一個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)偽狂犬病血清學(xué)檢測(cè)與免疫程序評(píng)價(jià)

陳文志

（福建省漳州市詔安縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，福建 漳州 363500）

豬偽狂犬病是由皰疹病毒引起的一種病毒性傳染病，是當(dāng)前困擾、危害豬場(chǎng)的主要疾病之一，不僅可以進(jìn)行水平傳播，也可通過(guò)胎盤(pán)、精液進(jìn)行垂直傳播，也是引起呼吸道病綜合征的重要原發(fā)性病原之一[1]。豬只一旦感染可以長(zhǎng)期帶毒，且有排毒散毒的風(fēng)險(xiǎn)[2]，防控難度大。該病目前尚無(wú)特效的治療方法，疫苗免疫是預(yù)防和控制豬偽狂犬病最為有效的措施之一。豬群進(jìn)行血清流行病學(xué)調(diào)查檢測(cè)，是評(píng)價(jià)疫苗免疫效果及優(yōu)化免疫程序的重要手段和掌握豬場(chǎng)是否有野毒存在情況，保證豬場(chǎng)豬群安全。

1 材料與方法

1.1 血清樣品來(lái)源

采集福建省詔安縣某規(guī)模豬場(chǎng)血清樣品325份送詔安縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，其中采集待售后備公豬83頭、種公豬22頭、后備母豬20頭、1～3胎及以上生產(chǎn)母豬80頭、30～35日齡仔豬20頭、40～45日齡仔豬20頭、50～55日齡仔豬20頭、60～70日齡小豬 20頭、90～100日齡肉豬 20頭、110～120日齡肉豬20頭。血樣采集后，靜置2 h，離心分離血清，-20℃凍存?zhèn)溆谩Ｔ撠i場(chǎng)使用豬偽狂犬病活疫苗（K-61株）免疫：種豬采用“一刀切”方式分別在每年3月份、6月份、9月份、12月份各免疫1次，每次2頭份/頭；商品豬出生當(dāng)天滴鼻免疫1頭份/頭，小豬68日齡肌注免疫1頭份/頭，肥育豬105日齡肌注免疫1.5頭份/頭。

1.2 檢測(cè)試劑

豬偽狂犬病gB、gE抗體檢測(cè)試劑盒都是美國(guó)IDEXX公司生產(chǎn)的。

1.3 檢測(cè)方法

采用ELISA方法檢測(cè)豬偽狂犬病gB、gE抗體，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作步驟進(jìn)行試驗(yàn)。結(jié)果判定：S/N值≤0.60判斷為陽(yáng)性，S/N值＞0.60但≤0.70判斷為可疑，S/N值＞0.70判斷為陰性，可疑樣品重測(cè)。

2 檢測(cè)結(jié)果

不同階段豬偽狂犬病gB、gE抗體檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 不同階段豬偽狂犬病gB、gE抗體檢測(cè)結(jié)果

2.1 豬偽狂犬病gB抗體檢測(cè)情況

后備公豬83份樣品gB抗體陽(yáng)性率為92.77%；公豬、后備母豬、1胎、2胎、3胎及3胎以上母豬122份樣品，gB抗體陽(yáng)性率均為100%。商品豬30～35、40～45日齡各20份樣品gB抗體陽(yáng)性率均為95%，50～55日齡20份樣品gB抗體陽(yáng)性率為85%，60～70日齡20份樣品gB抗體陽(yáng)性率為65%，90～100日齡20份樣品gB抗體陽(yáng)性率為90%，110～120日齡20份樣品gB抗體陽(yáng)性率為75%。商品豬gB抗體陽(yáng)性率隨日齡增長(zhǎng)呈下降趨勢(shì)，如圖1。

圖1 商品豬gB抗體陽(yáng)性率曲線(xiàn)

2.2 豬偽狂犬病gE抗體檢測(cè)情況

后備公豬83份樣品，gE抗體陽(yáng)性率為3.61%；公豬22份樣品，gE抗體陽(yáng)性率為4.55%；后備母豬、生產(chǎn)母豬1胎、2胎、3胎及3胎以上樣品各20份，gE抗體陽(yáng)性率分別為10%、15%、45%、55%、65%。母豬gE抗體陽(yáng)性率隨生產(chǎn)周期增長(zhǎng)而逐步提高，如圖2。商品豬 30～35、40～45、50～55、60～70、90～100、110～120日齡gE抗體陽(yáng)性率分別為95%、65%、40%、35%、5%、20%，商品豬gE抗體陽(yáng)性率隨日齡增長(zhǎng)而呈逐漸下降趨勢(shì)，達(dá)到100日齡后稍有回升，如圖3。

圖2 母豬gE抗體陽(yáng)性率曲線(xiàn)

圖3 商品豬gE抗體陽(yáng)性率曲線(xiàn)

3 討論

（1）豬偽狂犬病gB屬于病毒的中和抗體，gB抗體既有疫苗免疫抗體，也可能有野毒感染抗體。對(duì)gB、gE抗體檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，后備公豬、公豬、后備母豬gB抗體陽(yáng)性率為92.77%以上，且gE抗體陽(yáng)性率不超過(guò)10%，疫苗免疫對(duì)于gB抗體的產(chǎn)生起到主導(dǎo)作用；對(duì)于不同胎次的母豬雖然gB抗體陽(yáng)性率均為100%，但母豬1胎、2胎、3胎及3胎以上gE抗體陽(yáng)性率分別為15%、45%、55%、65%，野毒對(duì)gB抗體的產(chǎn)生不容忽視。

（2）趙雪麗等研究指出，要保證豬群不被野毒感染，豬群豬偽狂犬病免疫抗體平均合格率需長(zhǎng)期維持高于90%[3]。后備公豬、公豬、后備母豬、生產(chǎn)母豬gB抗體陽(yáng)性率均為92.77%以上，表明種豬采用“一刀切”方式每季度免疫1次、每次2頭份/頭的免疫程序是可行的。從圖1 gB抗體陽(yáng)性率曲線(xiàn)圖可以看出，商品豬在 50～55、60～70、90～100、110～120 日齡gB抗體陽(yáng)性率分別僅為85%、65%、90%、75%，表明該豬場(chǎng)分別在仔豬出生當(dāng)天滴鼻免疫1.0頭份/頭、68日齡肌注免疫1.0頭份/頭、105日齡肌注免疫1.5頭份/頭的免疫程序不夠理想。建議將68日齡提前到45日齡肌注免疫1.5頭份/頭，105日齡肌注免疫1.5頭份/頭提高劑量至2.0頭份/頭[4]，適當(dāng)調(diào)整免疫時(shí)間及免疫劑量，維持各日齡商品豬群免疫抗體較高水平，每年定期開(kāi)展gB抗體檢測(cè)3～4次，發(fā)現(xiàn)gB抗體水平低下要及時(shí)補(bǔ)免，隨時(shí)優(yōu)化免疫程序，提升免疫保護(hù)效力[5]。

（3）從圖2母豬gE抗體陽(yáng)性率曲線(xiàn)圖可以看出，后備母豬、生產(chǎn)母豬gE抗體陽(yáng)性率呈上升趨勢(shì)，表明種豬隨著生產(chǎn)周期增長(zhǎng)，存在被野毒感染機(jī)會(huì)也在增加。該豬場(chǎng)業(yè)主已對(duì)gE抗體陽(yáng)性的3頭后備公豬、1頭公豬、2頭后備母豬淘汰掉。要定期開(kāi)展gE抗體監(jiān)測(cè)（可與gB抗體檢測(cè)同步），有計(jì)劃地加速淘汰gE抗體陽(yáng)性母豬，為今后凈化工作打好基礎(chǔ)。

（4）仔豬出生后哺乳母乳，獲得母源抗體，母源抗體中含有g(shù)B抗體，同時(shí)也可能有g(shù)E抗體。本次檢測(cè)該場(chǎng)商品豬 30～35、40～45、50～55、60～70、90～100 日齡gE抗體陽(yáng)性率分別為95%、65%、40%、35%、5%，隨著日齡的增加，gE抗體陽(yáng)性率逐漸下降直至5%，符合母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律[6]，這提示在前期gE抗體來(lái)自母源抗體的可能性更大[7]；110～120日齡gE抗體陽(yáng)性率提升至20%，這表明部分豬只被野毒感染了，因此，必須提高豬群免疫抗體水平和豬場(chǎng)生物安全。

（5）落實(shí)生物安全措施，扎實(shí)做到“五個(gè)嚴(yán)格執(zhí)行”。嚴(yán)格執(zhí)行豬場(chǎng)內(nèi)外人員進(jìn)場(chǎng)消毒程序；嚴(yán)格執(zhí)行一切車(chē)輛未經(jīng)徹底消毒不得入場(chǎng)；嚴(yán)格執(zhí)行引種制度，特別是引種前進(jìn)行豬偽狂犬病gE抗體檢測(cè)，gE抗體陰性方可進(jìn)場(chǎng)；嚴(yán)格執(zhí)行場(chǎng)內(nèi)環(huán)境定期消毒制度；嚴(yán)格執(zhí)行消滅貓、老鼠、蒼蠅、蚊蟲(chóng)等，防止病源傳播擴(kuò)散。