王美月　陳倩如　岑妹紅　廉蓮

摘 要 為優(yōu)化軟棗獼猴桃中多糖的提取工藝，在單因素基礎(chǔ)上，以料液比、超聲溫度、超聲時(shí)間和超聲功率為影響因素，進(jìn)行正交試驗(yàn)來(lái)優(yōu)化提取工藝。結(jié)果顯示，最佳提取工藝為料液比1∶15（g·mL-1），超聲溫度

50 ℃，超聲時(shí)間50 min，超聲功率90 W，此時(shí)多糖的提取率為2.05%。這種提取工藝簡(jiǎn)便可行，可用于優(yōu)化軟棗獼猴桃中多糖的提取工藝，為其資源的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供了理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞 軟棗獼猴桃;多糖提取;單因素試驗(yàn);正交試驗(yàn)

中圖分類(lèi)號(hào)：S663.4 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2019.08.075

軟棗獼猴桃[Actinidia arguta（Sieb.&Zucc）Planch.ex Miq.]為獼猴桃科、獼猴桃屬落葉藤本植物，也叫“軟棗子”“奇異莓”。鮮果可食用，也可做藥用，價(jià)值較高，除含有豐富的維生素C外，還含有黃酮、多糖、生物堿、皂苷等多種活性成分[1]。大量研究結(jié)果表明，軟棗獼猴桃在防治心臟病、保肝、降脂減肥、防治糖尿病及癌癥等方面均有明顯效果，其藥理作用與其所含有的黃酮、多糖等成分有密切關(guān)系[2-4]。但是，目前對(duì)軟棗獼猴桃中多糖的提取多集中在單指標(biāo)的考察方面，不能很好地評(píng)價(jià)其提取工藝的優(yōu)劣。為此，本實(shí)驗(yàn)對(duì)軟棗獼猴桃中的多糖提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化，以期為軟棗獼猴桃的深入開(kāi)發(fā)與利用提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器與材料

實(shí)驗(yàn)儀器有紫外可見(jiàn)分光光度儀（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）、AR224CN電子天平（奧豪斯儀器上海有限公司）、三頻數(shù)控超聲波清洗器（鄭州生元儀器有限公司）、離心機(jī)（上海盧湘儀儀器有限公司）、SY-5000旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海賢德實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）。實(shí)驗(yàn)材料為軟棗獼猴桃（采于遼寧省本溪，由遼寧科技學(xué)院葛會(huì)奇教授鑒定為軟棗獼猴桃）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 軟棗獼猴桃的預(yù)處理

取軟棗獼猴桃鮮果，去除雜質(zhì)洗凈后，于低溫冰箱里預(yù)凍12 h后取出，在半融化狀態(tài)下將其切成薄片，置于恒溫烘箱中低溫干燥至恒重，粉碎后過(guò)40目篩，備用。

1.2.2 多糖的測(cè)定及標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

多糖的測(cè)定采用5%苯酚-硫酸顯色法[5]：精密稱(chēng)取葡萄糖20 mg于100 mL容量瓶中，加水至刻度，分別吸取2.0 mL、4.0 mL、6.0 mL、8.0 mL、10.0 mL，分別注入100 mL容量瓶中加水定容至刻度，搖勻。精密量取上述各溶液2 mL于具塞試管中，加入5%苯酚溶液1.0 mL，濃硫酸5.0 mL，搖勻，沸水浴中顯色15 min后再置冷水浴中5 min，于490 nm測(cè)定吸光度。以吸光度A值為縱坐標(biāo)，葡萄糖濃度C為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程A=0.018 4C+0.018 1（r=0.999 2）。

1.2.3 軟棗獼猴桃多糖供試液的制備

取軟棗獼猴桃粉末5 g，超聲提取一定時(shí)間，待提取液回收濃縮至原體積的1/10時(shí)，加10倍體積的乙醇，靜置12 h，離心，干燥，取適量熱水超聲溶解，100 mL容量瓶定容，取上清液1.0 mL，測(cè)定多糖含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 軟棗獼猴桃提取工藝的單因素試驗(yàn)

固定其他因素保持一致，分別對(duì)料液比、超聲時(shí)間、超聲溫度、超聲功率進(jìn)行單因素考察，結(jié)果如圖1～圖4所示。當(dāng)規(guī)定超聲時(shí)間為30 min、超聲功率

70 W、超聲溫度40 ℃時(shí)，多糖的含量隨料液比先增加后減小，料液比為1∶20時(shí)出現(xiàn)最大值，料液比為1∶10不能提取完全，故料液比的選擇區(qū)間應(yīng)為1∶15～1∶

25（g·mL-1）;當(dāng)規(guī)定料液比為1∶15（g·mL-1）、超聲功率為70 W、超聲溫度40 ℃時(shí)，多糖的含量隨超聲時(shí)間的增加先緩慢增加后減小，故超聲時(shí)間的選擇區(qū)間應(yīng)為30～50 min;當(dāng)規(guī)定料液比為1∶15（g·mL-1）、超聲時(shí)間為30 min、超聲功率為70 W時(shí)，多糖的含量隨超聲溫度的增加先增加后減少，故超聲溫度的選擇區(qū)間應(yīng)為40～60 ℃;當(dāng)規(guī)定料液比為1∶15（g·mL-1）、超聲時(shí)間為30 min、超聲溫度為40 ℃時(shí)，總多糖的含量隨超聲功率先增加后保持不變，故超聲功率的選擇區(qū)間應(yīng)為60～80 W。

2.2 軟棗獼猴桃中多糖提取工藝條件的優(yōu)選

在單因素考察的基礎(chǔ)上，選用L9（34）正交設(shè)計(jì)對(duì)軟棗獼猴桃中多糖的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計(jì)。正交試驗(yàn)因素水平見(jiàn)表1，結(jié)果見(jiàn)表2、表3。

由表2中極差R值可知，影響軟棗獼猴桃中多糖提取率的主次順序?yàn)锳>C>B>D，即料液比>超聲溫度>超聲時(shí)間>超聲功率，各因素的優(yōu)化工藝參數(shù)為A1B2C3D3，即料液比1∶15（g·mL-1），超聲溫度50 ℃，超聲時(shí)間50 min，超聲功率90 W。

由于超聲功率（D）對(duì)提取率影響最小，故其在方差分析表（表3）中作為誤差項(xiàng)。由表3可知，料液比（A）與超聲溫度（C）對(duì)軟棗獼猴桃中多糖提取率影響顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

軟棗獼猴桃由于具有極高的營(yíng)養(yǎng)、保健及藥用功能，日益引起人們的重視。遼寧現(xiàn)已成為中國(guó)最大的軟棗獼猴桃產(chǎn)業(yè)基地，同時(shí)其也是遼寧省農(nóng)業(yè)主推的經(jīng)濟(jì)物種。隨著軟棗獼猴桃產(chǎn)業(yè)不斷發(fā)展，發(fā)展過(guò)程中存在的問(wèn)題也日益突出，主要表現(xiàn)在：對(duì)軟棗獼猴桃資源的有效利用還不充分，現(xiàn)有產(chǎn)品多以簡(jiǎn)單粗加工為主，經(jīng)濟(jì)附加值低，缺乏有市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力的新品種。因此，對(duì)軟棗獼猴桃的高附加值、新型功能保健產(chǎn)品及藥品的研制迫在眉睫。

本試驗(yàn)的最佳提取工藝為料液比1∶15（g·mL-1），超聲溫度50 ℃，超聲時(shí)間50 min，超聲功率90 W，多糖的提取率為2.05%。結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)所建立的軟棗獼猴桃的多糖提取工藝方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，可以為軟棗獼猴桃的深入開(kāi)發(fā)與利用提取一定的理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

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（責(zé)任編輯：趙中正）