馮 婷，李海英，曾成龍，閆 丹，趙小東，王勝春

(空軍軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院皮膚科，西安 710032)

尖銳濕疣(condyloma acuminate，CA)，也稱生殖器疣，是目前常見的性傳播疾病之一，發(fā)病率呈逐年遞增趨勢(shì)，好發(fā)于生殖器及肛周部位[1]，最顯著的臨床特點(diǎn)是容易復(fù)發(fā)。人乳頭瘤病毒(human papilloma virus，HPV)是引起該疾病的病原體，它是一種對(duì)人的皮膚和黏膜具有高度親嗜性的小分子雙鏈DNA病毒，人們根據(jù)編碼衣殼蛋白L1的基因序列不同來(lái)定義HPV亞型，目前已明確200余種型別[2]。資料研究顯示不同型別的HPV可以導(dǎo)致不同的臨床病變[3]，其中42種基因型與生殖道疾病有關(guān)，也有文獻(xiàn)報(bào)道CA患者的HPV流行型別具有人群和地區(qū)差異性[4]。本文擬通過(guò)回顧大樣本CA患者的臨床資料和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)數(shù)據(jù)，掌握其HPV基因型的類型、數(shù)量和高低危險(xiǎn)型的分布情況，以此豐富CA流行病學(xué)資料，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 2010年9月～2018年9月就診于西京醫(yī)院性病門診臨床診斷CA患者7 712例，年齡是8個(gè)月～84歲，平均年齡32.68±10.97歲。入選標(biāo)準(zhǔn)：有典型的CA臨床癥狀，進(jìn)行過(guò)HPV基因分型檢測(cè)；排除標(biāo)準(zhǔn)：臨床資料缺失、其它HPV相關(guān)感染疾病和自身免疫性疾病患者。

1.2 試劑和儀器 HPV基因分型檢測(cè)試劑盒由亞能生物技術(shù)有限公司提供，可檢測(cè)包括18種高危型(HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，53，56，58，59，66，68，73和82，83)及5種低危型(HPV6，11，42，43，81)共23種HPV基因型。TL988實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀由西安天隆科技有限公司提供，F(xiàn)YY-3型分子雜交儀由江蘇興化市分析儀器廠提供。

1.3 方法 充分暴露患者的疣體部位，先用生理鹽水清洗，然后于患者皮損處消毒，再用消毒活檢鉗夾取疣體組織置于標(biāo)本保存液，立即檢測(cè)或置于-20℃冰箱內(nèi)保存待檢。HPV基因分型檢測(cè)原理采用的是PCR反向分子雜交法，實(shí)驗(yàn)步驟均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作，實(shí)驗(yàn)全部過(guò)程也在質(zhì)量控制范圍內(nèi)，另本檢測(cè)中心每年的室間質(zhì)量控制評(píng)價(jià)活動(dòng)成績(jī)也均合格。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)匯總與統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，若P<0.05則差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 性別分布情況 7 712例中男性4 935例，女性2 777例，性別比例為1.78∶1。

2.2 年齡分布情況 患者年齡分布情況見表1。多為青壯年，以20～29歲最多， 0～9歲及50歲以上患者664例(8.61%)。

2.3 HPV基因型別檢出情況 見表2。7 712例中有50例未檢測(cè)出任何型別，有7 662例檢測(cè)出23種HPV基因型別，檢出頻次排名前十位的型別依次為HPV6，11，16，43，52，42，58，51，59和56型。

表1 7 712例CA患者的年齡分布情況

表2 7 712例CA患者的HPV基因型檢出頻次情況

2.4 混合感染情況和危險(xiǎn)度分布情況 7 662例患者中單一基因型感染占58.98%(4 519/7 662)，多種基因型感染占41.02%(3 143/7 662)，其中二重感染最多占60.77%(1 910/3 143)，最多可見同時(shí)感染14個(gè)基因型；低危型占60.66%(4 648/7 662)；低高混合型占32.17%(2 465/7 662)，高危型占7.17%(549/7 662)。

3 討論

HPV是一種無(wú)包膜二十面體核衣殼結(jié)構(gòu)的DNA病毒，可引起眾多的疾病，包括扁平疣、尋常疣、疣狀表皮發(fā)育不良、鮑溫樣丘疹病、CA，宮頸癌和陰莖癌等，這些疾病也都由不同的HPV亞型引起，例如扁平疣主要是由3，10，27和28型等引起，尋常疣則為1，2，4和7型等，而CA感染HPV基因型較多，主要為本研究組中的23個(gè)類型，也有研究表明HPV16，18，33，45和31型是宮頸癌中最常見的類型[5]，HPV16和18對(duì)浸潤(rùn)性宮頸癌的影響為69.7%[6]。根據(jù)HPV致癌力的大小，還將HPV基因型分為高危型和低危型，前者包括HPV16，18，31，33，45，52，56和58等，其持續(xù)性感染可能會(huì)導(dǎo)致女性各部位上皮內(nèi)瘤變和男性陰莖及肛周癌變；后者包括HPV6，11，42，43和81型等，與肛門和外生殖器疣等良性病變有關(guān)[7]。

本研究CA患者中男性患者多于女性患者，這可能與男性荷爾蒙激素偏高，性生活相對(duì)頻繁，性伴較多有關(guān)。HPV感染情況與年齡也有一定關(guān)系[8]，本研究顯示CA患者多為青壯年，以20～29歲例數(shù)最多，這些與大多數(shù)文獻(xiàn)均一致[9]，同時(shí)兒童及50歲以上患者約占8.61%，臨床上應(yīng)重視此人群的防治。本研究HPV基因型檢出頻次依次為HPV6，11，16，43，52，42，58，51，59和56型，此與BAO等[10]研究結(jié)果不一致(亞洲最常見的HPV亞型為16，58，33，52，18型)，與現(xiàn)在的HPV九價(jià)疫苗(6，11，16，18，31，33，45，52，58)類型也不全相同，說(shuō)明了CA患者的HPV流行型別有地區(qū)差異性[11]，也有利于西北地區(qū)CA患者的流行病學(xué)和HPV疫苗發(fā)展研究。本研究7 712例中有50例未檢測(cè)出任何型別，與目前臨床上約70%的CA患者可檢測(cè)出HPV感染[3]的觀點(diǎn)一致， 其中原因可能是這些患者感染的HPV型別不在本研究檢測(cè)范圍之內(nèi)，是不是存在新的HPV型別？這還有待于進(jìn)一步研究，并希望最終能有符合HPV感染流行譜的檢測(cè)試劑。

CA患者HPV感染的基因型復(fù)雜多樣，不同CA患者感染HPV的情況也可能不同，某位患者感染的基因型可以是一種，也可以是混合感染兩種或兩種以上，可以是低危型感染、也可以是高危型或高低危混合感染。從本研究結(jié)果來(lái)看，單一感染和低危型感染為HPV感染主要形式，這與其他地區(qū)的結(jié)果類似[12]。掌握臨床CA的HPV感染情況和基因型分布不僅僅是流行病學(xué)調(diào)查的需要，而且對(duì)于尖銳濕疣的監(jiān)測(cè)和控制有重要的臨床意義。臨床中我們要優(yōu)化單一感染和低危型感染患者治療方案，提倡個(gè)體化治療，力求降低患者復(fù)發(fā)頻率，同時(shí)也要注意多重感染和高危型患者的綜合治療，重視長(zhǎng)期進(jìn)行定期隨訪觀察工作，并完善女性患者的宮頸癌前病變篩查[13]，以防止HPV相關(guān)腫瘤的發(fā)生。此外，要繼續(xù)加強(qiáng)CA相關(guān)知識(shí)宣教工作，真正做好CA患者的全面檢查、治療和定期隨訪。

目前國(guó)內(nèi)進(jìn)行HPV檢測(cè)的方法很多，包括質(zhì)譜、基因分型和PCR定量等，臨床采用更多的是基因分型和PCR定量檢測(cè)[14]，HPV基因分型檢測(cè)技術(shù)是一種靈敏度高、特異度好、采樣方便、能正確區(qū)分高危型和低危型感染的診斷方法，是臨床診斷HPV感染和相關(guān)研究的有效輔助手段。