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      干化學(xué)法與全自動(dòng)血球儀檢測(cè)血紅蛋白的結(jié)果比較分析

      2019-09-25 11:44:52李丹
      關(guān)鍵詞:血球化學(xué)法試紙

      李丹

      (生一(蘇州)生物科技有限公司 江蘇蘇州 215000)

      1 前言

      血紅蛋白偏低常與貧血或出血性疾病密切相關(guān),血紅蛋白濃度不合理上升會(huì)產(chǎn)生血細(xì)胞增多癥。對(duì)兒童而言,不管是入園檢測(cè)還是入學(xué)檢測(cè)都是評(píng)估是否出現(xiàn)貧血的重要內(nèi)容。 常用的血紅蛋白檢測(cè)方式包括干化學(xué)法和全自動(dòng)血球儀檢測(cè), 但兩種方式在數(shù)值評(píng)定上存在差異,嚴(yán)重制約后續(xù)診療[1]。 本文對(duì)干化學(xué)法與全自動(dòng)血球儀檢測(cè)血紅蛋白的結(jié)果進(jìn)行了比較分析。

      2 資料與方法

      2.1 一般資料

      選取生一(蘇州)生物科技有限公司體檢中心2016 年6 月—2018 年6 月進(jìn)行體檢50 名兒童作為研究對(duì)象,根據(jù)不同檢測(cè)方式將研究對(duì)象分為觀察組和對(duì)照組,每組25 名。 對(duì)照組男性12 名,女性13 名,年齡6~12 歲,平均年齡(8.02+2.34)歲;觀察組男性14 名,女性11 名,平均年齡7~14歲,年齡(9.05+1.23)歲。 兩組兒童身體狀況良好,比較兩組兒童年齡、性別等基本資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

      2.2 方法

      對(duì)照組采用干化學(xué)法測(cè)量,取兒童末梢血10 μL,將其放置在試紙中央,待試紙條加樣區(qū)充滿(mǎn)血液后,其在反應(yīng)膜上擴(kuò)散迅速,紅細(xì)胞被溶解,將血紅蛋白充分釋放后轉(zhuǎn)化為高鐵血紅蛋白。 利用血紅蛋白分析儀在525 nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)的顏色值和血紅蛋白濃度的反射系數(shù)進(jìn)行計(jì)算。

      觀察組采用全自動(dòng)血球儀測(cè)量, 保證兒童手掌溫暖,護(hù)理人員輕柔地按摩其無(wú)名指或中指指尖。首檢部位應(yīng)用醫(yī)用酒精消毒,使用無(wú)菌紗布擦干,并充分消毒指尖。 將采血針裝好且扎針深度通過(guò)采血筆調(diào)整后,進(jìn)行采樣。 當(dāng)樣本量為15 μL 時(shí),采血量為最佳。此時(shí)將血滴于檢測(cè)試條上的測(cè)試孔。將橡膠氣囊套在采血管上。 確認(rèn)將檢測(cè)試紙條從檢測(cè)紙包裝中拿出,且保證檢測(cè)試紙無(wú)破損,將最后一滴血滴注在檢測(cè)試紙上;加注樣本采用移液槍進(jìn)行。加注樣本時(shí)避免測(cè)試孔與槍頭接觸,使用密封好的試紙條,將檢測(cè)試紙條插入全自動(dòng)血球儀托架上,試紙孔朝上,當(dāng)正確插入檢測(cè)試紙條后, 使用全自動(dòng)血球儀進(jìn)行檢測(cè),檢測(cè)儀會(huì)以燈閃爍為標(biāo)示告知準(zhǔn)備樣本檢測(cè),需在120 s 緩沖時(shí)間內(nèi)將血樣滴入。 使用全自動(dòng)血球儀時(shí),在檢測(cè)試紙條插入后,將其放置在平穩(wěn)的工作臺(tái)上,禁止將血液直接黏附在血液分析儀上,儀器上必須一直插著檢測(cè)試紙條,測(cè)試孔禁止用手指接觸,血液不可過(guò)量滴加,檢測(cè)試紙完全蓋滿(mǎn)即可,不允許在檢測(cè)試紙上重復(fù)滴加血液,不可重復(fù)實(shí)驗(yàn)。

      2.3 標(biāo)準(zhǔn)與指標(biāo)

      2.3.1 判斷標(biāo)準(zhǔn)

      分析比較兩種檢查血紅蛋白濃度、 紅細(xì)胞指標(biāo)濃度。

      2.3.2 干化學(xué)法性能指標(biāo)

      (1)外觀。 檢測(cè)試紙條應(yīng)光潔無(wú)毛刺,正面的加樣區(qū)應(yīng)潔凈無(wú)污點(diǎn)。

      (2)物理性狀。 試紙條寬度:(15.0±0.5)mm。

      (3)準(zhǔn)確性。 血紅蛋白區(qū)間為40~100 g/L,絕對(duì)偏差不可超過(guò)10 g/L;血紅蛋白區(qū)間為101~200 g/L,相對(duì)偏差不可超過(guò)10%;線性為40~200 g/L,相關(guān)系數(shù)r 值不可低于0.98。

      (4)重復(fù)性。 血紅蛋白區(qū)間為40~100 g/L,檢驗(yàn)結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)差(SD)不可超過(guò)8 g/L;血紅蛋白區(qū)間為101~200 g/L,檢測(cè)結(jié)果的變異系數(shù)(CV)不可超過(guò)8%。

      (5)批間差。 3 批血紅蛋白檢測(cè)試紙條的批間差不可超過(guò)15%。

      (6)穩(wěn)定性。 按說(shuō)明書(shū)的儲(chǔ)存條件儲(chǔ)存,原包裝存放的檢測(cè)試紙條有效期為12 個(gè)月;取到效期后1 個(gè)月內(nèi)的產(chǎn)品,檢測(cè)結(jié)果應(yīng)符合要求。

      2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

      采用SPSS21.0 軟件統(tǒng)計(jì)所有數(shù)據(jù),計(jì)數(shù)資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,t 檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料用百分率(%)表示,χ2檢驗(yàn),P<0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

      3 結(jié)果

      全自動(dòng)血球分析儀法檢測(cè)血紅蛋白濃度、 紅細(xì)胞壓積結(jié)果明顯優(yōu)于干化學(xué)法測(cè)定結(jié)果,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 詳見(jiàn)表1。

      表1 兩種方式檢測(cè)血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞壓積結(jié)果比較(±s)

      表1 兩種方式檢測(cè)血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞壓積結(jié)果比較(±s)

      注:t 為t 檢驗(yàn)中成對(duì)樣本的樣本值;P 為χ2 檢驗(yàn)中假設(shè)為真時(shí)的概率。

      組別樣本數(shù) 血紅蛋白濃度(g/L) 紅細(xì)胞壓積(%)全自動(dòng)血球分析儀干化學(xué)法25 25 t P 119.64+31.23 108.34+29.13 7.313<0.05 38.23+8.32 30.23+3.21 9.032<0.05

      4 討論

      本次實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示,全自動(dòng)血球分析儀法檢測(cè)血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞壓積結(jié)果明顯優(yōu)于干化學(xué)法測(cè)定結(jié)果,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。分析其結(jié)果可能是:(1)干化學(xué)法采集的末梢血可能未在試紙條中央,導(dǎo)致檢查結(jié)果誤差;同時(shí)計(jì)算公式難以精準(zhǔn)測(cè)量,導(dǎo)致數(shù)值偏小[2]。 (2)兩種檢測(cè)方式存在差異,干化學(xué)法是通過(guò)公式計(jì)算得出,而全自動(dòng)血球分析儀是通過(guò)血紅蛋白分析儀的光學(xué)檢測(cè)頭可自動(dòng)檢測(cè)膜上反射光的強(qiáng)度與血紅蛋白濃度成反比得出。血紅蛋白分析儀會(huì)在30 s 內(nèi)計(jì)算并顯示總血紅蛋白的濃度并得出結(jié)果,因此,測(cè)量血紅蛋白準(zhǔn)確性更高。(3)血紅蛋白分析儀進(jìn)樣為單通道,不適合大樣本檢測(cè),血液采集后應(yīng)立即檢測(cè),久置標(biāo)本會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。(4)相關(guān)研究顯示,干化學(xué)法檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確度較全自動(dòng)血球分析儀低,可能是高血漿體滲透壓引發(fā)的,高水平的血漿蛋白和血脂可能導(dǎo)致血紅蛋白指標(biāo)異常增高,而多項(xiàng)疾病影響的高白細(xì)胞血癥可能造成檢測(cè)結(jié)果偏差。

      5 結(jié)語(yǔ)

      綜上所述,血紅蛋白采用全自動(dòng)血球儀檢查準(zhǔn)確度較高,判斷血紅蛋白等指標(biāo),應(yīng)以全自動(dòng)血球儀為準(zhǔn),干化學(xué)法為輔。

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