猴子癭袋化學(xué)成分研究

何小汝 王雅琪 徐柳云

摘要 目的：研究波羅蜜屬植物猴子癭袋Artocarpus.Pithecogallus小枝的化學(xué)成分。方法：運(yùn)用硅膠柱色譜、MCI gel樹脂、LH-20葡聚糖凝膠（Sephadex LH-20）柱色譜、HPLC、ODS等色譜分離手段，對(duì)猴子癭袋枝葉的95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位進(jìn)行分離純化，通過其1H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)進(jìn)行對(duì)照鑒定其結(jié)構(gòu)。結(jié)果：共分離了六個(gè)三萜類化合物，分別鑒定為3，25-二羥基羊毛脂烷-8，23（E）-二烯-7，11-二酮（1），（24R）-環(huán)阿屯烷-25-烯-3β，24-二醇（2），（24R）-環(huán)阿屯烷-24，25-二醇-3-酮（3），熊果酸（4），樺木酸（5），白樺脂醇（6）。結(jié)論：化合物1、5和6為首次從菠蘿蜜屬植物中分離獲得。

關(guān)鍵詞 波羅蜜;猴子癭袋;化學(xué)成分;分離;三萜;結(jié)構(gòu)鑒定;熊果酸;白樺脂醇

Abstract Objective：To study the chemical constituents of the twigs of Artocarpus.Pithecogallus.Methods：Compounds were isolated and purified by the normal phase silica gel，MCI gel，Sephadex LH-20，HPLC and ODS chromatography.Their structures were identified by comparing the 1H-NMR and 13C-NMR data with those reported in literature.Results：Six triterpenoids were isolated from the ethyl-acetate fraction in 95% ethanol extract of A.Pithecogallus.All isolates were identified as 3，25-dihydroxy lanolin-8，23（E）-diene-7，11-dione（1），（24R）-cycloalkane-25-ene-3，24-diol（2），（24R）-cycloalkane-24，25-diol-3-one（3），ursolic acid（4），birch acid（5）and betulin（6）.Conclusion：Compounds 1，5 and 6 were isolated from the genus Artocarpus for the first time.

Key Words Artocarpus; A.pithecogallus; Chemical constituents; Isolation; Triterpenoid; Structure identification; Ursolic acid; Betulin

中圖分類號(hào)：R284.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A doi：10.3969/j.issn.1673-7202.2019.07.003

猴子癭袋Artocarpus.pithecogallus為桑科（Moraceae）波羅蜜屬常綠喬木植物，主要產(chǎn)自我國云南西雙版納地區(qū)，生長于海拔1 400～1 630 m濕潤疏林中[1]。許多波羅蜜屬植物在東南亞、中國作為傳統(tǒng)民間用藥[2-3]，如在我國西南地區(qū)，白桂木A.hypargyreus Hance可用于治療風(fēng)濕、頭痛和黃疸[4]?；瘜W(xué)研究表明，菠蘿蜜屬植物富含各種異戊烯基取代的酚性化合物，這些成分多具有細(xì)胞毒活性[5-8]、抗炎[9-13]、抗真菌[14]、抗氧化[15-16]及酪氨酸酶抑制活性[17-18]，具有很好的研究開發(fā)潛力。為了從波羅蜜屬植物中發(fā)現(xiàn)新的活性有效成分，本課題組對(duì)該屬植物牛李A(yù).nigrifolius進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究，從中發(fā)現(xiàn)了大量的三萜[19]及異戊烯基取代的黃酮和查爾酮[20]，其中部分異戊烯基酚類化合物對(duì)人源宮頸癌HeLa細(xì)胞和胃癌SGC-7901細(xì)胞具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒活性。為了進(jìn)一步深入研究波羅蜜屬植物的化學(xué)成分，促進(jìn)藥用資源的開發(fā)與利用，本課題采用多種色譜分離技術(shù)對(duì)猴子癭袋的乙酸乙酯萃取部位進(jìn)行了系統(tǒng)研究，分離得到了六個(gè)化合物（圖1），經(jīng)鑒定分別為3，25-二羥基羊毛脂烷-8，23（E）-二烯-7，11-二酮（1），（24R）-環(huán)阿屯烷-25-烯-3β，24-二醇（2），（24R）-環(huán)阿屯烷-24，25-二醇-3-酮（3），熊果酸（4），樺木酸（5）和白樺脂醇（6）。

1 材料

Bruker AX-600型核磁共振波譜儀（瑞士布魯克公司），安捷倫1200型高效液相色譜儀（美國Agilent公司），Sephadex LH-20凝膠（美國GE Healthcare公司），MCI GEL CHP 20P（75～150 M）精細(xì)分離樹脂（日本Mitsubishi公司），反相硅膠ODS-A gel（12 nm，S-75 M）（日本YMC公司），YMC-Pack ODS半制備柱（10 mm×250 mm，5M，日本YMC公司），薄層硅膠板（煙臺(tái)江友硅膠開發(fā)有限公司），柱層析硅膠（青島海洋化工有限公司，100-200目，200-300目），色譜純甲醇和乙腈（百靈威公司），其他試劑均為市售分析純（西隴化工股份有限公司）。

本實(shí)驗(yàn)藥材采自云南省勐臘縣，經(jīng)中科院西雙版納熱帶植物園許又凱教授鑒定為猴子癭袋A.pithecogallus，憑證標(biāo)本（AP201409）保存于南昌大學(xué)藥學(xué)院標(biāo)本館。

2 提取與分離

取晾干的猴子癭袋小枝5 kg，粉碎后于室溫下用95%乙醇反復(fù)提取3次，每次浸泡7 d，所得提取液減壓濃縮，得粗浸膏553.1 g。加入適量的水于粗浸膏中，并在超聲條件下攪拌混懸，用等體積的乙酸乙酯與懸浮液萃取4次，而后將有機(jī)相合并，濃縮得油狀浸膏246.0 g。將油狀浸膏通過MCI柱色譜分離，以甲醇/水（0∶ 100→100∶ 0，v/v）梯度洗脫，合并濃縮后得到6個(gè)組分（Fr.1～Fr.6）。組分Fr.3（19.8 g）經(jīng)ODS反相色譜（甲醇-水 35∶ 65→40∶ 60）和高效液相色譜（乙腈-水60∶ 40）洗脫得到單體化合物5（2.2 mg）和6（1.6 mg）。組分Fr.5（2.9 g）經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜（甲醇），由ODS反相色譜（甲醇-水 70∶ 30→80∶ 20）和高效液相色譜（乙腈-水 95∶ 5）洗脫得到單體化合物1（5.0 mg）和4（1.3 mg）。組分Fr.6（10.9 g）經(jīng)ODS反相色譜（甲醇-水 80∶ 20→95∶ 5）和高效液相色譜（乙腈-水 35∶ 65）洗脫得到化合物2（7.0 mg）和3（14.0 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色固體;1H-NMR（400MHz，CDCl3）：δH 3.30（1H，dd，J=10.4，6.0 Hz，H-3），5.58（2H，m，H-23，H-24），0.86（3H，d，J=6.4 Hz，H-21），0.90（3H，s，H-29），0.94（3H，s，H-18），1.02（3H，s，H-28），1.08（3H，s，H-30），1.30（3H，s，H-19），1.30（3H，s，H-26），1.30（3H，s，H-27）;13C-NMR（100 MHz，CDCl3）：δC 34.0（C-1），27.5（C-2），78.1（C-3），38.7（C-4），48.6（C-5），35.4（C-6），200.0（C-7），149.9（C-8），154.9（C-9），38.2（C-10），201.9（C-11），51.5（C-12），45.3（C-13），48.0（C-14），31.9（C-15），28.1（C-16），48.9（C-17），18.8（C-18），17.9（C-19），35.9（C-20），18.9（C-21），37.9（C-22），125.0（C-23），140.0（C-24），70.9（C-25），30.1（C-26），30.1（C-27），27.7（C-28），15.2（C-29），24.2（C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[21]，故鑒定該化合物為3β，25-二羥基羊毛脂烷-8，23（E）-二烯-7，11-二酮。

化合物2：白色固體;1H-NMR（400 MHz，CDCl3）：δH 4.93（1H，s，H-26a），4.83（1H，s，H-26b），4.02（1H，t，J=6.0 Hz，H-24），3.28（1H，dd，J=10.8，4.0 Hz，H-3），0.33（1H，d，J=4.0 Hz，H-19），0.54（1H，d，J=4.0 Hz，H-19），1.72（3H，s，H-27），0.96（6H，s，H-18，H-29），0.88（3H，d，J=5.6 Hz，H-21），0.87（3H，s，H-28），0.80（3H，s，H-30）。13C-NMR（100 MHz，CDCl3）：δC 32.1（C-1），30.5（C-2），79.0（C-3），40.6（C-4），47.2（C-5），21.3（C-6），28.3（C-7），48.1（C-8），20.1（C-9），26.2（C-10），26.2（C-11），33.0（C-12），45.4（C-13），49.0（C-14），35.7（C-15），26.6（C-16），52.3（C-17），18.2（C-18），30.0（C-19），36.1（C-20），18.5（C-21），32.0（C-22），31.8（C-23），76.5（C-24），147.9（C-25），111.1（C-26），17.7（C-27），19.5（C-28），25.6（C-29），14.1（C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[22]，故鑒定該化合物為（24R）-環(huán)阿屯烷-25-烯-3β，24-二醇。

化合物3：白色固體;1H-NMR（400 MHz，CDCl3）：δH 3.29（1H，dd，J=10.0，1.6 Hz，H-24），0.78（1H，d，J=4.0 Hz，H-19a），0.57（1H，d，J=4.0 Hz，H-19b），1.22（3H，s，H-26），1.16（3H，s，H-27），1.09（3H，s，H-29），1.04（3H，s，H-18），0.99（3H，s，H-28），0.90（3H，s，H-30），0.89（3H，d，J=6.4 Hz，H-21）;13C-NMR（100 MHz，CDCl3）：δC 33.5（C-1），37.5（C-2），216.8（C-3），50.3（C-4），48.4（C-5），21.5（C-6），28.1（C-7），47.9（C-8），21.1（C-9），26.0（C-10），25.9（C-11），35.6（C-12），45.3（C-13），48.7（C-14），32.8（C-15），26.7（C-16），52.3（C-17），18.1（C-18），29.6（C-19），36.4（C-20），18.4（C-21），33.4（C-22），28.7（C-23），79.6（C-24），73.3（C-25），23.2（C-26），26.6（C-27），19.3（C-28），22.2（C-29），20.8（C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[23]，故鑒定該化合物為為（24R）-cycloartane-24，25-diol-3-one。

化合物4：熊果酸;白色固體;1H-NMR（400 MHz，CDCl3）：δH 5.25（1H，t，J=3.2 Hz，H-12），3.22（1H，dd，J=10.8，4.4 Hz，H-3），1.08（3H，s，H-27），0.98（3H，s，H-23），0.94（3H，d，J=6.8 Hz，H-29），0.92（3H，s，H-26），0.86（3H，d，J=6.8 Hz，H-30），0.78（3H，s，H-24），0.77（3H，s，H-25）;13C-NMR（100 MHz，CDCl3）：δC 38.9（C-1），28.2（C-2），79.2（C-3），39.0（C-4），55.4（C-5），18.5（C-6），33.1（C-7），33.8（C-8），47.7（C-9），36.8（C-10），23.4（C-11），125.8（C-12），138.5（C-13），42.2（C-14），27.4（C-15），24.3（C-16），48.0（C-17），53.1（C-18），39.2（C-19），39.6（C-20），30.8（C-21），37.1（C-22），28.3（C-23），17.1（C-24），15.6（C-25），15.8（C-26），23.7（C-27），180.9（C-28），17.2（C-29），21.3（C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[24]，故鑒定該化合物為熊果酸。

化合物5：白色固體;1H-NMR（400 MHz，CD3OD）：δH 4.64（1H，brs，H-29a），4.52（1H，s，H-29b），3.06（1H，dd，J=11.2，4.8 Hz，H-3），1.63（3H，s，H-30），0.94（3H，s，H-27），0.90（3H，s，H-23），0.88（3H，s，H-26），0.79（3H，s，H-25），0.68（3H，s，H-24）;13C-NMR（150 MHz，CDCl3）：δC 38.5（C-1），27.0（C-2），79.2（C-3），38.5（C-4），55.0（C-5），17.9（C-6），34.8（C-7），40.7（C-8），50.3（C-9），37.3（C-10），22.3（C-11），25.9（C-12），37.3（C-13），43.0（C-14），27.0（C-15），32.3（C-16），57.8（C-17），45.4（C-18），49.6（C-19），149.7（C-20），29.0（C-21），37.4（C-22），27.6（C-23），15.2（C-24），16.0（C-25），16.2（C-26），15.2（C-27），181.1（C-28），109.1（C-29），19.7（C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[25]，故鑒定該化合物為樺木酸。

化合物6：白色固體;1H-NMR（400 MHz，CDCl3）：δH 4.67（1H，d，J=1.6 Hz，H-29a），4.57（1H，m，H-29b），3.78（1H，brd，J=10.8 Hz，H-28a），3.31（1H，brd，J=10.8 Hz，H-28b），3.17（1H，dd，J=11.2，5.2 Hz，H-3），2.38（1H，td，J=10.8，5.6 Hz，H-13），1.67（3H，s，H-30），1.01（3H，s，H-27），0.97（3H，s，H-26），0.96（3H，s，H-23），0.81（3H，s，H-24），0.75（3H，s，H-25）;13C-NMR（150 MHz，CDCl3）：δC 38.8（C-1），27.5（C-2），79.1（C-3），39.0（C-4），55.4（C-5），18.4（C-6），34.4（C-7），41.0（C-8），50.5（C-9），37.3（C-10），21.0（C-11），25.3（C-12），37.4（C-13），42.8（C-14），27.2（C-15），29.3（C-16），47.9（C-17），49.9（C-18），48.9（C-19），150.6（C-20），29.9（C-21），34.1（C-22），28.1（C-23），15.5（C-24），16.2（C-25），16.1（C-26），14.9（C-27），60.6（C-28），109.8（C-29），19.2（C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[26]，故鑒定該化合物為白樺脂醇。

本論文對(duì)波羅蜜屬植物猴子癭袋的小枝進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究，從中分離得到六個(gè)三萜1-6，其中化合物1、5和6為首次從菠蘿蜜屬植物中分離獲得。

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（2019-06-05收稿 責(zé)任編輯：徐穎）