唐藝 陳舒憶 劉毅 劉鑫
【摘 要】 目的:對貴州艷山姜進行生藥學(xué)鑒定研究,為艷山姜的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。方法:采用基源鑒定、性狀鑒別對艷山姜的來源、性狀進行鑒別;采用石蠟切片和粉末制片法研究觀察艷山姜的顯微結(jié)構(gòu)。結(jié)果:艷山姜的果皮表面黃棕色,有十?dāng)?shù)條隆起的縱棱,種子團較疏松,易散落;顯微結(jié)構(gòu)清晰,種皮表皮細胞表面觀呈多角形,油細胞散生于色素層細胞間;粉末顯微可見石細胞、螺紋導(dǎo)管、非腺毛、薄壁細胞、胚乳細胞和草酸鈣方晶等。結(jié)論:艷山姜原植物形態(tài)特征明顯,性狀特征及顯微構(gòu)造顯著,其生藥學(xué)研究可為艷山姜的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供充分的科學(xué)依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】 艷山姜;生藥學(xué);性狀鑒別;顯微鑒別;石蠟切片
【中圖分類號】R282.5 【文獻標(biāo)志碼】 A【文章編號】1007-8517(2019)10-0035-04
Pharmacognostical Study on Alpinia zerumbet in Guizhou
TANG Yi CHEN Shuyi LIU Yi* LIU Xin
Guiyang Inspection Center for Food and Drug, Guiyang 550081, China
Abstract:Objective To study the pharmacognosy identification of the Alpinia zerumbet in Guizhou, and provide the basis for the quality standard of the Alpinia zerumbet. Methods Pharmacognosy identification was studied by the methods of base source identification and character identification; Study on the Microstructure of Alpinia zerumbet by Paraffin Section and Powder Section. Results The pericarp of Alpinia zerumbet is yellow-brown with more than ten ridges, and the seed mass is loose and easy to scatter. Microstructure was clear, the epidermal cells of seed were polygonal, and oil cells were scattered among the pigment layer cells. The powder microscopy showed stone cells, threaded ducts, non-glandular hairs, parenchyma cells, endosperm cells and calcium oxalate cuboids, etc. Conclusion The morphological characteristics and microscopic structure of the Alpinia zerumbet are obvious. The pharmacognostical studies can provide sufficient scientific basis for the quality standard of Alpinia zerumbet.
Key words:Alpinia zerumbet; Pharmacognosy; Character Identification; Microscopic Identification; Paraffin Section
艷山姜Alpinia zerumbet(Pert)Burtt et.Smith為姜科山姜屬植物艷山姜的藥用植物,生于海拔400~650m的林中蔭處[1],別名玉桃、草扣、大良姜、大草蔻、土砂仁[2],是貴州省少數(shù)民族地區(qū)的傳統(tǒng)習(xí)用藥物,廣泛分布于我國東南部至西南部各地。最早記載于《廣州常見經(jīng)濟植物》,收錄于《全國中草藥匯編》《中華本草》和2003版《貴州省中藥、民族藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》中,以新鮮或者干燥成熟果實入藥,具有溫中燥濕、行氣止痛、截瘧等功效,主治心腹冷痛,胸腹脹滿,消化不良,嘔吐腹瀉,瘧疾[3]等病癥?,F(xiàn)代藥理研究艷山姜具有抗炎鎮(zhèn)痛[4]、抗氧化、抗菌、殺蟲驅(qū)蟲、抗動脈粥樣硬化[5]、抗胃及十二指腸潰瘍[6]等作用。
艷山姜與砂仁、草豆蔻及同科同屬的藥用植物等易于混淆,導(dǎo)致藥材出現(xiàn)互用的現(xiàn)象?,F(xiàn)對艷山姜的基源、藥材性狀、分果橫切面和粉末的顯微鑒別特征進行生藥學(xué)研究,旨在建立艷山姜的真?zhèn)舞b別方法,并為其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的修訂奠定研究基礎(chǔ)。
1 儀器與材料
1.1 材料 實驗用艷山姜采集于貴州貞豐、羅甸等地,經(jīng)貴州中醫(yī)藥大學(xué)魏升華教授鑒定為姜科植物艷山姜Alpinia zerumbet(Pert)Burtt et.Smith的干燥成熟果實。
1.2 儀器 Leica DM2500光學(xué)生物顯微鏡和Leica S60立體顯微鏡(德國Leica Microsystems);Leica RM2245半自動輪轉(zhuǎn)切片機(德國Leica Biosystems)。
1.3 試劑試藥 無水乙醇、乙醇、二甲苯、番紅、固綠等。
2 方法
2.1 基原鑒定 通過對采集地原植物形態(tài)進行觀察、測量和拍攝記錄,采集原植物標(biāo)本制作成蠟葉標(biāo)本,核對艷山姜在《中國植物志》和《貴州植物志》中植物形態(tài)的描述,對其進行原植物鑒定,描述其植物形態(tài)特征。
2.2 性狀鑒別 使用游標(biāo)卡尺測量艷山姜果實和種子的長度、直徑,采用肉眼、嗅覺和Leica S60立體顯微鏡觀察艷山姜的形狀、大小、顏色、表面特征、質(zhì)地、斷面、氣味等。
2.3 顯微鑒別 采用石蠟切片法[7]研究艷山姜的顯微結(jié)構(gòu)。取成熟的艷山姜果皮和種子在溫水中浸泡24~48h,然后放入70%FAA固定液(70%的乙醇90mL,冰醋酸5mL,37%甲醛5mL)中固定24h,依次在不同濃度的乙醇中逐級脫水,乙醇濃度按順序依次為70%、80%、90%、95%、100%、100%,每次1h。脫水后先用無水乙醇-二甲苯(1∶1)浸泡1h;再用二甲苯浸泡1h,反復(fù)2次至種子透明。透明后的材料置于65℃恒溫箱中浸蠟,每隔30min加固體石蠟1次,反復(fù)3次,后置換成純石蠟后在恒溫箱中放置6h,使石蠟充分浸入種子中。包埋后修塊、切片,片厚度18μm。切好的蠟片在展片臺上展開、貼片,再置50℃烘箱中烘干。在二甲苯中脫蠟,乙醇復(fù)水后番紅染色1h左右,60%、70%、80%、90%的乙醇逐級脫水后,入固綠溶液中染色2min,脫水后二甲苯透明封片。采用Leica DM2500光學(xué)生物顯微鏡觀察、拍照記錄艷山姜的果皮、種皮、胚、胚乳等顯微結(jié)構(gòu),圖片均用Leica LAS V4.3顯像系統(tǒng)處理。
3 結(jié)果
3.1 植物形態(tài)特征 多年生常綠草本,株高1~2m。葉片披針形,長30~60cm,寬5~10cm,頂端漸尖而有一旋卷的小尖頭,基部漸狹,邊緣具短柔毛,兩面均無毛;葉柄長1~1.5cm;葉舌長5~10mm,外被毛。圓錐花序呈總狀花序式,下垂,長達30cm,花序軸紫紅色,被絨毛,分枝極短,在每一分枝上有花1~2(3)朵;小苞片橢圓形,長3~3.5cm,白色,頂端粉紅色,蕾時包裹住花,無毛;小花梗極短;花萼近鐘形,長約2cm,白色,頂粉紅色,一側(cè)開裂,頂端又齒裂;花冠管較花萼為短,裂片長圓形,長約3cm,后方的1枚較大,乳白色,頂端粉紅色;側(cè)生退化雄蕊鉆狀,長約2mm;唇瓣匙狀寬卵形,長4~6cm,頂端鄒波狀,黃色而有紫紅色紋彩;雌蕊長約2.5mm;子房被金黃色粗毛;腺體長約2.5mm。蒴果卵圓形,直徑約2cm,被稀疏的粗毛,具顯露的條紋,頂端常冠以宿萼,熟時朱紅色;種子有棱角?;ㄆ冢?~6月;果期;7~10月[1-8]。如圖1所示。
3.2 性狀特征 呈橢圓形、卵圓形或球形,兩端略尖,長約2~3cm,直徑1~2cm,表面黃棕色,略有光澤,有十?dāng)?shù)條隆起的縱棱,頂端具一突起,為花被殘基,基部有的具果柄斷痕。果皮質(zhì)較脆,易縱向撕裂。剝?nèi)ネ馄?,中有白色隔膜,將種子團分成3瓣,每瓣有種子4~15粒,排列疏松,易散落。種子為圓錐狀多面體,長4~5mm,直徑3~4mm,表面棕褐色,外被白色膜質(zhì)假種皮,種脊為一條縱溝,一端有凹狀種臍;質(zhì)硬,將種子沿種脊縱剖兩瓣,縱斷面觀呈斜心形,種皮沿種脊向內(nèi)伸入部分約占整個表面積的1/2;胚乳灰白色。氣香,味辛、微苦。如圖2所示。
3.3 顯微特征
3.3.1 果皮橫切面 類“齒輪”型。外果皮為1列扁平細胞,外被角質(zhì)層,可見非腺毛基部鑲嵌在扁平細胞中,其下為1列類方形石細胞。中果皮寬廣,其中為薄壁細胞,內(nèi)含有草酸鈣方晶;在每個小“齒輪”中部靠上或靠近內(nèi)果皮處散有維管束。內(nèi)果皮為1列扁平的薄壁細胞,易破碎。如圖3所示。
3.3.2 種子橫切面 呈類圓形。假種皮有時殘存,為長方形或類方形薄壁細胞;種皮表皮細胞1列,類方形,壁較厚;表皮下為2~3列切向延長的薄壁細胞;色素層為數(shù)列棕色細胞,形態(tài)不一,其間散有類圓形油細胞2~3列;內(nèi)種皮為1列柵狀細胞,棕紅色,內(nèi)壁與側(cè)壁極厚,胞腔小,內(nèi)含類圓形硅質(zhì)塊。外胚乳細胞含淀粉粒和草酸鈣方晶。內(nèi)胚乳細胞含糊粉粒。如圖4所示。
3.3.3 粉末特征 粉末灰棕色。果皮石細胞類圓形或不規(guī)則多角形,偶見長條形,單個或成群,直徑12~38μm,長18~72μm,壁甚厚,胞腔狹小,孔溝明顯,具層紋;可見螺紋導(dǎo)管;非腺毛單細胞或多細胞,基部膨大含棕色物,常斷裂。種皮表皮細胞表面觀呈多角形,直徑約10~30μm,壁稍厚,常與下皮細胞上下層垂直排列;下皮為1~3列薄壁細胞,略切向延長;色素層細胞皺縮,界限不清楚,含紅棕色物,易碎裂成不規(guī)則色素塊;油細胞散生于色素層細胞間,呈類圓形或長圓形,含黃色油狀物;內(nèi)種皮厚壁細胞黃棕色或紅棕色,表面觀多角形,直徑約9~24μm,壁厚,非木化,胞腔內(nèi)含硅質(zhì)塊。外胚乳細胞充滿淀粉粒集結(jié)成的淀粉團,常破裂,淀粉團散落在外,呈橢圓形或圓型,含細小草酸鈣方晶。如圖5所示。
4 討論
通過比較研究,艷山姜有以下鑒別要點:①植物形態(tài)上:艷山姜和草豆蔻的植物形態(tài)相似,葉片均為披針形,頂端漸尖,總狀花序,具小苞片,花萼鐘狀,唇瓣卵形,果實球形;不同點在于艷山姜花序下垂,花序軸紫紅色,唇瓣頂端黃色具有紫紅色紋彩,果實表面被稀疏的粗毛、有棱角。②性狀鑒別上,其果皮表面黃棕色,有十?dāng)?shù)條隆起的縱棱,而砂仁中的陽春砂和綠殼砂有不明顯三棱,表面棕褐色,密生刺狀突起[9];艷山姜種子團比草豆蔻連接緊密,略光滑[9]的種子團較疏松,易散落。③組織構(gòu)造上,姜科藥材的種子均是由種皮表皮、色素層、油細胞層、內(nèi)種皮細胞以及胚乳細胞構(gòu)成,不同點主要為艷山姜種子的油細胞散生于色素層細胞間,陽春砂和草果的油細胞層為單獨1列油細胞[9]。④粉末顯微上:艷山姜的種皮表皮細胞表面觀呈多角形,而草豆蔻種皮表皮細胞表面觀呈長條形[9]。⑤質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)上,相對2003年版《貴州省中藥、民族藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》中艷山姜的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[3]而言,增加了果皮的石細胞、螺紋導(dǎo)管、非腺毛和薄壁細胞的草酸鈣方晶;完善了種子的種皮表皮細胞形狀,大小,油細胞與色素層細胞的排列關(guān)系,內(nèi)含物顏色,內(nèi)種皮細胞顏色以及胚乳細胞所含淀粉團形狀和草酸鈣方晶等鑒別要點。
參考文獻
[1]貴州植物志編輯委員會. 貴州植物志[M]. 成都:四川民族出版社, 1989:702.
[2]國家中醫(yī)藥管理局中華本草編委會.中華本草(第8冊)[M]. 上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社, 2004(24):607-608.
[3]貴州省藥品監(jiān)督管理局.貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[S]. 貴陽:貴州科技出版社, 2003:292.
[4]陶玲, 沈祥春, 彭佼, 等. 艷山姜揮發(fā)油抗炎鎮(zhèn)痛作用的實驗研究[J]. 中國醫(yī)院藥學(xué)雜志, 2010, 30(9):722-724.
[5]Chan, E.W.C.,Wong, S.K.,Chan, H.T. Alpinia zerumbet, a ginger plant with a multitude of medicinal properties:An update on its research findings [J], J Chin Pharm Sci,2017, 26(11), 775–788.
[6]孫備. 艷山姜水提物中具有生物活性的黃酮和麻醉椒毗喃酮化合物的分離[J]. 國外醫(yī)學(xué)中醫(yī)中藥分冊, 1999, 21(5):46.
[7]趙中振, 陳虎彪. 中藥顯微鑒定圖典[M]. 福州:福建科學(xué)技術(shù)出版社, 2016:14-16.
[8]中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會. 中國植物志(第16卷第二分冊)[M]. 北京:科學(xué)出版社, 1981:87.
[9]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[S]. 北京:中國醫(yī)藥科技出版社, 2015:238, 239, 253.