■張 林 項(xiàng)斌偉 王 寧 楊繼業(yè) 張文佳 趙有英 張建新 陳書明*

（1.山西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山西太谷030801；2.右玉縣畜牧局，山西右玉037200；3.山西省畜牧遺傳育種中心，山西太原030027；4.右玉縣宏宇牧業(yè)有限責(zé)任公司，山西右玉037200）

隨著規(guī)?；B(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，動(dòng)物飼料添加劑的研究越來越受到重視。近年來的一些試驗(yàn)證明，以抗生素作為飼料添加劑在殺死或抑制病原菌的同時(shí)，也殺死或抑制了體內(nèi)的有益菌，從而引起機(jī)體內(nèi)的菌群失調(diào)，引發(fā)內(nèi)源感染。與此同時(shí)，體外的有害菌乘虛而入，也會(huì)造成機(jī)體的外源感染。另外，抗生素在畜禽產(chǎn)品中會(huì)產(chǎn)生有害藥物殘留，其中有些性質(zhì)穩(wěn)定的抗生素排放到環(huán)境中后，最終以各種途徑富集于人體，從而導(dǎo)致人體產(chǎn)生耐藥菌株，或直接對(duì)機(jī)體產(chǎn)生毒害作用[1-2]。目前，越來越多的國(guó)家對(duì)抗生素、化學(xué)合成藥物等在畜牧生產(chǎn)中的使用做了嚴(yán)格的限制，有些甚至已禁止使用[3]。在此背景下，尋找抗生素類飼料添加劑替代品的研究顯得意義更加重大。而中草藥來源于自然界，一種草藥往往具有多種功能，毒副作用小，避免了抗生素以及化學(xué)合成飼料添加劑的缺點(diǎn)，具有效果好、環(huán)保、不產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn)。因此，用中草藥飼料添加劑替代抗生素添加劑成為本課題組以及有關(guān)學(xué)者探索的熱點(diǎn)，引起廣泛關(guān)注。張海棠等[4]研究結(jié)果表明，在育肥豬基礎(chǔ)日糧中添加中草藥添加劑能夠促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)，提高其免疫功能，效果優(yōu)于抗生素。張代[5]研究發(fā)現(xiàn)，山楂、椿樹皮等中草藥添加劑可顯著改善牛瘤胃的內(nèi)環(huán)境，增加瘤胃菌群數(shù)量。陳麗麗等[6]研究了枸杞子、麥芽和神曲等自制中草藥飼料添加劑對(duì)肉驢育肥效果的影響，結(jié)果表明中草藥添加劑可提高肉驢的育肥效果，同時(shí)，提高驢肉的品質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。王寶山[7]研究發(fā)現(xiàn)飼料中加入中草藥添加劑可以提高綿羊腸道消化能力。馬東予[8]研究表明，在蛋雞飼料中添加1.5%中草藥復(fù)合添加劑，可提高蛋雞的產(chǎn)蛋量和日均產(chǎn)蛋率。概括起來，中草藥復(fù)合添加劑依據(jù)其作用效果通?？煞譃槊庖咴鰪?qiáng)劑、抗應(yīng)激劑、增食劑、驅(qū)蟲劑、激素樣作用劑、促生殖劑、催乳劑和飼料保藏劑八大類[9-10]。目前，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)中草藥復(fù)合添加劑在動(dòng)物上的應(yīng)用主要集中于提高動(dòng)物生產(chǎn)性能、以及提高動(dòng)物免疫力等方面。

我國(guó)60%以上地區(qū)缺硒，29%地區(qū)嚴(yán)重缺硒，30%以上地區(qū)缺鋅。因此，我國(guó)是鋅、硒缺乏區(qū)。而鋅、硒又是維持人和動(dòng)物體正常新陳代謝不可或缺的微量元素。若羊攝入鋅、硒不足，致使體內(nèi)鋅、硒不能滿足機(jī)體代謝需要，就會(huì)導(dǎo)致羊繁殖性能下降、生長(zhǎng)遲緩、免疫力降低、發(fā)病率升高，嚴(yán)重影響?zhàn)B羊業(yè)經(jīng)濟(jì)效益。另外，我國(guó)目前大多地區(qū)牛、羊養(yǎng)殖模式已由散養(yǎng)放牧轉(zhuǎn)變?yōu)榧s化、標(biāo)準(zhǔn)化圈養(yǎng)，而舍飼圈養(yǎng)，限制運(yùn)動(dòng)，常常引起羔羊肝氣淤滯，脾胃虛弱，消化不良，體質(zhì)下降。前期大量試驗(yàn)結(jié)果表明，中草藥兼有藥物和營(yíng)養(yǎng)雙重作用，所含活性物質(zhì)能夠提高動(dòng)物生產(chǎn)性能，改善機(jī)體免疫機(jī)能，提高動(dòng)物抗病力。其他微量元素、維生素也是羔羊和架子羊育肥過程中極易缺乏的重要營(yíng)養(yǎng)元素，直接影響到飼料的消化、代謝和營(yíng)養(yǎng)沉積[11]?；诖耍菊n題組按照中藥配伍原則，選用山楂、麥芽、陳皮等多味中草藥為原料，并配以一定量維生素A、D、E 及鐵、鋅、硒等微量元素，研制出適宜圈養(yǎng)羊育肥用的中草藥復(fù)合添加劑。試驗(yàn)結(jié)果表明，在育肥羊的精飼料中添加5%本課題組研制的中草藥復(fù)合添加劑，效果最佳。為了研究該中草藥復(fù)合添加劑對(duì)羊生產(chǎn)性能及相關(guān)生化指標(biāo)的影響，本課題組的白元生等[11]進(jìn)行了養(yǎng)羊試驗(yàn)，結(jié)果表明該添加劑組日增重、屠宰率均極顯著高于對(duì)照組，表明該添加劑有效改善了營(yíng)養(yǎng)平衡，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)代謝，促進(jìn)了羔羊的生長(zhǎng)發(fā)育。另外，該添加劑組血清Ca2+、AKP、TP、ALB均極顯著高于對(duì)照組，說明該添加劑能夠促進(jìn)羊體內(nèi)鈣、磷代謝，促進(jìn)骨骼生長(zhǎng)，提高機(jī)體免疫力。本課題組的張瑜等[12]研究了該中草藥復(fù)合添加劑對(duì)綿羊抗氧化機(jī)能的影響，結(jié)果表明該添加劑可顯著提高綿羊血清總抗氧化能力、總超氧化物歧化酶活性，顯著降低丙二醛含量，表明該添加劑顯著提高了綿羊的抗氧化機(jī)能。另外，通過大量試驗(yàn)，我們還發(fā)現(xiàn)該中草藥復(fù)合添加劑能顯著提高綿羊十二指腸絨毛長(zhǎng)度和寬度，促進(jìn)綿羊十二指腸的形態(tài)發(fā)育，并可提高綿羊瘤胃纖維素酶的活性，但對(duì)綿羊瘤胃蛋白酶、α-淀粉酶活性的影響不顯著。上述試驗(yàn)結(jié)果可能與該添加劑中的山楂、麥芽、陳皮、五味子、何首烏、川芎、黑豆有健脾開胃、補(bǔ)養(yǎng)氣血、增強(qiáng)免疫、促進(jìn)生長(zhǎng)的功效有關(guān)，更詳盡的機(jī)理有待后續(xù)試驗(yàn)進(jìn)一步研究。

翁秀秀等[13]報(bào)道，高水平精料會(huì)影響瘤胃乳頭形態(tài)結(jié)構(gòu)變化，進(jìn)而增加瘤胃壁吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表面積。孫娟[14]報(bào)道，與自然放牧相比，放牧補(bǔ)飼對(duì)羔羊瘤胃乳頭的長(zhǎng)度和寬度具有顯著的提高。飼料成分變化會(huì)影響綿羊瘤胃形態(tài)發(fā)育及瘤胃微生物代謝，進(jìn)而影響綿羊?qū)︼暳现袪I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收及育肥效果[15-16]?；诖?，本文對(duì)本課題組研制中草藥復(fù)合添加劑對(duì)綿羊瘤胃形態(tài)發(fā)育的影響進(jìn)行了研究，為探索該添加劑改善圈養(yǎng)綿羊瘤胃消化代謝機(jī)理奠定了基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物分組及飼養(yǎng)管理

將60只4月齡杜×寒雜一代綿羊按照體況相近原則，隨機(jī)分成4 組，每組15 只，分別為公羊?qū)φ战M、母羊?qū)φ战M、公羊試驗(yàn)組、母羊試驗(yàn)組。對(duì)照組飼喂常規(guī)日糧，試驗(yàn)組在飼喂常規(guī)日糧的基礎(chǔ)上，于精料中添加5%中草藥復(fù)合添加劑（該添加劑組分：山楂、麥芽、陳皮、何首烏、五味子、川穹、黑豆、VA、VD、VE、硫酸亞鐵、氧化鋅、硫酸銅、氧化鎂等[12]）。每天飼喂兩次，早8：00 與晚7：00 各飼喂1 次，先喂精飼料（精飼料配方：玉米55%、豆粕30%、麩皮10%、中草藥復(fù)合添加劑5%），再喂粗飼料（粗飼料配方：玉米秸稈40%、瓜子皮10%、玉米青貯50%），精飼料每只0.75 kg/d，粗飼料自由采食，自由飲水，試驗(yàn)期為45 d。

1.2 瘤胃組織樣品采集、切片制作、數(shù)據(jù)采集及分析

45 d試驗(yàn)期結(jié)束后，空腹24 h，屠宰，剪取瘤胃組織約0.5 cm3，生理鹽水沖凈，置于4%多聚甲醛溶液中固定72 h 后，按劉世新[17]方法進(jìn)行切片制作，HE 染色，封片，顯微鏡下測(cè)量瘤胃乳頭的長(zhǎng)度、寬度以及瘤胃壁的厚度。用SPSS21.0 軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行組間差異顯著性分析，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 綿羊瘤胃乳頭、瘤胃壁的顯微觀察

對(duì)照組和試驗(yàn)組綿羊瘤胃乳頭的組織切片圖分別見圖1和圖2。

圖1 對(duì)照組綿羊瘤胃乳頭

圖2 試驗(yàn)組綿羊瘤胃乳頭

對(duì)照組和試驗(yàn)組綿羊瘤胃壁的組織切片圖分別見圖3和圖4。

圖3 對(duì)照組綿羊瘤胃壁

圖4 試驗(yàn)組綿羊瘤胃壁

在顯微鏡下觀察，對(duì)照組與試驗(yàn)組綿羊瘤胃形態(tài)結(jié)構(gòu)相同。瘤胃壁由黏膜、黏膜下組織、肌織膜和漿膜4 層組成。在瘤胃黏膜表面有無數(shù)密集的大小不等的分布不均勻的葉狀或圓錐狀的乳頭。關(guān)于瘤胃乳頭的寬度與長(zhǎng)度以及瘤胃壁的厚度，公羊?qū)φ战M與母羊?qū)φ战M差異不明顯，公羊試驗(yàn)組與母羊試驗(yàn)組差異也不明顯，但試驗(yàn)組綿羊瘤胃乳頭寬度、長(zhǎng)度以及瘤胃壁厚度明顯增大。

2.2 瘤胃乳頭寬度、長(zhǎng)度以及瘤胃壁厚度測(cè)定結(jié)果

表1 中草藥復(fù)合添加劑對(duì)綿羊瘤胃乳頭寬度、長(zhǎng)度以及瘤胃壁厚度的影響（μm）

由表1 可知，與公羊?qū)φ战M相比，公羊試驗(yàn)組瘤胃乳頭寬度和長(zhǎng)度分別增加了14.35%和19.53%，且差異均顯著（P＜0.05）；公羊試驗(yàn)組瘤胃壁厚度增加了5.71%，差異顯著（P＜0.05）。與母羊?qū)φ战M相比，試驗(yàn)組母羊瘤胃乳頭寬度和長(zhǎng)度分別增加了13.67%和19.28%，且差異均顯著（P＜0.05）；試驗(yàn)組母羊瘤胃壁厚度增加了5.21%，差異顯著（P＜0.05）。但公羊與母羊?qū)φ战M各指標(biāo)差異均不顯著，公羊與母羊試驗(yàn)組各指標(biāo)差異也均不顯著。上述結(jié)果表明，本試驗(yàn)用中草藥復(fù)合添加劑可以顯著增大綿羊瘤胃乳頭寬度、長(zhǎng)度以及瘤胃壁的厚度，綿羊瘤胃形態(tài)變化與綿羊性別無關(guān)。

3 討論

瘤胃是反芻動(dòng)物重要的消化器官，有極強(qiáng)的降解纖維物質(zhì)的能力和吸收功能[18]。瘤胃的形態(tài)發(fā)育與飼料成分及物理形態(tài)、揮發(fā)性脂肪酸以及瘤胃微生物等有關(guān)。而瘤胃的形態(tài)學(xué)發(fā)育又包括瘤胃上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化，瘤胃乳頭長(zhǎng)度、寬度、密度以及瘤胃壁厚度、顏色等的變化。在這些指標(biāo)中，瘤胃乳頭的長(zhǎng)度和寬度以及瘤胃壁的厚度是評(píng)價(jià)瘤胃形態(tài)發(fā)育的重要指標(biāo)[19]。瘤胃乳頭是瘤胃黏膜上皮的小突起，該突起可增加瘤胃壁吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表面積，進(jìn)而促進(jìn)反芻動(dòng)物對(duì)飼料營(yíng)養(yǎng)成分的利用。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，本課題組自制的中草藥復(fù)合添加劑可使羊瘤胃乳頭寬度和長(zhǎng)度以及瘤胃壁厚度顯著增加，表明該中草藥復(fù)合添加劑可促進(jìn)綿羊瘤胃消化代謝，有利于飼料中營(yíng)養(yǎng)成分被綿羊吸收利用。有研究表明，提高精飼料飼喂量可增加瘤胃乳頭的長(zhǎng)度，高營(yíng)養(yǎng)的飼料可使瘤胃乳頭長(zhǎng)度和寬度增加，進(jìn)而增加瘤胃吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表面積[20]。在本試驗(yàn)中，由于中草藥復(fù)合添加劑是以精飼料顆粒形式飼喂動(dòng)物，可能會(huì)對(duì)綿羊瘤胃產(chǎn)生一定的物理刺激作用，促使瘤胃形態(tài)發(fā)生改變。本課題組自制中草藥復(fù)合添加劑中含有陳皮、麥芽、山楂等芳香味藥材，可改善飼料的適口性，提高綿羊的采食量，并且陳皮和山楂還具有理氣、消食、益脾、健胃等作用，提高綿羊?qū)︼暳系睦寐?，?dǎo)致瘤胃內(nèi)總揮發(fā)性脂肪酸含量增加，從而促進(jìn)瘤胃形態(tài)發(fā)育[21]。此外，該中草藥復(fù)合添加劑中還含有一些微量元素和維生素，可促進(jìn)瘤胃微生物生長(zhǎng)，提高綿羊瘤胃內(nèi)羧甲基纖維素酶的活性，有利于綿羊攝入飼草料中粗纖維的降解，從而使瘤胃內(nèi)揮發(fā)性脂肪酸含量發(fā)生變化，而揮發(fā)性脂肪酸含量的變化又導(dǎo)致瘤胃上皮乳頭長(zhǎng)度、寬度的變化。有研究表明，丙酸和丁酸是影響瘤胃乳頭發(fā)育的重要因素[22-23]。關(guān)于本課題組自制中草藥復(fù)合添加劑對(duì)綿羊瘤胃形態(tài)發(fā)育影響的詳盡機(jī)制有待后續(xù)試驗(yàn)深入研究。

中草藥具有不產(chǎn)生耐藥性、無有害藥物殘留、毒副作用小、療效好、成本低等優(yōu)點(diǎn)，是理想的抗生素替代品，在畜禽健康生產(chǎn)中已得到應(yīng)用。祜群等[24]研究了中草藥添加劑對(duì)奶牛干物質(zhì)采食量和瘤胃發(fā)酵的影響，結(jié)果表明可以提高奶牛干物質(zhì)采食量，維持瘤胃內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，提高瘤胃微生物蛋白質(zhì)含量以及蛋白質(zhì)的利用率。莫文湛等[25]研究了中草藥添加劑對(duì)控制荷斯坦牛乳房炎的效果，研究結(jié)果表明中草藥添加劑可以改善荷斯坦牛的新陳代謝，增強(qiáng)機(jī)體調(diào)節(jié)能力，使乳房炎發(fā)病率降低。雖然中草藥添加劑可以提高動(dòng)物機(jī)體的免疫力，促進(jìn)畜禽的生長(zhǎng)，改善畜禽產(chǎn)品品質(zhì)，在促進(jìn)養(yǎng)殖業(yè)綠色健康發(fā)展方面發(fā)揮了積極作用；但由于中草藥種類繁多，配方各異，功效不確定等問題，使其在畜禽生產(chǎn)中被廣泛應(yīng)用還存在許多困難。特別是許多復(fù)方中草藥添加劑的藥理、毒理機(jī)制尚不清楚，而且生產(chǎn)工藝落后，導(dǎo)致中草藥有效成分損失較多，臨床藥效不明顯，畜禽生產(chǎn)性能改善不顯著。針對(duì)上述問題，今后應(yīng)加大對(duì)中草藥的基礎(chǔ)研究，逐步解決單味及復(fù)方中藥藥理、毒理及加工工藝等問題，為中草藥添加劑的規(guī)?；?、標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)和應(yīng)用提供數(shù)據(jù)支撐與技術(shù)保障，促進(jìn)畜牧業(yè)又好又快發(fā)展。

4 結(jié)論

本課題組自制中草藥復(fù)合添加劑可促進(jìn)綿羊瘤胃形態(tài)發(fā)育，使瘤胃乳頭寬度、長(zhǎng)度以及瘤胃壁厚度增加，這有利于綿羊?qū)︼暳现袪I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化與吸收。