趙學(xué)勤 王東明 樸紀(jì)穎 段旭峰

【摘要】目的：探討在結(jié)直腸癌中白細(xì)胞介素-23（IL-23）與白細(xì)胞介素-16（IL-16）的表達(dá)與臨床意義，旨在為結(jié)直腸癌診斷與治療提供參考依據(jù)。方法：選取本院于2018年1月-2019年1月期間收治50例結(jié)直腸癌患者與44例健康體檢健康人群作為研究對象。采用免疫組織化學(xué)染色法對兩組患者IL-23及IL-16的表達(dá)情況進(jìn)行檢測，并探討IL-23與IL-16表達(dá)狀況與患者臨床特征之間的關(guān)系。結(jié)果：結(jié)直腸癌組患者的IL-23及IL-16水平顯著高于健康組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。直腸癌患者血清中IL-23與各項(xiàng)臨床病理參數(shù)均無顯著差異，（p>0.05）;而血清中IL-16水平與患者年齡、性別、腫瘤大小無顯著差異，（p>0.05），與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期（直腸）呈現(xiàn)為負(fù)相關(guān)（P<0.05），且結(jié)腸中IL-16的表達(dá)水平高于直腸（p<0.05）。討論：IL-16與IL-23可能參與結(jié)直腸癌進(jìn)展免疫病理過程，在結(jié)直腸癌早期診斷中IL-16與IL-23可作為標(biāo)志物與治療靶點(diǎn)。

【關(guān)鍵詞】結(jié)直腸癌，白細(xì)胞介素，IL-23，IL-16，表達(dá)水平

[中圖分類號]R735.34 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A [文章編號]2096-5249（2019）17-0006-02

結(jié)直腸癌作為臨床上較為常見的惡性腫瘤，該病的發(fā)生與發(fā)展屬于一個(gè)多階段與多步驟的過程，且已經(jīng)被臨床研究學(xué)者證實(shí)伴有細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)調(diào)控嚴(yán)重失衡狀況。白細(xì)胞介素在免疫反應(yīng)調(diào)節(jié)與細(xì)胞活化增殖等環(huán)節(jié)中發(fā)揮著重要作用其中IL-23與IL-16屬于促炎性細(xì)胞因子，并參與了肺、腦、皮膚以及胃腸道等多種組織的慢性炎癥。盡管根據(jù)相關(guān)研究資料表明，在細(xì)胞初始分化中，IL-23YU IL-16并未起主要作用，但能夠有助于維持Thl7細(xì)胞的增殖與存活。一旦在機(jī)體中缺失IL-23，可能會在很大程度上導(dǎo)致Thl7細(xì)胞產(chǎn)生其特征因子IL-16能力降低。鑒于此，本文選取本院收治50例結(jié)直腸癌患者與44例健康體檢健康人群作為研究對象，采用免疫組織化學(xué)染色法對兩組患者IL-23及IL-16的表達(dá)情況進(jìn)行檢測，并探討IL-23與IL-16表達(dá)狀況與患者臨床特征之間的關(guān)系?，F(xiàn)將研究結(jié)果分析如下：

1資料與方法

1.1一般資料選取本院于2018年1月-2019年1月期間收治50例結(jié)直腸癌患者與44例健康體檢健康人群作為研究對象，所有研究對象均簽署知情同意書，且經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。結(jié)直腸癌組所有患者人組前并未行放化療等治療，且經(jīng)病理確診為結(jié)直腸癌，男性患者28例，女性患者22例;年齡41-88歲，平均年齡（66.35±8.17）歲。健康組，男性24例，女性20例;年齡40-86歲，平均年齡（65.17±7.85）歲。

1.2儀器與試劑所有研究對象均于清晨抽取5ml空腹外周血，經(jīng)3000轉(zhuǎn)/min離心后，取血清并將其儲存于-80%以備用。正常黏膜組織至少需遠(yuǎn)離癌組織的5cm，并將新鮮分離的正常粘膜組織與腫瘤組織分別剔取血塊及脂肪后，進(jìn)行稱重。于85℃烘烤結(jié)直腸癌組織芯片1h后，采用100%二甲苯脫蠟3次，15 min/次，梯度酒精水化（100%無水乙醇5min×2次、95%乙醇溶液5 min×2次、75%乙醇溶液5min×1次），置于清水中進(jìn)行10min浸泡，再于蒸餾水中浸洗10 min。將20m1的EDTA抗原修復(fù)液于不銹鋼壓力鍋中采用去離子水稀釋，至1000ml后加熱至沸騰，將組織芯片采用耐高溫塑料病理切片架固定后放置于其中進(jìn)行5min抗原修復(fù)。自然冷卻至室溫，置于清水中進(jìn)行10min浸泡與10min蒸餾水中浸洗。于室溫下降組織芯片室溫下于3%過氧化氫溶液中浸泡30min，然后在組織芯片表面上滴加0-3%牛血清白蛋白，并在37℃溫度下的孵育盒中進(jìn)行30min孵育，去除表面液體后采用PBS液體進(jìn)行3次浸洗，5min/次。組織芯片表面滴加一抗后置于孵育盒內(nèi)，并將其放置于4℃冰箱中進(jìn)行14h左右的孵育。取出芯片后采用PBS液體進(jìn)行3次浸洗，5min/次。加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記后的鼠，兔通用型二抗，置于溫度為37。c的孵育盒中進(jìn)行30min孵育。去除表面液體后采用PBS液體進(jìn)行3次浸洗，5min/次，滴加DAB顯色劑約10min后于清水中浸洗10min。將組織芯片浸潤于蘇木素染色液中0.5 min后采用清水中浸洗5min，然后組織芯片經(jīng)梯度酒精脫水，風(fēng)干后采用中性樹脂與蓋玻片封片。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析本次研究所得數(shù)據(jù)均經(jīng)SPSS20.0軟件予以統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算。計(jì)量指標(biāo)以（%）形式展開，x²檢驗(yàn);計(jì)數(shù)指標(biāo)以（x±s）形式展開，t值檢驗(yàn)。P<0.05表明數(shù)據(jù)比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1IL-23及IL-16在兩組研究對象中表達(dá)情況分析結(jié)直腸癌組患者的IL-23及IL-16水平顯著高于健康組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。見表1：

2.2比較50例結(jié)直腸癌病理指標(biāo)與IL-2372.IL-16表達(dá)相關(guān)性直腸癌患者血清中IL-23與各項(xiàng)臨床病理參數(shù)均無顯著差異，（p>0.05）;而血清中IL-16水平與患者年齡、性別、腫瘤大小無顯著差異，（p>0.05），與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期（直腸）呈現(xiàn)為負(fù)相關(guān)（p<0.05），淋巴轉(zhuǎn)移者的IL-16水平低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，隨TNM分期（直腸）增加而減少。且結(jié)腸中IL-16的表達(dá)水平高于直腸（p<0.05）。見表2。

3討論

IL-23與IL-16作為促炎癥細(xì)胞因子之一，在多種免疫性疾病與慢性炎癥發(fā)生機(jī)發(fā)展中不僅有效參與，同時(shí)還參與到腫瘤發(fā)展與相關(guān)炎性反應(yīng)中。在本次研究中，結(jié)直腸癌組患者的IL-23及IL-16水平顯著高于健康組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）這說明在構(gòu)建結(jié)直腸癌細(xì)胞微環(huán)境中IL-16與IL-23具有非常重要作用。除此之外。直腸癌患者血清中IL-23與各項(xiàng)臨床病理參數(shù)均無顯著差異，（p>0.05）;而血清中IL-16水平與患者年齡、性別、腫瘤大小無顯著差異，（p>0.05），與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期（直腸）呈現(xiàn)為負(fù)相關(guān)（p<0.05），且結(jié)腸中IL-16的表達(dá)水平高于直腸（p<0.05）。這說明IL-16與IL-23可能參與到結(jié)直腸癌進(jìn)展的免疫病理過程中。

綜上所述，IL-16與IL-23可能參與結(jié)直腸癌進(jìn)展免疫病理過程，在結(jié)直腸癌早期診斷中IL-16與IL-23可作為標(biāo)志物與治療靶點(diǎn)。