吳婧婧 梁貴秋 陸春霞 董桂清 周曉玲 肖瀟

摘要：【目的】優(yōu)化桂桑優(yōu)12種子油提取工藝條件，并分析其抗氧化活性，為廣西主推桑樹品種桂桑優(yōu)12種子油提取和高值化利用提供技術(shù)支持?！痉椒ā恳怨鹕?yōu)12種子為試驗(yàn)材料，種子油提取率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，從5個(gè)溶劑組合中篩選出提取桂桑優(yōu)12種子油的最佳溶劑;并在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，將3個(gè)顯著因素的最佳條件設(shè)為響應(yīng)中心值，利用響應(yīng)面法對(duì)種子油提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，依據(jù)回歸分析確定其最適提取條件;同時(shí)測(cè)定種子油對(duì)DPPH和羥基自由基的清除率?！窘Y(jié)果】體積百分比為40%正己烷+60%石油醚的組合是提取桂桑優(yōu)12種子油的適宜溶劑;各因素對(duì)桂桑優(yōu)12種子油提取率的影響排序?yàn)樘崛囟?gt;提取時(shí)間>提取溶劑體積;桂桑優(yōu)12種子油的最佳提取工藝條件為：提取溫度83 ℃、提取溶劑體積50 mL、提取時(shí)間4.0 h，在此條件下，得到桂桑優(yōu)12種子油提取率為35.04%，與預(yù)測(cè)值（35.07%）接近;桂桑優(yōu)12種子油對(duì)DPPH和羥基自由基均有較強(qiáng)的清除能力，其半數(shù)有效質(zhì)量濃度（IC50）分別為2.111和0.196 mg/mL?！窘Y(jié)論】響應(yīng)面試驗(yàn)?zāi)Ｐ湍茌^好優(yōu)化桂桑優(yōu)12種子油的提取工藝，優(yōu)化后的工藝具有操作便捷、高效可行的優(yōu)勢(shì)，提取的種子油具有較強(qiáng)抗氧化能力。

關(guān)鍵詞： 桂桑優(yōu)12;種子油;提取工藝;提取率;抗氧化性;響應(yīng)面分析

中圖分類號(hào)： S888.3? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：2095-1191（2019）01-0144-07

0 引言

【研究意義】桂桑優(yōu)12是廣西優(yōu)良的雜交桑樹品種，其特點(diǎn)為葉片較大而厚，主要表現(xiàn)為產(chǎn)量高、葉質(zhì)優(yōu)、易采摘、耐剪伐、易繁育（種子繁育）、適應(yīng)廣，可在廣西各地規(guī)模種植，受到廣大蠶農(nóng)的歡迎;作為廣西主推桑品種，其種植面積于2012年已達(dá)7.24萬ha，占廣西桑園面積的43.05%（聶良文等，2013）。桂桑優(yōu)12的附屬產(chǎn)品桑果在廣西已被開發(fā)利用成為桑果酒和桑椹汁，而在榨取果汁時(shí)留下的桑種子開發(fā)利用價(jià)值尚未挖掘出來，造成資源浪費(fèi)。桑種子約占果實(shí)的2.8%，在生產(chǎn)中常用渣汁分離設(shè)備將果汁與果渣分離，桑果經(jīng)渣汁分離后所得的桑種子與果渣混合在一起，可在孔徑1～2 mm的網(wǎng)篩中清洗實(shí)現(xiàn)與果渣分離，收集過程簡單、易操作。桂桑優(yōu)12的種子含油率高達(dá)35.0%以上，高于一般的桑種子含油率（32.3%～33.4%）（吳娛明等，2006;呂志強(qiáng)等，2011）。桑種子油富含不飽和脂肪酸，含量約占88%，其中亞油酸占79%以上，同時(shí)富含維生素E、β-胡蘿卜素、硒等多種維生素和微量元素（楊小蘭等，1998），具有降血脂、抗動(dòng)脈粥樣硬化等作用，對(duì)延緩機(jī)體衰老十分有益（楊小蘭，2011）。因此，研究桂桑優(yōu)12種子油的提取工藝及其抗氧化活性，不僅能將廣西豐富的桑樹資源更廣泛應(yīng)用于食品領(lǐng)域，滿足廣大消費(fèi)者的需求，還可提高桑樹資源綜合利用率和加工產(chǎn)品附加值?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】目前關(guān)于桑種子油的研究已有一些報(bào)道。楊小蘭等（1998）分析了桑椹籽和籽油的化學(xué)成分;張志偉等（2007）利用超臨界CO2流體萃取桑椹籽油，并采用氣相色譜法對(duì)桑椹籽油進(jìn)行組分分析;徐建國等（2009）通過正交試驗(yàn)優(yōu)化桑椹籽油提取工藝，并對(duì)其脂肪酸組成進(jìn)行分析;胡青平（2010）利用超聲波輔助提取桑椹籽油。針對(duì)桂桑優(yōu)12桑樹資源進(jìn)行的研究也有一些報(bào)道，徐周徐和屈達(dá)才（2014）測(cè)定了桂桑優(yōu)12和沙2×倫109的DNJ含量，發(fā)現(xiàn)桂桑優(yōu)12的DNJ含量高于沙2×倫109;陸春霞等（2018）利用桂桑優(yōu)12的果實(shí)制成桑果酒，并與其他兩種桑果酒進(jìn)行理化指標(biāo)和成分比較，發(fā)現(xiàn)桂桑優(yōu)12釀制的桑果酒的抗氧化物質(zhì)白藜蘆醇和花青素成分較高。關(guān)于桑種子的抗氧化性研究較少，目前僅孟祥凱等（2015）采用不同極性的溶劑提取桑種子，發(fā)現(xiàn)桑種子的提取物具有較強(qiáng)的抗氧化能力?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】目前，關(guān)于桂桑優(yōu)12種子的研究鮮見報(bào)道，涉及其種子油的抗氧化性研究也未見報(bào)道?！緮M解決的關(guān)鍵問題】以桂桑優(yōu)12種子為原料，通過單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面設(shè)計(jì)，篩選出最佳提取溶劑，考察提取溶劑體積、提取溫度和提取時(shí)間對(duì)種子油提取率的影響，確定桂桑優(yōu)12種子油提取的最佳工藝，并研究其抗氧化活性，為廣西主推桑樹品種桂桑優(yōu)12的種子油提取和高值化利用提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1. 1 試驗(yàn)材料

供試材料為桂桑優(yōu)12種子，由廣西蠶業(yè)技術(shù)推廣總站提供。石油醚、正己烷和雙氧水購自西隴化工股份有限公司，鄰二氮菲和七水合硫酸亞鐵購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。主要設(shè)備儀器：SZF-06C脂肪提取器（浙江托普云農(nóng)科技股份有限公司），752型紫外—可見分光光度計(jì)（上海光學(xué)儀器廠）。

1. 2 試驗(yàn)方法

1. 2. 1 種子油提取 有機(jī)溶液脂肪提取法：準(zhǔn)確稱取烘干至恒重且過80目篩的桑種子粉末4.000 g置于濾紙筒中，將濾紙筒放入抽提瓶內(nèi)，并加入適量的有機(jī)溶劑，于一定溫度和時(shí)間下回流提取種子油。

種子油提取率（%）=種子油質(zhì)量/桑種子粉末

質(zhì)量×100

1. 2. 2 提取溶劑組合篩選 將種子油提取中最常用的兩種試劑正己烷和石油醚按照不同體積百分比進(jìn)行組合（組合1：100%正己烷，組合2：60%正己烷+40%石油醚，組合3：50%正己烷+50%石油醚，組合4：40%正己烷+60%石油醚，組合5：100%石油醚），混合至50 mL，作為提取溶劑分別進(jìn)行種子油提取試驗(yàn)，篩選出最適合桂桑優(yōu)12種子油提取的溶劑組合。

1. 2. 3 單因素試驗(yàn) 按照1.2.1的方法提取桂桑優(yōu)12種子油，研究不同提取溶劑浸泡時(shí)間（0.5、1.0、1.5、2.0和2.5 h）、提取溶劑體積（30、40、50、60和70 mL）、提取溫度（60、70、80、90和100 ℃）和提取時(shí)間（1.0、2.0、3.0、4.0和5.0 h）對(duì)種子油提取率的影響，進(jìn)行3次重復(fù)試驗(yàn)。

1. 2. 4 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì) 根據(jù)單因素試驗(yàn)的結(jié)果，以提取溶劑體積、提取溫度和提取時(shí)間為響應(yīng)面自變量，以種子油提取率為響應(yīng)值，通過Design Expert 7.0設(shè)計(jì)3因素3水平共計(jì)17個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)的響應(yīng)面試驗(yàn)，以隨機(jī)次序進(jìn)行，重復(fù)3次獲得響應(yīng)值，優(yōu)化種子油提取工藝。響應(yīng)面因素水平見表1。

1. 2. 5 種子油抗氧化性測(cè)定

1. 2. 5. 1 DPPH自由基清除率測(cè)定 參考Ali等（2015）的方法，將桂桑優(yōu)12種子油分別用無水乙醇配成質(zhì)量濃度為2、4、6、8、10和12 mg/mL的溶液，并配置60 μmol/L DPPH溶液。取2 mL樣品溶液分別置于10 mL具塞試管里，加入等體積DPPH溶液，混勻后于25 ℃下避光反應(yīng)20 min;樣品溶液取出后以無水乙醇調(diào)零，在517 nm波長下測(cè)定吸光值A(chǔ)1;取2 mL無水乙醇加入2 mL 60 μmol/L DPPH溶液中，測(cè)定吸光值A(chǔ)0;取2 mL樣品溶液加入2 mL無水乙醇中，測(cè)定吸光值A(chǔ)2。每個(gè)試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果重復(fù)3次，取平均值，根據(jù)公式計(jì)算DPPH自由基清除率，以維生素C（VC）作參照。

DPPH自由基清除率（%）=[A0-（A1-A2）A0]×100

1. 2. 5. 2 羥基自由基清除能力測(cè)定 參考董迪迪等（2014）的方法進(jìn)行測(cè)定。建立反應(yīng)體系所需的溶液和試劑：0.75 mmol/L鄰二氮菲溶液、0.75 mmol/L硫酸亞鐵溶液、0.01% H2O2、磷酸鹽緩沖液（pH 7.4）及不同質(zhì)量濃度（0.2、0.4、0.6、0.8、1.0和1.2 mg/mL）的桂桑優(yōu)12種子油乙醇溶液。不同分組的溶液加入反應(yīng)體系的體積見表2。

將反應(yīng)體系在37 ℃水浴下反應(yīng)1.0 h，取出后迅速在536 nm處測(cè)定吸光值，每個(gè)試驗(yàn)結(jié)果重復(fù)3次，取平均值，根據(jù)公式計(jì)算羥基自由基清除率，以VC作參照。

羥基自由基清除率（%）=[A2-A1A0]×100

1. 3 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 20.0進(jìn)行差異顯著性分析和回歸擬合曲線確定半數(shù)有效質(zhì)量濃度（IC50），并用Design Expert 7.0對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行響應(yīng)面分析。

2 結(jié)果與分析

2. 1 最佳提取溶劑組合的篩選結(jié)果

由圖1可知，除組合3與組合5的種子油提取率間差異不顯著（P>0.05，下同）外，其余組合的提取率間均存在顯著差異（P<0.05，下同），以組合4（40%正己烷+60%石油醚）的種子油提取率最高（32.45%），組合5（100%石油醚）的種子油提取率次之（32.31%），而組合1（100%正己烷）的種子油提取率最低，為31.59%。因此，確定40%正己烷+60%石油醚的組合為桂桑優(yōu)12種子油提取工藝最適合的提取溶劑。

2. 2 單因素試驗(yàn)結(jié)果

2. 2. 1 提取溶劑浸泡時(shí)間對(duì)桂桑優(yōu)12種子油提取率的影響 為了使桑種子粉末與提取溶劑充分接觸，提取前先將桑種子粉末放入濾紙筒，用提取溶劑浸泡一定時(shí)間，在提取溫度90 ℃、提取體積50 mL、提取時(shí)間5.0 h的條件下進(jìn)行提取試驗(yàn)，考察提取前不同浸泡時(shí)間對(duì)桂桑優(yōu)12種子油提取率的影響。由圖2可知，在不同浸泡時(shí)間處理下，桂桑優(yōu)12種子油的提取率在32.36%～32.44%，其中浸泡時(shí)間2.0 h的種子油提取率最高。根據(jù)差異性分析可知，不同浸泡時(shí)間處理下所得種子油提取率間無顯著差異，表明桑種子在提取前采用提取溶劑浸泡處理的時(shí)間對(duì)種子油提取率無顯著影響。

2. 2. 2 提取溶劑體積對(duì)桂桑優(yōu)12種子油提取率的影響 在提取溶劑浸泡時(shí)間2.0 h、提取溫度90 ℃，提取時(shí)間5.0 h的條件下，考察不同提取溶劑體積對(duì)桂桑優(yōu)12種子油提取率的影響。由圖3可知，提取溶劑體積在30～50 mL范圍內(nèi)，桂桑優(yōu)12種子油提取率呈上升趨勢(shì)，當(dāng)提取溶劑體積為50 mL時(shí)提取率達(dá)最大值（32.45%）。根據(jù)差異性分析可知，提取溶劑體積在50～70 mL范圍內(nèi)的提取率差異不顯著，但顯著高于溶劑體積為30和40 mL的提取率。由于提取溶劑體積達(dá)60 mL時(shí)，提取率并未隨溶劑體積的增大而增加，且從節(jié)約材料的角度考慮，故選擇50 mL作為種子油提取的最適提取溶劑體積。

2. 2. 3 提取溫度對(duì)桂桑優(yōu)12種子油提取率的影響 在提取溶劑浸泡時(shí)間2.0 h、提取溶劑體積50 mL、提取時(shí)間5.0 h的條件下，考察不同提取溫度對(duì)桂桑優(yōu)12種子油提取率的影響。由圖4可知，提取溫度在60～90 ℃范圍內(nèi)，種子油提取率呈上升趨勢(shì)，當(dāng)提取溫度為90 ℃時(shí)提取率達(dá)最大值（30.99%），之后提取率出現(xiàn)下降趨勢(shì)，各提取溫度下的提取率間存在顯著差異。提取溫度升高影響提取率的原因在于提取溶劑的流動(dòng)性和沸騰性，當(dāng)提取溫度過高并達(dá)到石油醚和正己烷的沸點(diǎn)時(shí)，溶劑揮發(fā)使得溶劑體積減少，導(dǎo)致種子油提取率隨之下降。因此，選擇90 ℃作為種子油提取的最適提取溫度。

2. 2. 4 提取時(shí)間對(duì)桂桑優(yōu)12種子油提取率的影響 在提取溶劑浸泡時(shí)間2.0 h、提取溶劑體積50 mL、提取溫度90 ℃的條件下，考察不同提取時(shí)間對(duì)桂桑優(yōu)12種子油提取率的影響。由圖5可知，提取時(shí)間在1.0～4.0 h范圍內(nèi)，桂桑優(yōu)12種子油提取率呈上升趨勢(shì)，當(dāng)提取時(shí)間為4.0 h時(shí)提取率達(dá)最大值（30.83%），顯著高于除5.0 h外的其他提取時(shí)間，提取時(shí)間達(dá)5.0 h時(shí)提取率出現(xiàn)下降趨勢(shì)。若提取時(shí)間不足，油脂提取不完全;若提取時(shí)間過長，又可能出現(xiàn)油脂揮發(fā)，導(dǎo)致提取率下降，因此選擇4.0 h的提取時(shí)間較適宜。

2. 3 響應(yīng)面優(yōu)化提取工藝的結(jié)果

2. 3. 1 響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果 利用Design Expert 7.0對(duì)響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果（表3）進(jìn)行方差分析，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果得到桂桑優(yōu)12種子油提取率（Y）對(duì)提取溫度（A）、提取溶劑體積（B）和提取時(shí)間（C）3個(gè)因素的二次多項(xiàng)回歸方程：Y=34.42-1.88A-0.66B+0.76C-1.23AB+0.22AC-0.11BC-1.42A2-1.86B2-3.36C2。

對(duì)模型進(jìn)行回歸分析，結(jié)果（表4）表明，該模型顯著性檢驗(yàn)P=0.0002<0.01，二次方程擬合極顯著，該模型具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。失擬項(xiàng)P=0.0561>0.05，差異不顯著，表明該模型能較好地描述各因素與響應(yīng)值間的真實(shí)關(guān)系;決定系數(shù)R2=0.9695，表明該模型擬和程度良好，可通過該回歸方程確定桂桑優(yōu)12種子油提取的最佳工藝。通過比較F的大小可知，各因素對(duì)桂桑優(yōu)12種子油提取率的影響順序?yàn)锳>C>B，各因素交互作用對(duì)種子油提取率的影響順序?yàn)锳B>AC>BC。根據(jù)P的大小可知，各因素中B、C和AB對(duì)種子油提取率的影響顯著，A、A2、B2和C2對(duì)種子油提取率的影響極顯著（P<0.01）。

2. 3. 2 響應(yīng)面交互作用分析 采用Design Expert 7.0對(duì)表3數(shù)據(jù)繪制響應(yīng)面圖（圖6），可真實(shí)反映出各因素間的交互作用，曲面圖的陡峭程度顯示出各因素對(duì)桂桑優(yōu)12種子油提取率的影響程度，響應(yīng)面坡度越陡，說明該因素影響較大。從圖6可看出，AB交互作用響應(yīng)面的坡度較陡峭，說明提取溫度與提取溶劑體積的交互作用對(duì)桂桑優(yōu)12種子油提取率的影響顯著;AC和BC響應(yīng)面的坡度均較平緩，說明提取溫度與提取時(shí)間、提取溶劑體積與提取時(shí)間的交互作用對(duì)桂桑優(yōu)12種子油提取率的影響不顯著。提取溫度響應(yīng)面的陡峭程度大于提取時(shí)間和提取溶劑體積，說明提取溫度對(duì)種子油提取率的影響大于提取時(shí)間和提取溶劑體積;提取時(shí)間響應(yīng)面的陡峭程度大于提取溶劑體積，說明提取時(shí)間對(duì)種子油提取率的影響大于提取溶劑體積。這與表5的方差分析結(jié)果一致。

2. 3. 3 試驗(yàn)結(jié)果的驗(yàn)證 利用Design Expert 7.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，可得到桂桑優(yōu)12種子油提取率的最優(yōu)工藝條件：提取溫度83.26 ℃、提取溶劑體積50.43 mL、提取時(shí)間4.09 h，在此工藝條件下的桂桑優(yōu)12種子油提取率為35.07%。為了確保實(shí)際操作的可行性，將工藝參數(shù)優(yōu)化為提取溫度83 ℃、提取溶劑體積50 mL、提取時(shí)間4.0 h，經(jīng)3次重復(fù)試驗(yàn)，得到桂桑優(yōu)12種子油提取率35.04%，與預(yù)測(cè)值接近，說明該工藝穩(wěn)定可行，建立的模型適用于預(yù)測(cè)實(shí)際值。

2. 4 桂桑優(yōu)12種子油的抗氧化性分析結(jié)果

2. 4. 1 桂桑優(yōu)12種子油對(duì)DPPH自由基的清除效果 由圖7可知，在試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)，桂桑優(yōu)12種子油對(duì)DPPH自由基具有良好的清除效果，其清除能力隨桂桑優(yōu)12種子油的濃度增大而增強(qiáng)。以VC為對(duì)照進(jìn)行DPPH自由基清除能力比較，桂桑優(yōu)12種子油的清除率最大值為92.71%，稍低于VC的DPPH自由基清除率。桂桑優(yōu)12種子油的IC50為2.111 mg/mL。

2. 4. 2 桂桑優(yōu)12種子油對(duì)羥基自由基的清除效果 由圖8可知，桂桑優(yōu)12種子油對(duì)羥基自由基具有良好的清除效果，其清除能力與質(zhì)量濃度呈正相關(guān)。在0.2～0.7 mg/mL質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，桂桑優(yōu)12種子油對(duì)羥基自由基的清除能力強(qiáng)于VC，但隨著質(zhì)量濃度增大，VC對(duì)羥基自由基的清除能力逐漸強(qiáng)于桂桑優(yōu)12種子油。桂桑優(yōu)12種子油的羥基自由基清除率最大值為88.53%，通過擬合曲線計(jì)算出桂桑優(yōu)12種子油的IC50為0.196 mg/mL。

3 討論

目前，對(duì)種子油的提取溶劑多采用單一石油醚或正己烷，如徐建國等（2009）采用石油醚作為提取溶劑，通過正交試驗(yàn)優(yōu)化桑椹籽油的提取工藝，該優(yōu)化工藝條件下獲得的桑椹籽油提取率為28.62%;呂志強(qiáng)等（2011）用正己烷對(duì)桑籽油進(jìn)行提取，并采用正交試驗(yàn)進(jìn)行工藝優(yōu)化，該優(yōu)化工藝條件下獲得的桑椹籽油提取率為32.33%。本研究采用石油醚和正己烷通過不同體積比例混合提取桂桑優(yōu)12種子油，發(fā)現(xiàn)40%正己烷+60%石油醚的混合溶劑作為桂桑優(yōu)12種子油的提取溶劑，所得到的種子油提取率最高，從而確定該比例的混合溶劑為最佳提取溶劑。根據(jù)篩選出的提取溶劑，又在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以提取溶劑體積、提取溫度和提取時(shí)間為響應(yīng)面的影響因素，以種子油提取率為響應(yīng)值，設(shè)計(jì)了3因素3水平的響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化工藝，得到最佳提取條件為提取溫度83 ℃、提取溶劑體積50 mL、提取時(shí)間4.0 h，在此條件下得到桂桑優(yōu)12種子油提取率為35.04%，高于單一采用石油醚和正己烷作為提取溶劑的提取工藝（徐建國等，2009;呂志強(qiáng)等，2011）。本研究所獲得的桂桑優(yōu)12種子油提取率略低于胡青平（2010）獲得的桑椹籽油提取率（35.62%），主要是由于其采取了超聲波輔助方式，下一步可考慮將本研究的優(yōu)化提取工藝條件與輔助方法相結(jié)合進(jìn)行桂桑優(yōu)12種子油的提取研究。

桑樹種子的提取物具有較強(qiáng)的抗氧化活性，孟祥凱等（2015）采用不同極性的溶劑提取桑籽，發(fā)現(xiàn)以乙酸乙酯提取的桑籽提取物清除DPPH自由基能力最強(qiáng)，其半最大效應(yīng)濃度（EC50）為0.0540 mg/mL，清除率在90.00%以上。桑種子油的抗氧化性研究目前尚未見報(bào)道，而對(duì)于葡萄籽油的抗氧化性研究較多。王媛等（2012）研究發(fā)現(xiàn)葡萄籽油的濃度大于25 mg/mL時(shí)，其對(duì)DPPH清除率最大，為80.70%;胡翠珍等（2015）研究葡萄籽油對(duì)羥基自由基的清除率，發(fā)現(xiàn)當(dāng)濃度為140 μg/mL時(shí)，葡萄籽油對(duì)羥基自由基的清除率最高，達(dá)80.00%。本研究對(duì)桂桑優(yōu)12種子油的抗氧化活性進(jìn)行分析，結(jié)果表明，桂桑優(yōu)12種子油對(duì)DPPH和羥基自由基均具有較強(qiáng)的清除能力;隨著桂桑優(yōu)12種子油質(zhì)量濃度的不斷增大，其抗氧化能力逐漸增強(qiáng);桂桑優(yōu)12種子油對(duì)DPPH和羥基自由基的IC50分別為2.111和0.196 mg/mL。相比之下，桂桑優(yōu)12種子油清除DPPH能力較葡萄籽油更強(qiáng)，可為桂桑優(yōu)12種子油的開發(fā)利用和廣西桑樹資源多元化發(fā)展提供參考依據(jù)。

4 結(jié)論

結(jié)合單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)，可較好地優(yōu)化桂桑優(yōu)12種子油提取工藝，優(yōu)化后的工藝具有操作便捷、高效可行的優(yōu)勢(shì)，所提取的種子油具有較強(qiáng)抗氧化能力。

參考文獻(xiàn)：

董迪迪，王鴻飛，周增群，張?zhí)忑?，邵興峰，許鳳，楊娜，李和生. 2014. 楊梅籽油抗氧化活性及其調(diào)節(jié)血脂作用的研究[J]. 中國糧油學(xué)報(bào)，29（5）：53-57. [Dong D D，Wang H F，Zhou Z Q，Zhang T L，Shao X F，Xu F，Yang N，Li H S. 2014. Antioxidant activity and blood lipid regulation of Myrica rubra seed oil[J]. Journal of the Chinese Cereals and Oils Association，29（5）：53-57.]

胡翠珍，李勝，馬紹英，蘇利榮，曹寶臣，周文政，劉琦. 2015. 響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化葡萄籽油提取工藝及其抗氧化性[J]. 食品科學(xué)，36（20）：56-61. [Hu C Z，Li S，Ma S Y，Su L R，Cao B C，Zhou W Z， Liu Q. 2015. Optimization of extraction process for grape seed oil by response surface methodology and evaluation of its antioxidant properties[J]. Food Science，36（20）：56-61.]

胡青平. 2010. 超聲波輔助提取桑椹籽油的工藝優(yōu)化[J]. 中國糧油學(xué)報(bào)，25（10）：69-73. [Hu Q P. 2010. Optimization of ultrasonic-assisted extraction of oil from mulberry seeds[J]. Journal of the Chinese Cereals and Oils Associa-tion，25（10）：69-73.]

陸春霞，梁貴秋，吳婧婧，周曉玲，黃正勇，譚汪英，肖瀟. 2018. 3種桑椹酒理化指標(biāo)及營養(yǎng)成分比較分析[J]. 廣西蠶業(yè)，55（1）：34-36. [Lu C X，Liang G Q，Wu J J，Zhou X L，Huang Z Y，Tan W Y，Xiao X. 2018. Compa-rative analysis of physical and chemical indicators and nutrient composition of three kinds of mulberry wine[J]. Guangxi Sericulture，55（1）：34-36.]

呂志強(qiáng)，李喬，鞏麗麗，陳智，王超，田景振. 2011. 桑椹籽油提取工藝優(yōu)選[J]. 中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，17（17）：45-47. [Lü Z Q，Li Q，Gong L L，Chen Z，Wang C，Tian J Z. 2011. Extraction process of the seed-oil from Morus alba[J]. Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae，17（17）：45-47.]

孟祥凱，孔凡剛，丁菲，鞏麗麗. 2015. DPPH法測(cè)定桑籽不同極性部位抗氧化性[J]. 食品與藥品，17（4）： 255-258. [Meng X K，Kong F G，Ding F，Gong L L. 2015. Anti-oxidant activity determination of different polar components extracted from mulberry seeds by DPPH method[J]. Food and Drug，17（4）：255-258.]

聶良文，祁廣軍，白景彰，潘啟壽，羅堅(jiān)，黃藝，曾森，唐燕梅，陳小青，賓榮佩. 2013. 亞熱帶超高產(chǎn)雜交桑品種配套技術(shù)及其在廣西的推廣應(yīng)用[J]. 廣西蠶業(yè)，50（4）：31-35. [Nie L W，Qi G J，Bai J Z，Pan Q S，Luo J，Huang Y，Zeng S，Tang Y M，Chen X Q，Bin R P. 2013. Matching technology for subtropical super-high-yield hybrid mulberry variety and its application in Guangxi[J]. Guangxi Sericulture，50（4）：31-35.]

王媛，王定穎，岳田利. 2012. 超聲波提取葡萄籽油的工藝優(yōu)化及其抗氧化性研究[J]. 食品科學(xué)，33（10）： 136-140. [Wang Y，Wang D Y，Yue T L. 2012. Optimization of ultrasonic-assisted extraction and antioxidant activity of gra-pe seed oil[J]. Food Science，33（10）：136-140.]

吳娛明，施英，肖更生，徐玉娟，鄒宇曉，姚錫鎮(zhèn). 2006. 桑籽的營養(yǎng)成分研究[J]. 蠶業(yè)科學(xué)，32（1）：135-137. [Wu Y M，Shi Y，Xiao G S，Xu Y J，Zou Y X，Yao X Z. 2006. Stu-dies on nutrient constituents in mulberry seeds[J]. Science of Sericulture，32（1）：135-137.]

徐建國，胡青平，王彥彥，羅季陽. 2009. 桑椹籽油的提取及其脂肪酸組成分析[J]. 中國糧油學(xué)報(bào)，24（5）：88-90. [Xu J G，Hu Q P，Wang Y Y，Luo J Y. 2009. Extraction technology and fatty acid composition of mulberry seed oil[J]. Journal of the Chinese Cereals and Oils Association，24（5）：88-90.]

徐周徐，屈達(dá)才. 2014. “兩廣二號(hào)”和“桂桑優(yōu)12”等廣西主推蠶桑品種DNJ 含量測(cè)定分析[J]. 廣西農(nóng)學(xué)報(bào)，29（4）：23-29. [Xu Z X，Qu D C. 2014. Determination and ana-lysis of DNJ content in silkworm powders of the main varieties in Guangxi[J]. Journal of Guangxi Agriculture，29（4）：23-29.]

楊小蘭. 2011. 桑椹籽油的降脂作用研究[J]. 中國糧油學(xué)報(bào)，16（4）：8-9. [Yang X L. 2011. Study on hypolipidemic effects of mulberry seed oil[J]. Journal of the Chinese Cereals and Oils Association，16（4）：8-9.]

楊小蘭，周紀(jì)侃，馬文麗，1998. 桑椹籽與籽油的營養(yǎng)成份及理化特性的研究[J]. 中國糧油學(xué)報(bào)，13（4）：43-45. [Yang X L，Zhou J K，Ma W L.1998. The composition and some characteristics of the seeds and the seed-oil of Morus alba L.[J]. Journal of the Chinese Cereals and Oils Association，13（4）：43-45.]

張志偉，楊中平，岳田利，高振紅. 2007. 超臨界CO2流體萃取桑椹籽油的研究[J]. 中國油脂，32（1）：77-80. [Zhang Z W，Yang Z P，Yue T L，Gao Z H. 2007. Supercritical CO2 fluid extraction of mulberry seed oil[J]. China Oils and Fats，32（1）：77-80.]

Ali I B E H，Chaouachi M，Bahri R，Chaieb I，Boussaid M，Harzallah-Skhiri F. 2015. Chemical composition and antioxidant，antibacterial，allelopathic and insecticidal activities of essential oil of Thymus algerienis Boiss. et Reut[J]. Industrial Crops and Products，77（23）：631-639.

（責(zé)任編輯 羅 麗）