佟曉波 孫曉娟 張京華

摘要：本文建立了水產(chǎn)品中甲氧芐啶殘留量的高效液相色譜（HPLC）的檢測(cè)方法。該方法操作簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確度高，適用于水產(chǎn)品中甲氧芐啶殘留檢測(cè)。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜;水產(chǎn)品;甲氧芐啶

目前，水產(chǎn)品中甲氧芐啶的檢測(cè)方法主要有紫外分光光度法[4-5]、吸附溶出伏安法[6]、液相色譜法等[7-9]。本文以市售的鮮魚為研究對(duì)象，對(duì)其中的甲氧芐啶檢測(cè)前處理?xiàng)l件進(jìn)行了選擇和優(yōu)化，高效液相色譜紫外檢測(cè)器檢測(cè)條件的建立和優(yōu)化，建立了高效液相色譜法檢測(cè)水產(chǎn)品中甲氧芐啶的方法。

結(jié)果與討論

樣品前處理?xiàng)l件的優(yōu)化

（1）提取溶劑的選擇。水產(chǎn)品基質(zhì)復(fù)雜，且含有較多的脂肪和蛋白等成分，而甲氧芐啶屬于弱堿性化合物，易溶于酸性溶液，而純水相的提取液在凈化時(shí)易出現(xiàn)乳化，不利于分層，因此本研究中選擇酸化的甲醇作為提取液?？紤]樣品基質(zhì)中含有蛋白，硫酸具有一定的沉淀蛋白的作用，因此選擇硫酸化的甲醇溶液，分別考察了甲醇-硫酸體積比為7：3、6：4、5：5、4：6、3：7時(shí)對(duì)水產(chǎn)品中甲氧芐啶的提取效果，當(dāng)比例為7：3時(shí)效果最好，因此最終選擇甲醇-硫酸體積比7：3的溶液作為提取液。

（2）凈化條件的優(yōu)化。在酸性條件下，甲氧芐啶幾乎不溶于三氯甲烷，而水產(chǎn)品中含有較多的脂肪、蛋白和部分色素等，三氯甲烷可以除去脂。分別考察了在提取過(guò)程中和提取之后加入三氯甲烷的凈化和回收效果，發(fā)現(xiàn)在提取過(guò)程中加入三氯甲烷，首次提取液未見(jiàn)溶入三氯甲烷，但在第二次提取過(guò)程中，有部分三氯甲烷溶于提取液中，提取液體積明顯大于理論加入體積，最終造成提取液中溶入了三氯甲烷相，引入雜質(zhì)，凈化效果變差，同時(shí)因雜質(zhì)的引入，使得回收率不到70.0%;與此同時(shí)我們?cè)谔崛∵^(guò)程之后向合并后的提取液中加入三氯甲烷，未發(fā)現(xiàn)有三氯甲烷相溶于提取液中的情況，且回收率均在80.0%以上，因此選擇在提取過(guò)程之后加入三氯甲烷進(jìn)行凈化。

（3）線性方程與定量限。按照1.4項(xiàng)的方法配制6水平標(biāo)準(zhǔn)曲線，并在優(yōu)化色譜條件下進(jìn)行檢測(cè)，以甲氧芐啶的峰面積為縱坐標(biāo)，甲氧芐啶的濃度為橫坐標(biāo)繪制曲線，甲氧芐啶的線性范圍為0.05～1.0 μg/mL，相關(guān)系數(shù)r為0.9998，線性關(guān)系良好，定量限為15 μg/kg。

（4）回收率和精密度。在空白樣品中添加甲氧芐啶標(biāo)準(zhǔn)溶液，制備含量分別為20、40和200 μg/kg的加標(biāo)樣品，按照1.4項(xiàng)處理方法及儀器測(cè)定條件進(jìn)行測(cè)試，每個(gè)添加水平平行測(cè)定6份，結(jié)果見(jiàn)表1。各化合物的平均回收率為80.2～91.7%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.1～1.7%，采用本方法檢測(cè)水產(chǎn)品中的甲氧芐啶含量，準(zhǔn)確度和精密度均較好。

采用本研究建立的檢測(cè)方法，對(duì)市售的10批次鮮魚進(jìn)行檢測(cè)，其中3批檢出甲氧芐啶，但檢出值均小于農(nóng)業(yè)部235號(hào)公告附錄2：已批準(zhǔn)的動(dòng)物性食品中最高殘留限量規(guī)定的限量要求50 g/kg范圍內(nèi)，可以放心食用。

結(jié)論

本研究采用酸化的甲醇提取水產(chǎn)品中甲氧芐啶，用三氯甲烷除脂等雜質(zhì)，二氯甲烷反萃取的方法，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，精密度高，重現(xiàn)性好。與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《GB 29702-2013水產(chǎn)品中甲氧芐啶殘留量的測(cè)定》相比，操作簡(jiǎn)單、快速，除雜效果更優(yōu)，適用于食品檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行水產(chǎn)品中的甲氧芐啶的檢測(cè)。