曹森，馬超，黃亞欣，和岳，巴良杰，吉寧，何貴紅，王瑞*，顧紅艷

1(貴陽(yáng)學(xué)院 食品與制藥工程學(xué)院,貴州 貴陽(yáng)，550005)2(貴州省果品加工工程技術(shù)研究中心,貴州 貴陽(yáng)，550005)3(修文縣農(nóng)業(yè)局,貴州 修文，550200)4(貴州大學(xué) 電氣工程學(xué)院,貴州 貴陽(yáng)，550005)

獼猴桃(Actinidiachinensis)，屬于獼猴桃科(Actinidiaceae)獼猴桃屬植物，具有多種營(yíng)養(yǎng)成分和抗氧化功能，并且含有預(yù)防疾病方面功能的保健因子，因此越來(lái)越受到人們的重視[1-2]。獼猴桃果實(shí)屬于呼吸躍變型，采后的果實(shí)有明顯的后熟軟化現(xiàn)象[3]，采后腐爛損失直接限制獼猴桃的儲(chǔ)存壽命[4]。目前，獼猴桃有效的保鮮方式主要是低溫結(jié)合1-甲基環(huán)丙烯保鮮劑[5-6]。

1-甲基環(huán)丙烯(1-methylcyclopropene，1-MCP)是一種乙烯受體抑制劑，可以有效抑制乙烯與受體的結(jié)合及信號(hào)傳導(dǎo)，推遲果實(shí)的軟化進(jìn)程，延緩果實(shí)成熟與衰老。但有研究表明1-MCP濃度使用不當(dāng)會(huì)影響獼猴桃后熟口感，果實(shí)出庫(kù)后難以后熟，果心和果皮硬化，口感差、果肉褐化、腐爛率高[7-8]，也就是目前市場(chǎng)上反饋的“僵尸果”現(xiàn)象。關(guān)于1-MCP在獼猴桃上的使用報(bào)道的較多，但關(guān)于不同濃度1-MCP在獼猴桃保鮮方面系統(tǒng)的報(bào)道較少，尤其針對(duì)不同濃度1-MCP探究果實(shí)的后熟口感及影響乙烯合成途徑的關(guān)鍵基因表達(dá)還為見(jiàn)過(guò)相關(guān)報(bào)道。因此，本研究以“貴長(zhǎng)”獼猴桃為材料，研究不同濃度1-MCP對(duì)“貴長(zhǎng)”獼猴桃貯藏期間和貨架期間的理化參數(shù)和酶活性，并且研究了1-MCP影響獼猴桃成熟過(guò)程中乙烯生物合成途徑的2個(gè)關(guān)鍵基因表達(dá)及合成，進(jìn)而解釋高濃度的1-MCP對(duì)獼猴桃造成“負(fù)面影響”問(wèn)題，從而尋找獼猴桃適宜后熟品質(zhì)的1-MCP閾值，以期為達(dá)到更好地保持獼猴桃后熟品質(zhì)提供理論依據(jù)和技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

“貴長(zhǎng)”獼猴桃鮮果,于2017 年10月12日采摘于貴州省貴陽(yáng)市鵬盛通農(nóng)業(yè)有限公司基地；1-甲基環(huán)丙烯(1-MCP)，購(gòu)自美國(guó)陶氏益農(nóng)公司; PE保鮮膜(厚度為20 μm)，由國(guó)家農(nóng)產(chǎn)品保鮮工程技術(shù)研究中心生產(chǎn)。

TA.XT.Plus質(zhì)構(gòu)儀，英國(guó)SMS公司；精準(zhǔn)控溫保鮮庫(kù)(±0.5℃、(90±5)%)，國(guó)家農(nóng)產(chǎn)品保鮮工程技術(shù)研究中心(天津)；熒光定量機(jī)(CFX96 Touch Deep well)，美國(guó)Bio-Rad公司。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 處理方法

“貴長(zhǎng)”獼猴桃采摘后立即運(yùn)回貴州省果品加工工程技術(shù)研究中心果蔬貯藏與保鮮研究室。選擇大小基本一致、無(wú)病蟲(chóng)害、無(wú)機(jī)械損傷的果實(shí)，分 7組，每組120 kg果實(shí)，使用大功率工業(yè)風(fēng)扇對(duì)獼猴桃除去田間熱，愈傷24 h后分別置于7個(gè)低密度聚乙烯(厚度：0.08 mm，體積：1 m3)帳內(nèi)，以不同質(zhì)量濃度1-MCP (0.25、0.5、0.75、1.0、1.25、1.5 μL/L) 分別對(duì)6組樣品進(jìn)行熏蒸處理24 h，溫度為[(25 ±1)℃]， 另一組對(duì)照處理(CK)只放相同質(zhì)量的蒸餾水。熏蒸后經(jīng) 20 μm的PE保鮮膜分裝(10 kg/袋)，每組設(shè) 3個(gè)重復(fù)，分裝后的果實(shí)放置(0 ± 0.5)℃的環(huán)境中預(yù)冷24 h后扎袋貯藏，貯藏120 d后出庫(kù)進(jìn)行貨架實(shí)驗(yàn)，貨架果實(shí)擺放在溫度為(25 ±2)℃房間內(nèi)，每3 d對(duì)不同處理進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)測(cè)定，測(cè)定周期為12 d。

1.2.2 感官品質(zhì)評(píng)價(jià)

根據(jù)感官評(píng)價(jià)小組成員對(duì)貨架末期(12 d)時(shí)的獼猴桃口感風(fēng)味進(jìn)行評(píng)價(jià)，采用分析型感官實(shí)驗(yàn)，參照宋小青等的測(cè)定方法[9]，略有改動(dòng)，具體評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表1。

表1 感官品質(zhì)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)Table 1 Sensory quality evaluation standard

1.2.3 硬度的測(cè)定

參照曹森等報(bào)道的方法對(duì)果實(shí)硬度進(jìn)行測(cè)定[10]。采用英國(guó)TA XT Plus物性測(cè)定儀測(cè)定，利用P/2探頭對(duì)其進(jìn)行穿刺測(cè)試，測(cè)試參數(shù):穿刺深度為10 mm，測(cè)前速度為2 mm/s，測(cè)試速度為 1mm/s，測(cè)后速度為2 mm/s。

1.2.4 多聚半乳糖醛酸酶(PG)活性的測(cè)定

參照LOHANI等的報(bào)道的方法進(jìn)行測(cè)定[11]。

1.2.5 呼吸強(qiáng)度和乙烯生成速率的測(cè)定

呼吸強(qiáng)度和乙烯生成速率的測(cè)定均參照張鵬等報(bào)道的方法進(jìn)行測(cè)定[12]。

1.2.6 ACS活性和ACO活性的測(cè)定

1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸合成酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylate synthase, ACS)活性和1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸氧化酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylate oxidase, ACO)活性的測(cè)定均按曹建康的方法測(cè)定[13]。

1.2.7 RNA的提取及ACS1和ACO1基因表達(dá)的測(cè)定

用生工生物工程(上海)股份有限公司Trizol Reagent(NO. B610409)的RNA提取試劑盒提取獼猴桃樣品的RNA，然后用One Step RT-qPCR Kit(NO. B639277)把RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA，參照MINAS等[14-15]建立的獼猴桃熒光定量PCR的反應(yīng)體系和程序進(jìn)行試驗(yàn)。獼猴桃ACS1和ACO1基因序列以及熒光定量引物參照MINAS等[14]的研究報(bào)道，具體引物見(jiàn)表2。

表2 引物序列Table 2 Primer sequence

1.2.8 ACC含量和MACC含量的測(cè)定

1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid, ACC)含量和丙二?；?1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸(malonyl-1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid, MACC)含量參照MINAS等的方法進(jìn)行測(cè)定[14]

1.2.9 VC含量和固酸比含量的測(cè)定

VC含量和固酸比含量的測(cè)定均參照韓飛等報(bào)道的方法進(jìn)行測(cè)定[15]。

1.3 數(shù)據(jù)處理與分析

采用Origin Pro 2017軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，采用SPSS 19.0軟件的Duncan氏新復(fù)極差法進(jìn)行數(shù)據(jù)差異顯著性分析及用主成分分析法來(lái)分析各樣品間的差異(P<0.05為差異顯著，P>0.05為差異不顯著)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同質(zhì)量濃度1-MCP處理對(duì)獼猴桃感官評(píng)價(jià)的影響

果實(shí)的感官品質(zhì)決定其商品價(jià)值。由圖1可見(jiàn)，不同質(zhì)量濃度的1-MCP處理均影響果實(shí)的外觀新鮮度、果肉顏色、硬度、多汁性、甜味、酸味、芳香味、過(guò)熟味及香味持久性，最終影響果實(shí)的綜合評(píng)價(jià)。1.25 μL/L和1.5 μL/L的處理組果實(shí)在多汁性、甜味、酸味、芳香味、過(guò)熟味及香味持久性方面均不如對(duì)照處理，并且兩處理組在硬度方面顯著高于其他處理組(P<0.05)，說(shuō)明1-MCP質(zhì)量濃度過(guò)高影響獼猴桃的后熟品質(zhì)，造成爛而不軟的“僵尸果”。0.75 μL/L處理組的果實(shí)新鮮，果肉顏色好，硬度適中，豐富的多汁性、甜味和酸味適中，果實(shí)芳香味濃、無(wú)過(guò)熟味道，香味持久性好，并且綜合評(píng)價(jià)高，均好于其他處理，0.5 μL/L處理組次之，0.25 μL/L和1 μL/L的處理組好于對(duì)照處理，但均不如0.5 μL/L處理組和0.75 μL/L處理組。貨架末期(12 d)時(shí)，通過(guò)對(duì)不同處理的果實(shí)感官品質(zhì)綜合評(píng)價(jià)分析可知， CK組、0.25 μL/L組、0.5 μL/L組、0.75 μL/L組、1 μL/L組、1.25 μL/L組和1.5 μL/L組的綜合評(píng)價(jià)分別為3.48、5.48、8.44、9.12、4.85、2.25、1.86，其中0.75 μL/L組的綜合評(píng)價(jià)最高，其次為0.5 μL/L組。因此，適宜的1-MCP質(zhì)量濃度能夠更好地保持果實(shí)的后熟感官品質(zhì)，1-MCP質(zhì)量濃度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致獼猴桃感官品質(zhì)出現(xiàn)負(fù)面效應(yīng)。

圖1 1-MCP處理對(duì)獼猴桃感官品質(zhì)的影響Fig.1 Effects of 1-MCP treatment on the sensory quality of kiwifruit

2.2 不同質(zhì)量濃度1-MCP處理對(duì)獼猴桃硬度和PG活性的影響

圖2-A表明，不同處理的果實(shí)硬度呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，在冷藏結(jié)束時(shí)，1.25 μL/L和1.5 μL/L的處理組硬度均顯著高于其他處理(P<0.05)，但與其他處理沒(méi)有顯著差異(P>0.05)。CK、0.25 μL/L和1 μL/L的處理硬度在貨架期6 d時(shí)分別降至1.16、1.48和1.37 kg/cm2，而此時(shí)0.5 μL/L和0.75 μL/L的處理組硬度分別為4.57、4.33 kg/cm2。STEC等[16]報(bào)道了當(dāng)獼猴桃硬度為0.5 ～1.5 kg/cm2，果實(shí)食用口感良好。說(shuō)明貨架期6 d時(shí)，CK、0.25 μL/L和1 μL/L的處理果實(shí)均處于可食階段。貨架末期(12 d)時(shí)，1.25 μL/L和1.5 μL/L的處理組硬度均顯著高于其他處理(P<0.05)，這與圖1貨架末期感官品質(zhì)結(jié)果相一致。0.5 μL/L和0.75 μL/L的硬度分別為0.98、1.26 kg/cm2， 說(shuō)明此時(shí)依然處于可食階段。而CK、0.25 μL/L和1 μL/L的處理硬度分別為0.21、0.35、0.45 kg/cm2，說(shuō)明3個(gè)處理組在貨架末期由于過(guò)軟已處于不可食階段。圖2-B表明，PG活性呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)。在冷藏期間，不同處理沒(méi)有顯著差異(P<0.05)。 貨架期開(kāi)始，CK和0.25 μL/L的處理組PG活性開(kāi)始快速上升，至貨架期6 d時(shí)，兩處理PG活性達(dá)到最大值。

圖2 1-MCP處理對(duì)獼猴桃硬度(A)和多聚半乳糖醛酸酶活性(B)的影響Fig.2 Effects of 1-MCP treatment on the firmness and the polygalacturonase of kiwifruit

貨架期12 d時(shí)，不同處理組的PG活性大小關(guān)系為CK組>0.25 μL/L組>1 μL/L組>0.5 μL/L組>0.75 μL/L組>1.25 μL/L組>1.5 μL/L組，并且在整個(gè)貨架期，1.25 μL/L和1.5 μL/L的處理組PG活性均處于較低水平。PG活性影響果實(shí)的軟化[17]，這與圖2-A研究的結(jié)果一致。因此，0.75 μL/L組能夠更好地保持果實(shí)的硬度，維持適宜的PG活性，0.5 μL/L 組次之。

2.3 不同質(zhì)量濃度1-MCP處理對(duì)獼猴桃呼吸強(qiáng)度和乙烯生成速率的影響

呼吸速率是反映儲(chǔ)存效果的重要指標(biāo)。在一般情況下，呼吸強(qiáng)度越高，果實(shí)呼吸越旺盛，進(jìn)而營(yíng)養(yǎng)成分消耗[17-18]。由圖3-A可見(jiàn)，經(jīng)過(guò)120 d的冷藏，1-MCP處理組果實(shí)呼吸強(qiáng)度沒(méi)有顯著差異(P>0.05)，而CK組達(dá)到呼吸高峰，貨架期3 d時(shí)， 0.25 μL/L、1 μL/L、1.25 μL/L 和1.5 μL/L的處理組果實(shí)呼吸強(qiáng)度均達(dá)到呼吸高峰， 0.5 μL/L和0.75μL/L的處理在貨架期 6 d 時(shí)才達(dá)到呼吸高峰。

圖3 1-MCP處理對(duì)獼猴桃呼吸強(qiáng)度(A)和乙烯生成速率(B)的影響Fig.3 Effects of 1-MCP treatment on the respiration intensity and the ethylene production rate of kiwifruit

貨架末期(12 d) 時(shí)，不同處理組的呼吸強(qiáng)度大小關(guān)系為CK組>0.25 μL/L組>1 μL/L組>1.25 μL/L組>1.5 μL/L組>0.5 μL/L組>0.75 μL/L組，并且不同處理組均顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。果實(shí)在冷藏120 d維持較低的乙烯生成速率(圖3-B)，并且相互之間沒(méi)有顯著差異(P>0.05)。貨架期3 d，CK、0.25 μL/L和1 μL/L的處理組乙烯生成速率均快速上升，在貨架末期時(shí)，不同處理組的呼吸強(qiáng)度大小關(guān)系為CK組>0.25 μL/L 組>1 μL/L組>0.5 μL/L組>0.75 μL/L組>1.25 μL/L組>1.5 μL/L組。說(shuō)明適宜濃度的1-MCP均能夠更好地保持果實(shí)的呼吸強(qiáng)度，降低果實(shí)的乙烯生成速率，推遲果實(shí)呼吸峰的出現(xiàn)，但果實(shí)乙烯生成速率過(guò)低，有可能導(dǎo)致?tīng)€而不軟的“僵尸果”出現(xiàn)。

2.4 不同質(zhì)量濃度1-MCP處理對(duì)獼猴桃乙烯生物合成的影響

圖4-A顯示隨著果實(shí)的軟化，ACS活性呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，在冷藏120 d內(nèi)，不同處理的ACS活性沒(méi)有顯著差異(P>0.05)。從貨架期開(kāi)始對(duì)照處理的ACS活性快速上升，貨架期9 d時(shí)不同處理的ACS活性達(dá)到峰值，并且CK組顯著高于其他處理(P<0.05)，1.25 μL/L組和1.5 μL/L組處理的ACS活性均一直處于較低水平。圖4-B表明，從冷藏期間到貨架期間CK組果實(shí)的ACO活性均高于其他處理。不同處理組果實(shí)ACO活性。貨架期12 d時(shí)，不同處理的ACO活性大小關(guān)系為CK組>0.25 μL/L組>1 μL/L組>0.5 μL/L組>0.75 μL/L組>1.25 μL/L組>1.5 μL/L組。說(shuō)明適宜濃度的1-MCP能在貨架期9 d均開(kāi)始出現(xiàn)下降的趨勢(shì)，這有可能由于貨架后期獼猴桃腐爛率快速導(dǎo)致的(圖1)，這與MA等研究結(jié)果一致[18夠保持果實(shí)的ACS活性和ACO活性。

圖4-C和圖4-D表明在冷藏120d內(nèi)，經(jīng)過(guò)不同質(zhì)量濃度的1-MCP處理對(duì)獼猴桃ACS1和ACO1基因表達(dá)的積累沒(méi)有顯著差異(P>0.05)。由圖4-C可見(jiàn)，貨架期3 d開(kāi)始不同處理的獼猴桃均顯示ACS1和ACO1表達(dá)的快速上調(diào)。貨架期9 d時(shí)，不同處理的果實(shí)ACS1相對(duì)表達(dá)量的大小關(guān)系為CK組>0.25 μL/L組>0.5 μL/L組>0.75 μL/L組>1 μL/L組>1.25 μL/L 組>1.5 μL/L組，說(shuō)明隨著1-MCP濃度增加，抑制ACS1的表達(dá)越明顯。貨架期9 d的果實(shí)顯示ACS1表達(dá)快速下調(diào)，原因可能由于果實(shí)衰老導(dǎo)致(圖1)。貨架期12 d時(shí)，不同的處理ACS1相對(duì)表達(dá)量沒(méi)有顯著差異(P>0.05)。由圖4-D可見(jiàn)，從冷藏開(kāi)始至貨架期3 d時(shí)，CK組顯著高于其他處理(P<0.05)，而1-MCP處理均處于較低水平。從貨架期3 d開(kāi)始，不同1-MCP處理出現(xiàn)不同程度的ACO1表達(dá)上調(diào)。貨架期9 d時(shí)，不同處理的果實(shí)ACO1相對(duì)表達(dá)量均達(dá)到峰值，其大小關(guān)系同圖4-C貨架期9 dACS1的表達(dá)量一致。貨架期12 d時(shí)，CK組、0.25 μL/L 組、0.5 μL/L組、0.75 μL/L組、1 μL/L組、1.25 μL/L組和1.5 μL/L組ACO1相對(duì)表達(dá)量分別為13.74、100.46、65.50、50.72、23.24、33.23、19.12。由此說(shuō)明不同濃度1-MCP影響ACS1和ACO1的相對(duì)表達(dá)量，1-MCP濃度過(guò)高導(dǎo)致ACS1和ACO1一直處于較低水平，進(jìn)而影響乙烯的合成，影響果實(shí)的軟化，這與圖3-B研究結(jié)果一致。

圖4-E和圖4-F表明，在冷藏期間獼猴桃ACC和MACC含量均非常低，而從貨架期開(kāi)始果實(shí)的ACC和MACC含量快速上升，經(jīng)過(guò)12 d的貨架期，不同處理的ACC和MACC含量的大小關(guān)系均為CK組>0.25 μL/L組>1 μL/L組>0.5 μL/L組>0.75 μL/L 組>1.25 μL/L組>1.5 μL/L組，并且CK組的果實(shí)ACC和MACC含量均顯著高于1-MCP 處理(P<0.05)，而1.25 μL/L組和1.5 μL/L組處理的ACC和MACC含量在整個(gè)貨架期間均處于較低水平，說(shuō)明高濃度的1-MCP處理能夠極大地抑制ACC和MACC的積累。適宜濃度的1-MCP 能夠維持果實(shí)一定的ACC和MACC含量。

圖4 1-MCP處理對(duì)獼猴桃乙烯生物合成的影響Fig.4 Effects of 1-MCP treatment on the ethylene biosynthesis of kiwifruit

2.5 不同質(zhì)量濃度1-MCP處理對(duì)獼猴桃VC含量和固酸比的影響

Vc是獼猴桃重要的營(yíng)養(yǎng)成分，固酸比是果實(shí)完熟時(shí)口感和內(nèi)在品質(zhì)的重要指標(biāo)。由圖5-A可見(jiàn)，冷藏120 d后，0.75 μL/L組果實(shí)的VC含量顯著高于其他處理(P<0.05)。從貨架期開(kāi)始，CK組開(kāi)始快速下降，貨架期12 d時(shí)，不同處理果實(shí)的VC含量大小關(guān)系為0.75 μL/L組>0.5 μL/L組>0.25 μL/L組>1 μL/L組>1.25 μL/L組>1.5 μL/L組>CK組。圖5-B表明，固酸比呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)，果實(shí)的固酸比在前期上升可能由于后熟作用導(dǎo)致可溶固形物含量上升較快，從而使固酸比上升，而果實(shí)固酸比后期上升的原因可能由于可滴定酸含量下降較快的原因?qū)е耓9]。冷藏結(jié)束時(shí)，不同處理的固酸比沒(méi)有顯著差異(P>0.05)。貨架期12 d時(shí)，CK組、0.25 μL/L組、0.5 μL/L組、0.75 μL/L組、1 μL/L組、1.25 μL/L組和1.5 μL/L 組處理的果實(shí)固酸比分別為13.67、13.21、10.87、10.45、12.98、12.85、12.03。

圖5 1-MCP處理對(duì)獼猴桃VC含量(A)和固酸比(B)的影響Fig.5 Effects of 1-MCP treatment on the VC content and the ratio of sugar to acid of kiwifruit

由此說(shuō)明，0.75 μL/L的處理能夠更好地維持果實(shí)VC的含量和口感，其次為0.5 μL/L的處理，這與圖1研究結(jié)果一致。

3 討論

在植物細(xì)胞中，乙烯是由S-腺苷蛋氨酸(SAM)合成的，由ACC合成酶(ACS)轉(zhuǎn)化為1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸(ACC)。ACC隨后被ACC氧化酶(ACC)氧化(ACO)，產(chǎn)生乙烯、CO2和氰化物[19]，因此乙烯的產(chǎn)生率是由其直接前體ACC水平控制的[20]。通常，植物乙烯的生產(chǎn)維持在較低的基礎(chǔ)水平，但在某些發(fā)展階段或壓力刺激下會(huì)迅速而劇烈地誘導(dǎo)。雖然ACS通常被認(rèn)為是乙烯生物合成的限速步驟，但有越來(lái)越多的證據(jù)表明，在不同植物的特定發(fā)育和脅迫條件下，ACO也作為控制點(diǎn)[21-22]。

ACS和ACC氧化酶(ACO)是乙烯生物合成途徑中涉及的兩個(gè)關(guān)鍵酶，都是各種植物器官的多基因家族編碼[23]。它們已被證明，乙烯的生物合成受到正面和負(fù)面的反饋調(diào)節(jié)[24]。為了進(jìn)一步闡明獼猴桃成熟期間乙烯的生產(chǎn)的機(jī)制，我們?cè)u(píng)估了乙烯生物合成的關(guān)鍵酶的活性,即ACS和ACO。ILINA等研究表明乙烯-烯生物合成基因ACS1和ACO1分別對(duì)ACC合成酶和ACC氧化酶進(jìn)行編碼[25]。盡管MACC并沒(méi)有被認(rèn)為是ACC的重要存儲(chǔ)形式，但ACC丙二?；磻?yīng)仍然可以調(diào)節(jié)ACC水平[26]。

圖4-A和圖4-B顯示,隨著果實(shí)的軟化，ACS和ACO活性呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，并且1-MCP處理能夠抑制ACS和ACO活性的上升。但1 μL/L的1-MCP處理對(duì)2個(gè)關(guān)鍵酶活性的抑制反而不如低濃度0.5 μL/L和0.75 μL/L的處理，并且1.25 μL/L和1.5 μL/L一直處于較低水平。通過(guò)圖4-C和圖4-D表明,1.25 μL/L和1.5 μL/L的處理ACS1和ACO1的表達(dá)一直處于較低水平，進(jìn)而影響乙烯的合成，降低了乙烯的生成速率(圖3)，這與圖4-E和圖4-F兩種處理(1.25 μL/L和1.5 μL/L)的ACC含量和MACC含量結(jié)果相一致。說(shuō)明1.25 μL/L和1.5 μL/L的處理影響了果實(shí)的正常軟化，從而導(dǎo)致果實(shí)硬化(圖2)，口感差(圖5)等問(wèn)題，也就是市場(chǎng)上反饋的“僵尸果”現(xiàn)象的原因。而1 μL/L的1-MCP在貨架后期能夠快速軟化，但1.25 μL/L和1.5 μL/L的1-MCP處理出現(xiàn)“僵尸果”現(xiàn)象，并且高濃度的(1 μL/L、 1.25 μL/L和1.5 μL/L)1-MCP貨架末期(12 d)果實(shí)的感官綜合評(píng)價(jià)較低(圖1)，原因可能是1-MCP濃度使用過(guò)高導(dǎo)致果實(shí)生理代謝紊亂，至于相關(guān)機(jī)理待于進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

綜合比較，0.75 μL/L的處理能夠有效抑制果實(shí)ACS和ACO的酶活性及ACS1和ACO1的基因表達(dá)量，降低了ACC和MACC含量，維持果實(shí)的硬度、PG活性、VC含量和固酸比，保持果實(shí)更好地后熟品質(zhì)，并且能夠使果實(shí)正常軟化，獼猴桃在貨架期12 d時(shí)的感官綜合評(píng)價(jià)高達(dá)9.12，0.5 μL/L的處理次之，而1.25 μL/L和1.5 μL/L的處理會(huì)出現(xiàn)果實(shí)硬化，口感差等“僵尸果”現(xiàn)象。因此，采后用0.5～0.75 μL/L 1-MCP 來(lái)處理獼猴桃對(duì)保持果實(shí)后熟品質(zhì)的效果最好。