葉嘉 張浩 楊明建
摘要:通過向小鼠灌胃不同劑量的酸棗葉(Ziziphus jujube var. spinosa)總黃酮[高劑量組300 mg/(kg·d);中劑量組150 mg/(kg·d);低劑量組100 mg/(kg·d)],測定小鼠體內(nèi)總蛋白含量(TP)、過氧化物酶(POD)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性和過氧化氫酶(CAT)活性及總抗氧化活性(T-AOC),探討酸棗葉總黃酮對小鼠體內(nèi)抗氧化能力的影響。結(jié)果表明,灌施不同劑量的酸棗葉總黃酮對小鼠體內(nèi)的TP濃度、POD、SOD、CAT及T-AOC活性產(chǎn)生了顯著的影響(P<0.05)。隨著添加劑量的增加,小鼠體內(nèi)TP濃度、T-AOC和SOD活性呈逐漸升高的趨勢,而POD活性呈先升高后下降的趨勢,CAT活性隨著劑量的增加無顯著變化,但胃施酸棗葉總黃酮各處理小鼠體內(nèi)酶活性均明顯高于對照,說明酸棗葉總黃酮具有明顯的抗自由基作用及體內(nèi)抗氧化功能。
關(guān)鍵詞:酸棗葉(Ziziphus jujube var. spinosa);抗氧化能力;超氧化物歧化酶;黃酮
中圖分類號:TS261.9? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A
文章編號:0439-8114(2019)10-0125-04
Abstract: To examine antioxidant function in vivo of mice with flavonoids extracts from Ziziphus jujuba var. spinosa, the mice were gavaged with different doses of leaf avonoids[300 mg/(kg·d),150 mg/(kg·d),100 mg/(kg·d)]. The contents of TP,POD,SOD,CAT and T-AOC of the mice were assessed. The results showed that TP、POD、SOD、CAT and T-AOC were substantially affected by flavonoids extracts from Ziziphus jujuba var. spinosa(P<0.01). The TP, T-AOC and SOD was increased with increasing of flavonoids extracts concentrations while the POD featured a bell-shape curve. There was no significant difference of CAT in the mice gavaged with different doses of leaf avonoids. Compared with normal control group,the TP, POD,SOD,CAT and T-AOC were increased significantly. The results showed that the flavonoids extracts from Ziziphus jujube var. spinosa can effectively improve the antioxidant function of mice.
Key words: Ziziphus jujube var. spinosa; antioxidant capacity; superoxide dismutase; avonoids
黃酮類化合物是普遍存在于植物體內(nèi)的一種有機(jī)雜環(huán)化合物,具有改善心腦血管循環(huán)、抵制血小板活化因子、降低膽固醇、抗病毒、防癌抗癌以及清除自由基等功效。自由基是生物體中生化反應(yīng)的普通中間介質(zhì)或非特異性調(diào)節(jié)劑。在正常生理情況下,活性氧的產(chǎn)生與清除可維持在一個(gè)有利無害的極低水平,但在衰老、應(yīng)激、疾病情況下發(fā)生活性氧對重要生物分子的損傷,引起組織損害和器官退行性變化。而黃酮類物質(zhì)主要通過酚羥基與自由基反應(yīng)生成較穩(wěn)定的半醌式自由基,終止自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng),從而達(dá)到清除自由基的目的,進(jìn)而使機(jī)體維持正常的生理作用[1]。近年來,隨著人們對黃酮類化合物保健功能認(rèn)識的深入,關(guān)于黃酮類化合物抗氧化活性的研究已經(jīng)成為植物化學(xué)及醫(yī)藥保健領(lǐng)域的熱點(diǎn)問題之一。大量研究表明,從植物提取的總黃酮有很好的清除自由基能力,能有效提高動(dòng)物體內(nèi)抗氧化性[2-7]。
酸棗(Ziziphus jujuba var. spinosa)為鼠李科棗屬植物,原產(chǎn)中國華北地區(qū),是太行山區(qū)一種含量豐富的野生果樹資源。酸棗的不同器官(根、莖、葉、果實(shí))均含有多種活性成分,具有多種生理藥理功效[8,9],但目前相關(guān)研究主要是集中在酸棗仁的生理功效方面,對其他器官鮮有報(bào)道[10-12]。本研究通過體內(nèi)抗氧化評價(jià)體系研究酸棗葉總黃酮對小鼠抗氧化、抗衰老活性研究,進(jìn)而探究酸棗葉總黃酮對生物體內(nèi)總抗氧化能力的影響,以期為酸棗藥用植物資源合理開發(fā)和擴(kuò)大黃酮類物質(zhì)提取原料的同時(shí),為臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)和試驗(yàn)依據(jù)。
1? 材料與方法
1.1? 酸棗葉中總黃酮的提取
準(zhǔn)確稱取酸棗葉粉末2 g,加入體積分?jǐn)?shù)60%的乙醇,液料比40∶1(mL∶g),在超聲溫度40 ℃、超聲時(shí)間35 min、超聲功率240 W試驗(yàn)條件下提取酸棗葉中總黃酮。
1)樹脂預(yù)處理。取適量樹脂,用95%乙醇浸泡24 h,除去樹脂碎片和雜物,用95%乙醇洗至流出液和水不產(chǎn)生白色渾濁現(xiàn)象為止,水洗至無醇味,用5%HCl溶液和2% NaOH溶液分別浸泡樹脂2~4 h,水洗至中性,浸泡在蒸餾水中備用。
2)加樣。將酸棗葉提取液制成體積小、濃度高的樣品溶液,加入層析柱中硅膠面上連通器滴入大孔樹脂吸附柱中。