細(xì)莖石斛花朵揮發(fā)性成分分析

仇碩 鄭文俊 夏科 唐鳳鸞 趙健 丁莉 趙志國(guó)

摘?要：為了探究細(xì)莖石斛花朵釋放的揮發(fā)性成分特點(diǎn)，該研究利用固相微萃?。⊿PME）法結(jié)合 GC-MS 技術(shù)，檢測(cè)了花色為黃綠的細(xì)莖石斛花朵不同花期、不同部位的揮發(fā)性成分和相對(duì)含量，還比較了黃綠色、白色和白色帶淡紫色等三種花色的揮發(fā)性成分。結(jié)果表明：花色黃綠的細(xì)莖石斛花朵揮發(fā)性化合物成分總計(jì)為59種，其中盛花期最復(fù)雜（含有41種），這些成分歸屬于烯類(lèi)、芳香族化合物、含氮化合物、酯類(lèi)、醇類(lèi)和醛酮類(lèi)。在不同花期檢測(cè)到的揮發(fā)性成分中， （1R）-（+）-α蒎烯相對(duì)含量始終最高，保持在27%以上;始花期和盛花期釋放且相對(duì)含量較高的成分有順-芳樟醇氧化物、β-水芹烯、檸檬烯、羅勒烯、（1S-cis）-4，7-二甲基-1-（1-甲基乙基）-1，2，3，5，6，8α-六氫萘和乙酸芳樟酯，相對(duì)含量均高于5%;衣蘭烯于花蕾期相對(duì)含量最高，衰落期消失。這8種化合物可能是細(xì)莖石斛花香釋放的主要香氣成分或特征成分。在花色黃綠的細(xì)莖石斛盛開(kāi)期的兩個(gè)開(kāi)花部位中，花瓣的揮發(fā)性成分有27種，蕊柱17 種，其中烯類(lèi)物質(zhì)分別占74.16% 和79.06%，花瓣可能是細(xì)莖石斛主要的釋香部位。三個(gè)花色的細(xì)莖石斛盛花期揮發(fā)性化合物均在40種左右，既有成分的差異又有含量的差別，其中有25種為共同含有，三個(gè)花色均是（1R）-（+）-α蒎烯相對(duì)含量最高，含量在27%左右。這表明烯類(lèi)物質(zhì)是影響細(xì)莖石斛花香的重要化合物，不僅對(duì)細(xì)莖石斛產(chǎn)品開(kāi)發(fā)提供了參考，而且還為其花香基因工程育種奠定了基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：銅皮石斛， 花朵， 香氣成分， 氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用法

中圖分類(lèi)號(hào)：Q946

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1000-3142（2019）11-1482-14

Abstract：In order to understand the volatiles in flowers of Dendrobium moniliforme， the constituents and relative contents in different florescences and flower parts of the yellow-green flower color of D. moniliforme were determined by solid phase microextraction （SPME） and gas chromatography coupled with mass spectrometry （GC-MS）， and the volatile components of three kinds colors of D. moniliforme were also compared by analyzing the constituents and relative contents determined in flowering stage. The results showed that there were 59 volatile compounds identified at four flowering stages of the yellow-green flower color of D. moniliforme， and the flowering stage was the most complicated stage because there were 41 volatile compounds. These compounds belongs to alkenes， aromatic， nitrogenous compound， esters， alcohols， alkanes， aldehydes and ketones. The relative contents of 1R-α-pinene was more than 27%， which was the highest among all compounds at four flowering stages; During the first flowering stage and flowering stage， there were another six compounds including cis-linaloloxide， β-phellandrene， limonene， 3，7-dimethytl-1，3，7-octatriene， （1S-cis）-4，7-dimethyl-1-（1-methylethyl）-naphthalene， 1，2，3，5，6，8α-hexahydro and 3，7-dimethyl-1，6-octadien-3-ol-acetate， and their?relative contents was the highest; The relative contents of ylangene was more than 5% during bud stage， and disappeared during declining stage. Thus， the eight compounds were the major volatile components or the characteristic constituents for D. moniliforme. There were 27 components identified in petals and 17 in gynandrium. In petals and gynandrium， the relative content of alkenes compounds was the highest， 74.16% and 79.06%， respectively. And the petals were probably the most important part that could influence the volatile releasing. There were about 40 components identified in the flowering stage of three colors of D. moniliforme， differently. And there were 25 common constituents existed in three colors of D. moniliforme. Alkenes was the most important compounds for D. moniliforme. This plays an important role for aromatic cultivar breeding and essential product development of D. moniliforme.

Key words：Dendrobium moniliforme， flower， volatile component， GC-MS

細(xì)莖石斛（Dendrobium moniliforme）為蘭科石斛屬多年生草本植物，又名銅皮石斛，分布于中國(guó)大陸和臺(tái)灣地區(qū)以及印度、日本和韓國(guó)等地（中國(guó)植物志編輯委員會(huì)，1980）。細(xì)莖石斛具有莖細(xì)、花小、藥效高等特征，是中藥石斛中重要的代表種類(lèi)之一，其成品藥材常被稱(chēng)為“銅皮楓斗”。細(xì)莖石斛含有較高的多糖、生物堿及微量元素等（陳云龍等，2001;胡國(guó)海等，2010;Muhammad，2018），具有滋陰生津、潤(rùn)肺明目、抗癌防老等功效（黃曉潔，2014; 國(guó)家藥典委員會(huì)，2015），民間常用于治療消化不良、癰瘡腫毒及風(fēng)濕疼痛等疾?。↗iangsu New Medical College，1986）。此外，細(xì)莖石斛開(kāi)花清香宜人，是培育芳香型蘭花品種的重要親本材料，具有較高的觀賞價(jià)值。

據(jù)近年來(lái)的報(bào)道，細(xì)莖石斛的花可制成花茶，且具有茶香協(xié)調(diào)、芬芳持久的特點(diǎn)。鑒于此，細(xì)莖石斛開(kāi)花時(shí)釋放的香氣物質(zhì)因而備受關(guān)注。張倩倩等（2011）利用水蒸氣蒸餾法并結(jié)合GC-MS法提取細(xì)莖石斛粉碎的干燥花中的揮發(fā)油，發(fā)現(xiàn)揮發(fā)油成分主要包括烯、醛、酯和醇類(lèi)等。張聰?shù)龋?017）采用正己烷回流法并結(jié)合GC-MS法對(duì)細(xì)莖石斛鮮花揮發(fā)油進(jìn)行提取和分析鑒定，發(fā)現(xiàn)烷烴、烯烴、醇、酮、酸、酯、酚等是其主要的化學(xué)成分。據(jù)報(bào)道，溶劑萃取的成分不一定能真實(shí)反映花朵釋放的香氣成分，而利用固相微萃?。⊿PME）結(jié)合GC-MS 技術(shù)檢測(cè)鮮花的香氣成分則能準(zhǔn)確測(cè)定花香成分，如對(duì)麝香石斛、鼓槌石斛、羅河石斛、細(xì)葉石斛、密花石斛以及秋石斛雜交種花朵的揮發(fā)性成分的報(bào)道（Julsrigival et al.， 2013; 張瑩等， 2011;李崇暉等，2015;丁靈等，2016）。

細(xì)莖石斛是多型性的廣布種，植株的大小，花的顏色常因地區(qū)不同而有變化，花色包括黃綠色、白色或白色帶淡紫紅色等三種，有時(shí)芳香（中國(guó)植物志編輯委員會(huì)，1999）。有關(guān)三個(gè)花色之間是否有香味差別還不清楚，同一花色不同開(kāi)花時(shí)期的釋香成分尚未見(jiàn)有報(bào)道。因此，本研究采用頂空固相微萃取（HS-SPME）并結(jié)合氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）技術(shù)，以開(kāi)花黃綠色的細(xì)莖石斛為代表，測(cè)定不同開(kāi)花時(shí)期、不同花器官的香氣釋放成分，同時(shí)檢測(cè)和分析三個(gè)花色細(xì)莖石斛香氣成分的差異。旨在為其鮮花加工產(chǎn)業(yè)提供科學(xué)的指導(dǎo)，同時(shí)為后續(xù)的花香代謝研究奠定基礎(chǔ)。

1?材料與方法

1.1 材料和儀器

1.1.1 材料?所用的樣品為細(xì)莖石斛（Dendrobium moniliforme），引種于云南文山，種植于廣西壯族自治區(qū)中國(guó)科學(xué)院廣西植物研究所蘭花苗圃中。本研究以花色黃綠的細(xì)莖石斛為材料，首先測(cè)定花蕾期、始花期、盛開(kāi)期和衰落期等四個(gè)階段的香氣釋放成分（圖1）;然后測(cè)定和分析蕊柱和花瓣兩個(gè)部位的香氣釋放成分;最后測(cè)定和分析黃綠色、白色和白色帶淡紫紅色等三種顏色的細(xì)莖石斛盛開(kāi)期的香氣釋放成分差別。

1.1.2 儀器?手動(dòng)固相微萃取進(jìn)樣器（美國(guó)SUPELCO公司），50/30 μm PDMS /CAR/DVB萃取頭（美國(guó)SUPELCO公司），6890N-5975B氣相色譜-質(zhì)譜儀GC-MS （美國(guó)Agilent 公司），40 mL棕色頂空取樣瓶、水浴鍋（上海精學(xué)科學(xué)儀器有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 花香成分的GC-MS 分析?同種環(huán)境條件下選擇生長(zhǎng)和開(kāi)花正常的15株（叢）苗作為采集對(duì)象，將晴天9：00—11：00采集的樣品置于棕色頂空取樣瓶中，重復(fù)3次。先將萃取頭插入GC-MS進(jìn)樣口，250 ℃老化30 min。采集10朵鮮花朵置于40 mL棕色頂空取樣瓶中，插入50 μm/30 μm PDMS /CAR /DVB纖維頭，于40 ℃下頂空萃取 30 min。萃取完成后，取出纖維頭，插入GC-MS進(jìn)樣口，解析5 min 后，進(jìn)樣分析。

色譜條件：HP-5MS石英毛細(xì)管色譜柱（30 m × 0.25 mm × 0.25 μm）;流速為0.8 mL·min-1;載氣為高純度氦氣（99.999%），不分流模式。程序升溫：起始柱溫為40 ℃保持3 min，以3 ℃·min-1的速率升溫到73 ℃，維持3 min，以5 ℃·min-1升溫至220 ℃，保持2 min。

質(zhì)譜條件：進(jìn)樣口溫度維持在230 ℃，離子源溫度為150 ℃，電離方式為EI，電子能量70 eV，GC-MS傳輸線溫度為250 ℃，掃描范圍為40～450 amu（Cai et al.， 2014）。

1.2.2 揮發(fā)性花香成分鑒定分析?根據(jù)GC-MS總離子流色譜圖，解析各個(gè)峰所對(duì)應(yīng)的質(zhì)譜圖，將所得到的質(zhì)譜數(shù)據(jù)，用Xcalibur1.2版本軟件，與NIST98所提供的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)譜圖庫(kù)進(jìn)行比對(duì)，同時(shí)根據(jù)在相同升溫程序下用正構(gòu)烷烴標(biāo)準(zhǔn)樣品（C8～C40）計(jì)算得到科瓦茨保留指數(shù)（Kovats Retention Indices，RI）和NIST網(wǎng)站上對(duì)應(yīng)物質(zhì)所列舉的相關(guān)參考文獻(xiàn)進(jìn)行進(jìn)一步定性確認(rèn);根據(jù)離子流峰面積歸一化法計(jì)算各組分在總揮發(fā)物中的相對(duì)含量。

2?結(jié)果與分析

2.1 細(xì)莖石斛（黃綠色花）不同花期揮發(fā)性香氣成分的比較

經(jīng)GC/MS 分析，花色黃綠的細(xì)莖石斛不同花期檢測(cè)到的揮發(fā)性化合物成分?jǐn)?shù)量不同，花蕾期13 種，始花期21種，盛花期41種，衰落期11種，但同一成分可能在不同花期均檢測(cè)到，如始花期和盛花期均含有L-氨基丙醇，而在4個(gè)花期中則均含有（1R）-（+）-α蒎烯等，經(jīng)最終統(tǒng)計(jì)，在整個(gè)花朵開(kāi)放過(guò)程中揮發(fā)性化合物成分總計(jì)為59種。由此可見(jiàn)，隨著花朵的開(kāi)放，細(xì)莖石斛的揮發(fā)性成分的組成逐漸復(fù)雜，盛花期的成分最多，而衰落期又減少。香氣組分中相對(duì)含量較高的化合物名稱(chēng)、出峰時(shí)間及相對(duì)含量見(jiàn)表1。由表1可知，在細(xì)莖石斛不同花期檢測(cè)到的化合物相對(duì)含量較高的有 （1R）-（+）-α蒎烯、β-水芹烯、檸檬烯、順-芳樟醇氧化物、羅勒烯、乙酸芳樟酯、（1S-cis）-4，7-二甲基-1-（1-甲基乙基）-1，2，3，5，6，8α-六氫萘、衣蘭烯、2-苯并 [1，3]二惡英-5-基-8-甲氧基異黃酮-3-硝基-2H-苯并吡喃、3，6-二甲氧基-9-（2-苯甲基乙二酯）-9-芴醇、四甲基-磷氰酰亞胺、己二酸二辛酯和8-庚基十五烷等13種化合物，相對(duì)含量均超過(guò)5%。

由花蕾期至衰落期，隨著花朵的開(kāi)放和凋謝，（1R）-（+）-α蒎烯相對(duì)含量始終最高，保持在27%以上;順-芳樟醇氧化物于花蕾期至盛花期含量均保持較高，在10%以上，于衰敗期消失;衣蘭烯相對(duì)含量逐漸減少，在衰落期消失;β-水芹烯于始花期出現(xiàn)，并于盛花期含量達(dá)到5.89%;檸檬烯于始花期和盛花期出現(xiàn)，含量均達(dá)到5%;羅勒烯和（1S-cis）-4，7-二甲基-1-（1-甲基乙基）-1，2，3，5，6，8α-六氫萘于始花期出現(xiàn)，含量分別為10.83%和6.86%，但盛花期均減少，分別為2.85%和3.47%;乙酸芳樟酯僅在盛花期釋放，且含量達(dá)到7.44%。這8種化合物的含量在細(xì)莖石斛四個(gè)開(kāi)花時(shí)期的總含量分別達(dá)到60.28%、74.23%、65.15%和55.81%[（1R）-（+）-α蒎烯]。這說(shuō)明這幾種化合物可能是細(xì)莖石斛花香釋放的主要揮發(fā)性成分。此外， 2-苯并 [1，3]二惡英-5-基-8-甲氧基異黃酮-3-硝基-2H-苯并吡喃僅在花雷期釋放，3，6-二甲氧基-9-（2-苯甲基乙二酯）-9-芴醇、四甲基-磷氰酰亞胺、己二酸二辛酯和8-庚基十五烷僅在衰落期釋放，這五類(lèi)化合物對(duì)細(xì)莖石斛的香氣釋放可能沒(méi)有貢獻(xiàn)，不是主要香氣成分。

將細(xì)莖石斛的揮發(fā)性成分劃分為烯類(lèi)、芳香族化合物、含氮化合物、酯類(lèi)、醇類(lèi)和醛酮類(lèi)等6 類(lèi)，4 個(gè)花期6 類(lèi)化合物的組分及相對(duì)含量變化如表2 所示。由表2 可知，花期不同，各類(lèi)化合物的相對(duì)含量變化明顯。從花蕾期至衰落期均是烯類(lèi)物質(zhì)相對(duì)含量最高，分別達(dá)到67.81%（5種）、90.23%（14種）、70.88%（14種）和56.35%（3種），其中均以（1R）-（+）-α蒎烯含量最高;花蕾期含量相對(duì)較高的還有芳香族化合物，達(dá)到22.19%;始花期其他化合物含量均相對(duì)較低;盛花期除含有較多的烯類(lèi)外，含氮化合物、酯類(lèi)、醇類(lèi)、醛同類(lèi)均高于5%，芳香族化合物3.71%;衰落期醇類(lèi)18.85%、醛酮類(lèi)8.95%、酯類(lèi)8.02%、含氮化合物6.28，而芳香族化合物僅為0.57%。

2.2 黃綠色花的細(xì)莖石斛花朵不同部位揮發(fā)性成分的比較

經(jīng)GC/MS 分析， 測(cè)得花色黃綠的細(xì)莖石斛盛花期花瓣含揮發(fā)性化合物27種，蕊柱17 種。由此可見(jiàn)，花瓣的香氣組成更為復(fù)雜。兩個(gè)部位香氣組分中相對(duì)含量較高的化合物名稱(chēng)、出峰時(shí)間及其相對(duì)含量見(jiàn)表3。由表3 可知，兩個(gè)部位含有9種共同的化合物，其中多數(shù)含量差異較大。構(gòu)成花瓣的主要香氣成分有（1R）-（+）-α蒎烯（33.69%）、β-水芹烯（6.18%）、檸檬烯（5.58%）、順-芳樟醇氧化物（13.86%）、乙酸芳樟酯（9.54%），其相對(duì)總含量達(dá)到68.85%;蕊柱中的主要香氣成分有（1R）-（+）-α蒎烯（64.32%）、α-柏木烯（5.90%），相對(duì)含量總和達(dá)到70.22%?；ò昙叭镏衅溆嗷衔锖枯^低。

表4結(jié)果顯示了同類(lèi)化合物在不同花朵部位中的組分及其相對(duì)含量?；ò曛邢鄬?duì)含量最高的是烯類(lèi)化合物，含有11種，相對(duì)總含量達(dá)到74.16%;其次是酯類(lèi)化合物，占9.99%。蕊柱中烯類(lèi)化合物組分僅有5種，但相對(duì)總含量卻最高，占79.06%;其次是含氮化合物和醛酮類(lèi)，分別占9.14%和7.16%;蕊柱中不含酯類(lèi)和醇類(lèi)化合物。

2.3 不同花色品種揮發(fā)性成分的比較

表5結(jié)果顯示了三個(gè)花色細(xì)莖石斛盛花期的揮發(fā)性化合物的名稱(chēng)、出峰時(shí)間及其相對(duì)含量。由表5可知，黃綠色的細(xì)莖石斛共檢測(cè)出41種化合物，白色的細(xì)莖石斛38種，白色帶淡紫色的細(xì)莖石斛35種。其中有25種化合物是三個(gè)花色的細(xì)莖石斛共同含有的，但相對(duì)含量不完全一致。構(gòu)成黃綠色細(xì)莖石斛的主要揮發(fā)性成分有 （1R）-（+）-α蒎烯（27.61%）、β-水芹烯（5.87%）、檸檬烯（5.13%）、順-芳樟醇氧化物（10.32%）及乙酸芳樟酯（7.99%），其相對(duì)總含量達(dá)到56.92%;而白色細(xì)莖石斛的主要揮發(fā)性成分為（1R）-（+）-α蒎烯（28.85%）、順-芳樟醇氧化物（11.73%）及乙酸芳樟酯（10.23%），其相對(duì)總含量達(dá)到50.81%;白色帶淡紫色的細(xì)莖石斛的主要揮發(fā)性成分有（1R）-（+）-α蒎烯（27.61%）、順-芳樟醇氧化物（10.97%）、乙酸芳樟酯（8.63%）、月桂烯（5.06%）、1-亞甲基-4-（1-甲基乙烯基）環(huán)己烷（5.43%）、檸檬烯（6.89%），其相對(duì)總含量達(dá)到64.59%。

由表2和表6還可看到，同類(lèi)化合物在3個(gè)花色細(xì)莖石斛盛花期的組分及其相對(duì)含量也不完全一致。黃綠色細(xì)莖石斛相對(duì)含量最高的是烯類(lèi)化合物，達(dá)到70.88%，組分有14種;含氮化合物等其他類(lèi)化合物含量在3.71%～7.76%;白色細(xì)莖石斛和白色帶淡紫色的細(xì)莖石斛含量最高的也都是烯類(lèi)化合物，相對(duì)含量分別達(dá)到65.21%和71.11%，組分分別有12種和14種;白色細(xì)莖石斛含量較多的依次還有酯類(lèi)11.49%、醛酮類(lèi)8.67%、醇類(lèi)5.51%、含氮化合物4.9%和芳香族化合物3.75%;而白色帶淡紫色的細(xì)莖石斛含量較多的還有酯類(lèi)、醇類(lèi)和醛酮類(lèi)，含量分別達(dá)到8.63%、5.99%和5.30%。

3?討論與結(jié)論

3.1 細(xì)莖石斛的主要揮發(fā)性物質(zhì)成分

張倩倩等（2011）利用水蒸氣蒸餾法提取細(xì)莖石斛干花揮發(fā)油，結(jié)合GC-MS檢測(cè)，鑒定出29個(gè)化合物，包括烯類(lèi)、醛類(lèi)、酯類(lèi)和醇類(lèi)等成分，其中相對(duì)含量大于5.0%的有2，4，4三甲基-二戊烯（11.17%）、5，5-二甲基-2-己烯（11.12%）、β-石竹烯（6.47%）、異土木香內(nèi)酯（5.95%） 和1，3，3 二甲基丁烯-1，1-二苯基（5.20%）等;張聰?shù)龋?017）采用正己烷回流法提取細(xì)莖石斛鮮花揮發(fā)性成分，并用GC-MS分析鑒定，分離出91個(gè)色譜峰，鑒定出72個(gè)化合物，主要包括烷烴、烯烴、醇、酮、酸、酯、酚等，其中相對(duì)含量較高的有二十一烷（38.957%）、二十三烷（13.558%）、二十二烷（5.245%）。本研究利用固相微萃?。⊿PME）法提取細(xì)莖石斛鮮花揮發(fā)性成分，經(jīng)用GC-MS 技術(shù)檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)細(xì)莖石斛不同花期、不同部位以及不同花色雖有一定成分及含量的差異，但總的揮發(fā)性成分有59種，這些成分歸屬于烯類(lèi)、芳香族化合物、含氮化合物、酯類(lèi)、醇類(lèi)和醛酮類(lèi)等。其中，含量高于5%的有（1R）-（+）-α蒎烯、順-芳樟醇氧化物、衣蘭烯、β-水芹烯、檸檬烯、羅勒烯、（1S-cis）-4，7-二甲基-1-（1-甲基乙基）-1，2，3，5，6，8α-六氫萘及乙酸芳樟酯等。這說(shuō)明水蒸氣蒸餾法提取的成份相對(duì)較少，也可能與提取的干花有關(guān)。正己烷回流法提取的成分最多。但是，本研究采用的SPME提取技術(shù)不需要有機(jī)試劑提取，具有處理快捷簡(jiǎn)便、材料用量少以及易于與氣相等技術(shù)聯(lián)用的特點(diǎn)。

石斛屬植物種類(lèi)豐富，已報(bào)道有些種類(lèi)具有花香、果香或草本香氣等（Julsrigival et al.， 2013;李崇暉等，2015）。張瑩等（2011）報(bào)道4個(gè)秋石斛品種的主要香氣成分為烯烴類(lèi)、醇類(lèi)和醛類(lèi);丁靈等（2016）也報(bào)道5個(gè)秋石斛品種的香氣成分主要是萜烯類(lèi)以及少量芳香族化合物和酯類(lèi);李崇暉（2015）報(bào)道野生種鼓槌石斛和細(xì)葉石斛花香成分以烯類(lèi)化合物為主，但羅河石斛和密花石斛則以酯類(lèi)和烷類(lèi)為主。本研究結(jié)合GC-MS的分析結(jié)果，花色為黃綠色的細(xì)莖石斛四個(gè)花期檢測(cè)到的揮發(fā)性成分中，含量較高的均是烯類(lèi)化合物，盛花期高達(dá)90.23%。兩個(gè)花器官烯類(lèi)化合物占74.16%和79.06%。花色為白色和白色帶淡紫色的盛花期揮發(fā)性成分檢測(cè)分析表明，烯類(lèi)化合物分別占65.21%和71.11%。從揮發(fā)性成分組分分類(lèi)看，不同開(kāi)花時(shí)期、不同開(kāi)花部位以及不同花色的細(xì)莖石斛，烯類(lèi)化合物成分最多，含有芳香族化合物、含氮化合物、酯類(lèi)、醇類(lèi)及酚醛類(lèi)。此外，張倩倩等（2011）的鑒定結(jié)果認(rèn)為烯類(lèi)化合物是最多的，而張聰?shù)龋?017）報(bào)道則認(rèn)為烷烴相對(duì)含量最高，還包含烯烴、醇、酮、酸、酯、酚等。

3.2 細(xì)莖石斛花香釋放的主要香氣成分

植物花香程度與花朵的發(fā)育程度有關(guān)。一般始花期和盛開(kāi)期花香釋放量較高，花香成分含萜烯類(lèi)較高的植物也是半開(kāi)期和盛花期釋放量較高（馮立國(guó)等，2008;張輝秀等，2013）。本研究結(jié)果與這一觀點(diǎn)一致，花黃色的細(xì)莖石斛于始花期和盛花期花香釋放種類(lèi)豐富。隨著花朵的開(kāi)放和凋謝，主要揮發(fā)性成分（1R）-（+）-α蒎烯是典型的單萜類(lèi)物質(zhì)，相對(duì)含量始終最高，保持在27%以上，但其嗅感閾值較低，具松木香味，推測(cè)此化合物為細(xì)莖石斛的基本花香成分之一。順-芳樟醇氧化物于始花期和盛花期含量都保持較高，均在10%以上，于衰落期消失;β-水芹烯于始花期出現(xiàn)，盛花期含量達(dá)到5.89%;檸檬烯于始花期和盛花期出現(xiàn)，含量分別為6.13%和5.13%;羅勒烯和（1S-cis）-4，7-二甲基-1-（1-甲基乙基）-1，2，3，5，6，8α-六氫萘于始花期出現(xiàn)，含量分別為10.83%和6.86%，但盛花期均減少，分別為2.85%和3.47%;而乙酸芳樟酯則僅在盛花期釋放，且含量?jī)H為7.44%。以上說(shuō)明這8種化合物可能是細(xì)莖石斛花香釋放的主要香氣成分或特征成分。這些主要香氣成分中，乙酸芳樟酯屬于酯類(lèi)，（1S-cis）-4，7-二甲基-1-（1-甲基乙基）-1，2，3，5，6，8α-六氫萘是芳香族類(lèi)，其余成分均屬于烯類(lèi)化合物，其中衣蘭烯是倍半萜類(lèi)，其余都是單萜及其衍生物。王小婧（2008）研究表明，蒎烯類(lèi)物質(zhì)可以殺菌抗菌、抗癌、利膽消炎、醫(yī)瘡止癢，并對(duì)人體呼吸系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)等有保健作用;順-芳樟醇氧化物是桂花的主要香氣物質(zhì)，可以提取香精（Cai et al.， 2014;夏科等，2018）;乙酸芳樟酯是制備高級(jí)香精不可缺少的香料，也是我國(guó)規(guī)定暫時(shí)允許使用的食用香料（張蕊，2014）。這些細(xì)莖石斛主要香氣成分的檢測(cè)為其精油的開(kāi)發(fā)提供了支撐。

3.3 細(xì)莖石斛的主要釋香部位及不同花色之間的揮發(fā)性成分差異

本研究檢測(cè)結(jié)果表明，不同部位的揮發(fā)性組分存在一定差異，且相同成分在不同部位中的相對(duì)含量也不完全相同，這與苑兆和等（2008）對(duì)石榴以及張瑩等（2011）對(duì)文心蘭不同開(kāi)花部位香氣物質(zhì)的研究結(jié)果類(lèi)似。本研究花色黃綠的細(xì)莖石斛的花瓣比蕊柱含有的揮發(fā)性化合物多10種，主要構(gòu)成成分有（1R）-（+）-α蒎烯、β-水芹烯、檸檬烯、順-芳樟醇氧化物和乙酸芳樟酯等5種，而蕊柱主要含有（1R）-（+）-α蒎烯和α-柏木烯。因此，花瓣可能是細(xì)莖石斛主要的釋香部位。

本研究檢測(cè)到三個(gè)花色的細(xì)莖石斛揮發(fā)性化合物均在40種左右，其中有25種為共同含有。在三種花色的主要揮發(fā)性成分中（盛花期為例），（1R）-（+）-α蒎烯、順-芳樟醇氧化物和乙酸芳樟酯是共同含有的主要釋香成分，花色為黃綠色的還含有β-水芹烯和檸檬烯等2種主要成分，而花白色帶淡紫色的細(xì)莖石斛還含有月桂烯、偽檸檬烯和檸檬烯等3種主要成分。因此，三個(gè)花色的細(xì)莖石斛既有相同的揮發(fā)性成分，又有不同的揮發(fā)性成分。

參考文獻(xiàn)：

CAI X， MAI RZ， ZOU JJ， et al.， 2014. Analysis of aroma active compounds in three sweet Osmanthus （Osmanthus fragrans） cultivars by GC-olfactometry and GC-MS?[J].?J Zhejiang Univ-Sci B （Biomed & Biotechnol）， 15 （7）：638-648.

CHEN YL， ZHANG M， HUA YF， et al.， 2001. Studies on polysaccharide alkaloids and minerals from Dendrobium moniliforme （L .） Sw.?[J]. Chin J Chin Mat Med， 26（10）：709-710.?[陳云龍， 張銘， 華允芬， 等， 2001. 細(xì)莖石斛不同部位有效成分及分布規(guī)律研究 [J]. 中國(guó)中藥雜志， 26（10）： 709-710.]

DING L， LI CH， YIN JM， 2016. Analysis on the volatile components in seven cultivars of Dendrobium [J]. Guihaia， 36（3）：361-368.?[丁靈， 李崇暉， 尹俊梅， 2016. 七種秋石斛鮮花揮發(fā)性成分差異性分析 [J]. 廣西植物， 36（3）：361-368.]

Editorial Committee Flora of China， 1999.?Flora Reipublicae Popularis Sinicae [M].?Beijing：Science Press， 19：114.?[《中國(guó)植物志》編輯委員會(huì)， 1999. 中國(guó)植物志 [M].?北京：科學(xué)出版社， 19：114.]

HUANG XJ， 2014. Study and application of HPLC Finger prin-ting technology of different origin of Dendrobium moniliforne （L.） Sw.?[D]. Guangzhou：Guangzhou University of Chinese Medicine.?[黃曉潔， 2014. 不同產(chǎn)地細(xì)莖石斛的HPLC特征圖譜研究及應(yīng)用 [D]. 廣州：廣州中醫(yī)藥大學(xué).]

HU GH， XIE CJ， LI HC， 2010. Detailed study of trace elements in wild Dendrobium moniliforme [J]. J Wenshan Univ， 23（2）：123-125. [胡國(guó)海， 解成駿， 李洪潮， 2010. 人工栽培細(xì)莖石斛中微量元素含量研究 [J]. 文山學(xué)院學(xué)報(bào)， 23（2）：123-125.]

Jiangsu New Medical College， 1986. Dictionary of Chinese Materia Medica [M]. Shanghai：Shanghai Scientific and Technical Publishers. [江蘇新醫(yī)學(xué)院， 1986. 中藥大詞典 [M]. 上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社.]

JULSRIGIVAL J， SONGSAK T， KIRDMANEE C， et al.， 2013. Determination of volatile constituents of Thai fragrant orchids by gas chromatographymass spectrometry with solid-phase microextraction [J]. Cmu J Nat Sci， 12（1）：43-57.

LI CH， HUANG MZ， HUANG SH， et al.， 2015. Volatile components in flowers of four Dendrobium species [J]. J Trop Subtrop Bot， 23（4）：454-462.?[李崇暉， 黃明忠， 黃少華， 等， 2015. 4種石斛屬植物花朵揮發(fā)性成分分析 [J]. 熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào)， 23（4）：454-462.]

MUHAMMAD NA， 2018. Optimal extraction conditions and antioxidant activity of polysaccharide from Dendrobium monliforme [J]. J Anhui Agric Sci， 46（20）：1-5. [Muhammad Naeem Asghar， 2018. 細(xì)莖石斛多糖的提取條件優(yōu)化及其抗氧化活性研究 [J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)， 46（20）：1-5]

State Pharmacopoeia Commission， 2015. Peoples Republic of China Pharmacopoeis?[M]. Beijing：Chinese Medical Science and Technology Press：92-93.?[國(guó)家藥典委員會(huì)， 2015. 中華人民共和國(guó)藥典 [M]. 北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社：92-93.]

WANG XJ， 2008. Two kinds of health resources of the main scenic and recreational forest in Beijing?[D]. Beijing：Beijing Forestry University.?[王小婧， 2008. 北京市主要風(fēng)景游憩林兩種保健資源及其作用初探 [D]. 北京：北京林業(yè)大學(xué).]

XIA K， JIANG BS， ZHAO ZG， et al.， 2018. Comparative analysis of aromatic components from different cultivars of Osmanthus fragrans in Guilin [J]. Guihaia， 38（11） ：1493-1504.?[夏科， 蔣柏生， 趙志國(guó)， 等， 2018. 桂林地區(qū)不同桂花品種花香成分比較分析 [J]. 廣西植物， 38（11）：1493-1504.]

YUAN ZH， YIN YL， LI ZF， 2008. Aromatic substances in Pomegranate fruit [J]. Sci Silv Sin， 44（1）：65-69.?[苑兆和， 尹燕雷， 李自峰， 2008. 石榴果實(shí)香氣物質(zhì)的研究 [J]. 林業(yè)科學(xué)， 44（1）：65-69.]

ZHANG C， LIU SJ， YANG L， et al.， 2017. Determination of vo-latile components from flowers of Dendrobium moniliforme

（L.） Sw. in Yunnan by GC-MS [J]. J Yunnan Agric Univ （ Nat Sci Ed）， 32（1）：174-178. [張聰， 劉守金， 楊柳， 等， 2017. GC-MS 法檢測(cè)云南產(chǎn)細(xì)莖石斛花中揮發(fā)性成分 [J]. 云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版） ， 32 （1）：174-178.]

ZHANG QQ， LIU SJ， FANG CW， et al.， 2011. Analysis of chemical constituents of essential oil from flowers of Dendrobium moniliforme （ L. ） Sw. by GC-MS [J]. Mod Chin Med，13（6）：34-35.?[張倩倩， 劉守金， 方成武， 等， 2011. 銅皮石斛花揮發(fā)性成分的GC-MS 分析 [J]. 中國(guó)現(xiàn)代中藥， 13（6）：34-35.]

ZHANG R， 2014. Optimization of the synthesis of Linaly Acetate [D]. Shanghai：East China University of Science and Technology. [張蕊， 2014. 乙酸芳樟酯合成工藝優(yōu)化 [D]. 上海：華東理工大學(xué).]

ZHANG Y， LI XL， WANG Y， et al.， 2011. Changes of aroma components in Oncidium Sharry Baby in different florescence and flower parts [J]. Sci Agric Sin， 44（1）：110-117.?[張瑩， 李辛雷， 王雁， 等， 2011. 文心蘭不同花期及花朵不同部位香氣成分的變化 [J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)， 44（1）：110-117.]

ZHANG Y， WANG Y， LI ZJ， et al.， 2011. GC-MS analysis on aroma components in four Dendrobium cultivars [J]. Guihaia， 31（3）：422-426.?[張瑩， 王雁， 李振堅(jiān)， 等， 2011. 不同石斛蘭香氣成分的GC-MS 分析 [J]. 廣西植物， 31（3）：422-426.]

ZHANG Y， WANG Y， TIAN M， et al.， 2012. Analysis of aroma componentsin different orchid varieties?[J]. J Anal Sci， 28（4）： 502-506.?[張瑩， 王雁， 田敏， 等， 2012. 不同種蘭花香氣成分分析 [J]. 分析科學(xué)學(xué)報(bào)， 28（4）：502-506.]