陳銳芳 徐建民 周麗銀

【摘要】 目的：探討圍產(chǎn)期婦女陰道分泌物中無(wú)乳鏈球菌（GBS）的感染情況，并根據(jù)其藥敏結(jié)果判斷GBS的耐藥情況，為臨床用藥提供依據(jù)。方法：對(duì)2016年6月-2017年12月到本院產(chǎn)檢或住院的圍產(chǎn)期婦女進(jìn)行GBS檢測(cè)，按年齡分為4個(gè)組：<20歲組，20～30歲組，31～40歲組，>40歲組。對(duì)各組孕婦取陰道分泌物進(jìn)行培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)菌形態(tài)、溶血、觸酶試驗(yàn)、CAMP試驗(yàn)篩查為GBS者，需采用梅里埃ATB自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)進(jìn)行鑒定和藥物敏感性分析。結(jié)果：共檢查3 055病例，檢出169株GBS，其中檢出例數(shù)最多的是20～30歲組為128例，其檢出率也最高為6.2%，年齡段比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。169株GBS藥敏結(jié)果顯示：對(duì)氯霉素、左氧氟沙星、喹奴普汀/達(dá)福普汀、紅霉素、四環(huán)素的耐藥率分別為：20.1%、24.2%、11.8%、70.4%、87.6%，未發(fā)現(xiàn)對(duì)青霉素、萬(wàn)古霉素、頭孢噻肟的耐藥株。結(jié)論：加強(qiáng)對(duì)GBS的培養(yǎng)檢測(cè)，關(guān)注其耐藥趨勢(shì)，為臨床用藥提供更好的依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 圍產(chǎn)期婦女; 無(wú)乳鏈球菌; 感染; 耐藥

【Abstract】 Objective：To explore the infection of group B streptococci（GBS）in the vaginal secretions of perinatal women and judge the drug resistance of GBS according to the results of antimicrobial susceptibility test，and to provide a basis for clinical medication.Method：Perinatal women received prenatal examination or hospitalized in our hospital who underwent GBS detection from June 2016 to December 2017 were divided into four groups，<20 years old group，20-30 years old group，31-40 years old group，>40 years old group.The vaginal secretions of pregnant women in each group were collected and cultured.The women who screened as GBS positive on the basis of bacterial morphology，beta hemolysis，catalase test and CAMP test needed to perform identification and drug susceptibility analysis with Merieux ATB automatic microorganism identification/ drug susceptibility analysis system.Result：Totally 3 055 cases were examined and 169 strains of GBS were detected.The positive number was the highest in the 20-30 years group（128 cases），and similar result was found in the detection rate（6.2%），which suggested that the age had statistically significant difference（P<0.05）.The drug susceptibility results of 169 strains of GBS revealed that the drug resistance rate to Chloroamphenicol，Levofloxacin，Quinupristin/ Dalfopristin，Erythromycin and Tetracycline were 20.1%，24.2%，11.8%，70.4%，87.6%，respectively.GBS strain resistant to penicillin，vancomycin or cefotaxime was not found.Conclusion：Enhancing of the GBS culture detection and concerning of the trend of drug resistance of GBS can offer a preferable foundation for clinical medication.

【Key words】 Perinatal women; Group B streptococci; Infection; Drug resistance

First-authors address：Maternal and Child Care Service Center of Yunfu City，Yunfu 527300，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.07.039

無(wú)乳鏈球菌（GBS）是一種條件致病菌，多寄生于女性生殖道和直腸，當(dāng)孕婦免疫力下降，GBS可經(jīng)產(chǎn)道上行導(dǎo)致子宮和胎膜感染，從而引起孕婦早產(chǎn)、流產(chǎn)、新生兒發(fā)育不良等，GBS也可通過(guò)垂直傳播，導(dǎo)致新生兒腦膜炎、肺炎、敗血癥等疾病[1-3]。目前，在國(guó)外GBS已被證實(shí)是圍產(chǎn)期嚴(yán)重感染性疾病的主要病原菌，但在我國(guó)對(duì)其尚未引起足夠重視[4]。GBS嚴(yán)重感染導(dǎo)致胎兒、新生兒死亡的病例也有報(bào)道[5]。但通過(guò)對(duì)圍產(chǎn)期婦女進(jìn)行GBS篩查，及時(shí)使用抗菌藥物，可有效減少圍產(chǎn)期的母嬰感染。本研究對(duì)2016年6月～2017年12月到本院產(chǎn)檢或住院的圍產(chǎn)期婦女進(jìn)行無(wú)乳鏈球菌檢測(cè)的，分析其不同年齡階段GBS的感染情況和總體的耐藥情況，為臨床用藥提供更好的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來(lái)源 收集2016年6月-2017年12月到本院產(chǎn)檢或住院的圍產(chǎn)期婦女陰道分泌物標(biāo)本，剔除同一患者的重復(fù)菌株后共3 055份標(biāo)本。3 055例孕婦按年齡進(jìn)行分組，<20歲組126例，20～30歲組2 051例，31～40歲組812例，>40歲組66例。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者同意作為研究項(xiàng)目的分析對(duì)象;②符合孕周要求;③能夠自主配合相關(guān)調(diào)查及研究，且思維和表達(dá)能力正常者。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①孕周不符者;②陰道出血者;③采樣前一個(gè)月內(nèi)接受過(guò)抗菌藥物治療者;④采樣前24 h內(nèi)接受過(guò)陰道清洗、藥膏治療者;⑤不能完成治療或不愿意參加本研究者。本研究取得所有孕婦的知情同意，經(jīng)過(guò)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.1.2 儀器和試劑 梅里埃ATB自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)，5%二氧化碳培養(yǎng)箱，5%哥倫比亞羊血瓊脂平板，3%過(guò)氧化氫溶液，質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)菌株（金黃色葡萄球菌ATCC25923、無(wú)乳鏈球菌ATCC12386）。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集 由臨床醫(yī)生采集生殖道分泌物標(biāo)本，孕婦在采樣前一個(gè)月內(nèi)未使用過(guò)任何抗菌藥物，采樣前24 h內(nèi)未接受過(guò)陰道清洗和治療，使用消毒窺陰器擴(kuò)張陰道，用無(wú)菌棉拭子采取陰道下1/3處黏膜分泌物，將棉拭子放回?zé)o菌套管中，立刻送檢。

1.2.2 檢測(cè)方法 將臨床采集的標(biāo)本直接接種于血平板，置35 ℃、5%二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)18～48h，觀察培養(yǎng)基生長(zhǎng)情況，挑取可疑菌落用3%過(guò)氧化氫溶液進(jìn)行觸酶試驗(yàn)，對(duì)結(jié)果陰性者進(jìn)行CAMP試驗(yàn)，指示菌株為金黃色葡萄球菌ATCC25923，CAMP試驗(yàn)陽(yáng)性者，通過(guò)梅里埃ATB自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏系統(tǒng)進(jìn)行鑒定和藥敏分析。

1.2.3 治療措施 根據(jù)藥物敏感性測(cè)試結(jié)果結(jié)合患者自身體質(zhì)選擇合理抗菌藥物進(jìn)行治療。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用WPS表格建立數(shù)據(jù)庫(kù)，采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示。

2 結(jié)果

2.1 不同年齡段感染率情況 3 055例孕婦中，

169例GBS培養(yǎng)陽(yáng)性，感染率為5.5%。其中20～30歲組GBS檢出率最高為6.2%，31～40歲組檢出率次之為4.7%，<20歲組檢出率為1.6%，>40歲組檢出率最低為1.5%。見(jiàn)表1。

2.2 藥敏結(jié)果 分離出的169株GBS對(duì)青霉素、萬(wàn)古霉素、頭孢噻肟高度敏感，無(wú)中介或耐藥現(xiàn)象;對(duì)氯霉素、左氧氟沙星、喹奴普汀/達(dá)福普汀、紅霉素、四環(huán)素的耐藥率分別為：20.1%、24.2%、11.8%、70.4%、87.6%;敏感率分別為：79.9%、73.4%、88.2%、29.6%、12.4%。見(jiàn)表2。

3 討論

GBS作為一種條件病原菌，是一種有莢膜的革蘭陽(yáng)性球菌，圍產(chǎn)期GBS感染會(huì)導(dǎo)致妊娠不良結(jié)局[6]。GBS傳播的主要途徑為垂直傳播，且與分娩有關(guān)，如果孕婦感染GBS，新生兒就可能在出生時(shí)吸入感染的羊水或經(jīng)產(chǎn)道感染[7]。據(jù)美國(guó)CDC統(tǒng)計(jì)，產(chǎn)婦感染GBS的發(fā)病率為10%～30%，其中40%～70%的感染孕婦在分娩過(guò)程中將GBS傳播至新生兒，1%～3%的帶菌新生兒早期即可出現(xiàn)侵入性感染，感染患兒的病死率約為5%[8]。因此，對(duì)圍產(chǎn)期婦女進(jìn)行GBS檢測(cè)并干預(yù)是減少母嬰嚴(yán)重感染的有效手段，而我國(guó)多數(shù)地區(qū)并未將GBS篩查作為孕產(chǎn)婦的常規(guī)檢查，使得國(guó)內(nèi)與孕婦GBS相關(guān)的流行病學(xué)資料缺乏。目前，國(guó)外很多國(guó)家已經(jīng)將孕晚期婦女GBS檢測(cè)納入產(chǎn)前常規(guī)篩查項(xiàng)目，以保證孕產(chǎn)婦和胎兒的健康。

近年來(lái)，孕婦圍產(chǎn)期GBS的篩查逐漸受到了重視，我國(guó)各地關(guān)于妊娠婦女GBS檢出率的報(bào)道差異較大，上海、江西、南京、深圳和東莞報(bào)道的孕婦檢出率分別為6.30%、10.21%、4.17%、4.50%和9.10%[9-13]，本次研究圍產(chǎn)期婦女GBS的檢出率為5.5%。研究結(jié)果顯示，圍產(chǎn)期不同年齡組GBS的感染情況存在顯著差異（字2=8.890，P=0.031），檢出例數(shù)最多的是20～30歲組為128例，其感染率也最高為6.2%，此年齡段的檢查總?cè)藬?shù)最多，符合臨床實(shí)際情況。圍產(chǎn)期GBS感染集中在20～30歲組，原因可能在于此年齡組婦女為生育旺盛期育齡婦女，性生活相對(duì)活躍、雌激素水平相對(duì)較高，陰道的微生態(tài)環(huán)境易受影響，從而導(dǎo)致GBS更容易定植。

目前預(yù)防圍產(chǎn)期GBS感染的主要措施是使用抗菌藥物，對(duì)攜帶GBS的孕產(chǎn)婦應(yīng)采取積極有效的治療方案。GBS通常對(duì)青霉素敏感，是臨床的首選用藥，但隨著抗菌藥物的應(yīng)用增多，現(xiàn)在已經(jīng)出現(xiàn)了耐藥菌株[14-15]。本研究分離出的169株GBS研究表明，對(duì)青霉素、萬(wàn)古霉素、頭孢噻肟類抗菌藥物具有高度敏感性，因萬(wàn)古霉素具有一定的肝腎毒性和較多不良反應(yīng)而不適合孕婦使用，頭孢噻肟為第三代頭孢菌素，它的使用會(huì)增加細(xì)菌的選擇壓力導(dǎo)致耐藥株的出現(xiàn)，故不作為一線用藥，青霉素過(guò)敏者可以選用，因此建議在本地區(qū)除過(guò)敏患者外，青霉素可作為孕產(chǎn)婦治療GBS的首選藥。GBS對(duì)氯霉素的敏感率雖然高達(dá)79.9%，但該藥會(huì)引起灰嬰綜合征，不適合孕婦使用。對(duì)喹奴普汀/達(dá)福普汀的耐藥率也較低為11.8%，但該種抗生素有多種副作用為孕婦禁用藥。本次研究，紅霉素的耐藥率高達(dá)70.4%，和省內(nèi)周邊三個(gè)地區(qū)的報(bào)道相近[8，13，16]，這與臨床干預(yù)孕齡婦女常見(jiàn)的生殖道支原體及細(xì)菌性感染，廣泛應(yīng)用大環(huán)內(nèi)酯類抗生素如：阿奇霉素、克拉霉素等藥物有密切的關(guān)系[17]。紅霉素不良反應(yīng)較小且便宜，對(duì)青霉素過(guò)敏患者經(jīng)藥敏試驗(yàn)敏感后可選用紅霉素。左氧氟沙星的耐藥率為24.2%，相比其他一些地區(qū)耐藥率不算高，但左氧氟沙星對(duì)新生兒的軟骨發(fā)育有一定的影響，為孕婦禁用藥。本研究結(jié)果還顯示，無(wú)乳鏈球菌對(duì)四環(huán)素的耐藥率最高（87.6%），與國(guó)內(nèi)外其他研究報(bào)道的四環(huán)素耐藥率普遍達(dá)到90%以上相比略低[18-19]，但它可引起胎兒牙齒變色，牙釉質(zhì)再生不良及抑制胎兒骨骼生長(zhǎng)，該類藥物為孕婦禁用藥。臨床治療圍產(chǎn)期婦女感染GBS，可以根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果合理選擇敏感藥物。對(duì)于GBS篩查陰性或孕期未進(jìn)行GBS篩查的產(chǎn)婦，如出現(xiàn)胎膜早破或分娩時(shí)發(fā)熱（>38 ℃）時(shí)，應(yīng)采集新生兒血液或腦脊液，或采集咽、耳、胎糞及胃抽吸液等進(jìn)行培養(yǎng)或快速鑒定，對(duì)篩查陽(yáng)性者應(yīng)積極、規(guī)范治療[20]。

綜上所述，隨著二胎生育的到來(lái)，圍產(chǎn)期婦女開展GBS的預(yù)防性篩查工作可有效防止新生兒GBS感染，保護(hù)產(chǎn)婦及胎兒健康。圍產(chǎn)期婦女感染GBS首選青霉素治療，或根據(jù)藥物敏感性測(cè)試結(jié)果結(jié)合患者自身體質(zhì)選擇合理抗生素治療，做到早預(yù)防、早發(fā)現(xiàn)、早治療，以降低對(duì)孕產(chǎn)婦及新生兒的危害。關(guān)注GBS耐藥趨勢(shì)，預(yù)防新耐藥菌株的出現(xiàn)，為臨床用藥提供更好的依據(jù)。

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（收稿日期：2018-10-15） （本文編輯：周亞杰）