理經(jīng)驗(yàn)可以借鑒,但是實(shí)驗(yàn)動物飼料在目標(biāo)上不同,實(shí)驗(yàn)動物標(biāo)準(zhǔn)化要求更高,飼料原料要求不同,飼料分類也不同,這些都需要與實(shí)驗(yàn)動物質(zhì)量監(jiān)管相結(jié)合,同時實(shí)驗(yàn)動物飼料產(chǎn)量、規(guī)模、數(shù)量與畜牧業(yè)也不相當(dāng)。這些原因使得監(jiān)管的最終目標(biāo)不同,而且監(jiān)管的方式也存在差異。通過成立相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)動物營養(yǎng)協(xié)會交流研究實(shí)驗(yàn)動物營養(yǎng)方面的問題,并為制定標(biāo)準(zhǔn)提供可以參考的依據(jù)。實(shí)現(xiàn)飼料標(biāo)準(zhǔn)化的最終目的是實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)動物標(biāo)準(zhǔn)化,對于實(shí)驗(yàn)動物營養(yǎng)而言,就是實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)動物營養(yǎng)狀況標(biāo)準(zhǔn)化。
5.4 缺乏營養(yǎng)狀況監(jiān)測 動物營養(yǎng)狀況除受飼料養(yǎng)分供給影響外,還受其他因素影響,如某些應(yīng)激因素使動物的營養(yǎng)需要增加,某種疾病使養(yǎng)分的消化吸收受影響。因此除對配合飼料質(zhì)量進(jìn)行監(jiān)測外,還需要對動物營養(yǎng)狀況進(jìn)行監(jiān)測,及時發(fā)現(xiàn)問題,進(jìn)行信息反饋,以便通過調(diào)整飼料養(yǎng)分供給來加以修正。監(jiān)測動物營養(yǎng)狀況可選用比較生長曲線,測定與營養(yǎng)狀況相關(guān)的生化、免疫指標(biāo)等。
表5 自制繁殖兔糧飼料配方%
6.1 提高實(shí)驗(yàn)動物飼料質(zhì)量強(qiáng)化意識 長期出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)動物飼料常規(guī)檢測質(zhì)量不合格的情況,源于對實(shí)驗(yàn)動物飼料質(zhì)量的重要性認(rèn)識不夠。但是如果實(shí)驗(yàn)動物飼料質(zhì)量不能得到保證,一切后續(xù)的工作都有可能很難達(dá)到預(yù)期的結(jié)果,這直接和間接造成的損失無法估量。不同的實(shí)驗(yàn)動物飼料有著不同的分類,其中的營養(yǎng)指標(biāo)也不同,不同的科研項(xiàng)目也有其合適的選擇,選擇失誤導(dǎo)致的結(jié)果不符也有存在。因此,必須提高對實(shí)驗(yàn)動物飼料質(zhì)量的警覺性。
6.2 完善實(shí)驗(yàn)動物飼料的法律法規(guī) 劉征等(2017)提出法律對飼料行業(yè)有著明示、矯正不法行為、預(yù)防、約束、保護(hù)的作用。我國實(shí)驗(yàn)動物的法律體系并不完善,應(yīng)該加快制定頒布與實(shí)行。國家于2010年新修訂的標(biāo)準(zhǔn)與舊標(biāo)準(zhǔn)相比有明顯進(jìn)步,對實(shí)驗(yàn)動物配合飼料及飼料原料的質(zhì)量作了強(qiáng)制性要求,并對飼料檢測、產(chǎn)品標(biāo)簽、包裝、儲存及運(yùn)輸作出了規(guī)定要求,但在飼料污染物、重金屬、農(nóng)藥與獸藥殘留限量及其檢驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)等方面,與有關(guān)國際標(biāo)準(zhǔn)仍存在一定差距(馬進(jìn)等,2017)。我們應(yīng)學(xué)習(xí)借鑒國外的經(jīng)驗(yàn),完善我國的飼料法律體系,為動物飼料質(zhì)量提供更完善的法律保障。
6.3 建立健全實(shí)驗(yàn)動物飼料監(jiān)管機(jī)制 政府應(yīng)當(dāng)重視實(shí)驗(yàn)動物飼料的監(jiān)管,明確部門職權(quán),加大實(shí)驗(yàn)動物監(jiān)管部門的力度,建立健全實(shí)驗(yàn)動物飼料監(jiān)管機(jī)制,對飼料企業(yè)的市場準(zhǔn)入進(jìn)行把關(guān)。以行政的手段保證市場上供給的實(shí)驗(yàn)動物飼料的質(zhì)量。我國各地實(shí)驗(yàn)動物的飼料生產(chǎn)情況差異很大,各地應(yīng)當(dāng)出臺適應(yīng)當(dāng)?shù)氐牡胤椒ㄒ?guī),結(jié)合當(dāng)?shù)厍闆r進(jìn)行監(jiān)管。
6.4 完善實(shí)驗(yàn)動物飼料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系 增進(jìn)國際間的交流合作,為我國實(shí)驗(yàn)動物飼料的質(zhì)量提供技術(shù)支持,建立健全我國各級飼料企業(yè)和科研單位飼料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和飼料檢測標(biāo)準(zhǔn),制定控制管理程序(馬進(jìn)等,2017),建立標(biāo)準(zhǔn)化工作程序,加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)動物飼料的基礎(chǔ)理論和檢測技術(shù)方面的研究,從而在技術(shù)層面為飼料質(zhì)量工作提供強(qiáng)有力的支持。