劉興林 劉敏
摘要:在血液常規(guī)檢驗(yàn)中,瑞氏染色的應(yīng)用非常廣泛,而其中所需要的磷酸鹽緩沖液在基層配制是比較困難的,而用新鮮的蒸餾水可以代替。這樣就可以解決基層開展血液常規(guī)檢驗(yàn)的困難。同時(shí)也可以節(jié)約成本。
關(guān)鍵詞:瑞氏染色;蒸餾水;磷酸鹽緩沖液
一.實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>
在基層應(yīng)用瑞氏染色時(shí),由于配制磷酸鹽緩沖液所要用的化學(xué)試劑的用量不大,而購(gòu)買成本較大,加上配制時(shí)需要分析天平,而基層實(shí)驗(yàn)室基本沒有這些設(shè)備,所以,不能配制磷酸鹽緩沖液,而蒸餾水可以用簡(jiǎn)單的設(shè)備就可以獲取,所以通過用蒸餾水代替磷酸鹽緩沖液對(duì)血片做染色,也可以獲得較理想的實(shí)驗(yàn)效果。
二.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):
1.所需設(shè)備和器材:水浴箱,顯微鏡,采血針,推玻片,載玻片。
2.試劑:瑞氏染液,蒸餾水。
3.方法:在室溫(18℃--35℃)條件下。對(duì)每批新進(jìn)的瑞氏染液進(jìn)行預(yù)染。
3.1推制三張血片(需厚薄適于,頭體尾分明,長(zhǎng)度合適),并編號(hào):1﹑2﹑3.待血膜完全干透后,用蠟筆固定血膜兩端,滴加適量的瑞氏染液(并開始計(jì)時(shí)),使染液能覆蓋整個(gè)血膜為宜,保留染液濕潤(rùn),染色一分鐘,用口徑大致相同的滴管滴加蒸餾水,1號(hào)片滴加等量的蒸餾水,2號(hào)片滴加兩倍的蒸餾水,3號(hào)片滴加三倍的蒸餾水,每片進(jìn)行混勻。
3.2染色三分鐘時(shí),用顯微鏡(10×)對(duì)染色進(jìn)行觀察,在顯微鏡下,可以觀察到細(xì)胞的著色的過程,當(dāng)血片上的有核細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì),細(xì)胞核都基本染好后記錄時(shí)間。
3.3用流水沖洗掉血膜上的染液,注意不要把血膜沖掉。
3.4染好的血片,待干后,用油鏡(100×)對(duì)染色情況進(jìn)行觀察分析,通過對(duì)三張血片的染色情況分析,選擇細(xì)胞著色好,細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核染色效果好的血片,作為這批瑞氏染液在染色時(shí)染液和蒸餾水用量的比例關(guān)系的參考依據(jù)。
三.結(jié)果分析:
在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中,用水浴箱控制實(shí)驗(yàn)的溫度,保證實(shí)驗(yàn)過程在比較恒定的溫度下進(jìn)行,以保證實(shí)驗(yàn)的可靠性。通過用蒸餾水代替磷酸鹽緩沖液進(jìn)行瑞氏染色,不但可以達(dá)到染色的良好效果,節(jié)約實(shí)驗(yàn)成本,同時(shí)可以為基層檢驗(yàn)工作人員開展血液常規(guī)檢驗(yàn)做出一定的貢獻(xiàn)。
參考文獻(xiàn):
[1]劉成玉,臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)(人衛(wèi)版),2003;5(2):29.
[2]安艷,趙平,臨床檢驗(yàn)(人衛(wèi)版),2013;5(2):160-166.
作者簡(jiǎn)介:
劉興林(1965.1-),男,漢族,貴州貴陽市人,高級(jí)實(shí)驗(yàn)師,主要從事臨床檢驗(yàn)和血液學(xué)檢驗(yàn)教學(xué)工作。