肉制品中人工合成著色劑的測定

張紅芬 周剛

摘 ?要：目的 建立固相萃取高效液相色譜同時測定肉制品中檸檬黃、新紅、胭脂紅、莧菜紅、日落黃、誘惑紅、亮藍(lán)、赤蘚紅8種合成色素。方法 樣品采用乙醇-乙腈-甲醇-氨水=30：30：30：10提取，陰離子固相萃取小柱凈化，經(jīng)Inspire C18色譜柱分離，乙腈和 0.02 mol/L乙酸銨為流動相梯度洗脫，流速1.0mL/min。采用二極管陣列檢測器，采集254nm色譜合成圖進行外標(biāo)法定量，并通過與對照品的光譜比對進行確證。結(jié)果 8種合成色素在30min內(nèi)可有效分離，平均回收率為80.3%～98.0%，。結(jié)論 該方法前處理簡單、檢測快速、回收率滿意且重復(fù)性好，可作為肉制品中8種合成色素的檢測方法。

關(guān)鍵詞：肉制品;固相萃取;色素

食用合成著色劑簡稱合成色素，為增進人們的食欲，保持食品色澤鮮艷而添加的非營養(yǎng)成分，多以煤焦油中提煉出的苯胺染料為原料研制而成，有含R-N=N-R鍵、苯環(huán)或氧雜蒽等結(jié)構(gòu)[1-3]。合成色素色澤鮮艷、用量少、性質(zhì)穩(wěn)定、易著色，且價格相對便宜，但超標(biāo)、超范圍等不規(guī)范使用則會造成人體被動的攝入過量的食用合成色素，導(dǎo)致出現(xiàn)噯氣、偏頭痛、多種過敏癥狀以及中毒等癥狀，更有甚者造成致癌、致畸、致突變等危害。目前食品合成色素的檢測主要參照國標(biāo)GB/T5009.35-2003《食品中合成著色的測定》[4]、GB/T5009.141-2003《食品中誘惑紅的測定》[5]、SN/T1743-2006《食品中的誘惑紅、酸性紅、亮藍(lán)、日落黃的含量檢測》[6]需采用多個液相系統(tǒng)才能完成對8合成色素的檢測，且樣品前處理較復(fù)雜，檢測耗時長。文獻報道[7-8]的這些檢測方法多是針對這些人工合成色素中的一種或幾種，而沒有關(guān)于這8種人工合成色素在肉制品中同時檢測的報道。并且這些檢測方法的樣品凈化過程一般都采用聚酰胺吸附法或是液液萃取法（赤蘚紅）等，這些前處理方法具有操作環(huán)境差、操作費時繁瑣、回收率低等特點。鑒于此，本方案采用ProElut PWA固相萃取小柱對樣品進行前處理，對8種常見的合成色素進行檢測。

一、本方案適用范圍

本方案適用于肉腸（不含淀粉或含淀粉較少的火腿腸）中人工合成著色劑的檢測。同樣適用于其他熟食類樣品中色素的測定。

二、樣品提取

（1）取1.0 g樣品，加入20 mL提取液A*，振蕩2 min，超聲提取10 min，6000 rpm下離心2 min，收集上清液

（2）取下層殘留物，加入10 mL提取液A，振蕩2 min，超聲提取15 min，6000 rpm下離心2 min，收集上清液;

（3）將下層殘留物用10mL提取液A按照步驟（2）重復(fù)提取一次，合并三次上清液;

（4）將上清液在40℃水浴條件下，減壓蒸至約3 mL，再加入2 mL水混勻，用甲酸調(diào)pH至5.0左右，待凈化。

備注：提取液A：乙醇-乙腈-甲醇-氨水=30：30：30：10

三、固相萃取柱凈化

1）活 ? ?化： 依次用5 mL甲醇、5 mL水活化固相萃取柱;

2）上 ? ?樣： 加入待凈化液，棄去流出液;

3）淋 ? ?洗： 依次加入5 mL2%甲酸水溶液、5 mL水、5 mL甲醇，棄去流出液，真空泵抽干2min;

4）洗 ? ?脫： 加入5 mL15%氨水甲醇溶液，收集流出液;

5）重新溶解： 將洗脫液在50 ℃下氮吹至約500 μL，用0.02 mol/L乙酸銨溶液定容至1 mL，供HPLC分析。

四、色譜條件

色譜柱：Inspire C18，250 mm×4.6 mm，5μm

流 ?速：1.0 mL/min ? ?進樣量：20 μL ? 柱 ?溫：35 ℃

檢測器：PDA 254 nm

流動相：A：乙腈 ? B：0.02 mol/L 乙酸銨溶液

結(jié)束語：

本方案建立了 SPE-HPLC 方法同時測定肉制品中8種合成色素。該方法較國標(biāo)方法，大大簡化了前處理過程，，該方法回收和穩(wěn)定性良好，實現(xiàn)了一個液相系統(tǒng)對8種合成色素的快速測定。本方案優(yōu)于國標(biāo)方法，可用于肉制品中8種合成色素的測定。

參考文獻

[1] ?趙飛. 食用合成色素及其檢測技術(shù)的研究進展[J]. 食品安全導(dǎo)刊，2012（1）：32-33.

[2] ?李明靜，王紅梅，張志偉，等.食用合成色素檢測技術(shù)研究進展 [J]. 肉類研究，2006（5）：29-31.

[3] ?SN/T 1743-2006 食品中的誘惑紅、酸性紅、亮藍(lán)、日落黃的含量檢測 高效液相色譜法[S].

[4] ?黃志強，王飛，俞文妍，等.固相萃取-液相色譜法測定蜜餞中7種常見合成色素[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報，2015，（5）：1941-1947

[5] ?戚榮平，孟琪，桑嫻，等. 聚酰胺粉吸附-高效液相色譜法測定蜜餞中合成著色劑[J]