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      不同產(chǎn)地北沙參藥材的揮發(fā)油成分比較分析

      2019-10-20 05:25:18王輝明呂志強(qiáng)張顥兒潘冬琦王鵬瑞劉紅兵
      中國(guó)藥房 2019年22期
      關(guān)鍵詞:萊陽(yáng)北沙參安國(guó)

      王輝明 呂志強(qiáng) 張顥兒 潘冬琦 王鵬瑞 劉紅兵

      中圖分類號(hào) R932;R284 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號(hào) 1001-0408(2019)22-3109-04

      DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2019.22.17

      摘 要 目的:比較山東萊陽(yáng)、河北安國(guó)、內(nèi)蒙古赤峰3個(gè)產(chǎn)地北沙參揮發(fā)油成分的差異。方法:采用水蒸氣蒸餾法提取不同產(chǎn)地北沙參揮發(fā)油并計(jì)算提取率。利用氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)技術(shù)分析揮發(fā)油成分,采用Xcalibur工作站對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行校正,采用NIST 11.0質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行化合物檢索(匹配度>800),以峰面積歸一化法求得各化學(xué)成分的相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)。結(jié)果:萊陽(yáng)北沙參的揮發(fā)油提取率為0.013%,遠(yuǎn)低于安國(guó)北沙參(0.099%)和赤峰北沙參(0.105%)。分別從3個(gè)產(chǎn)地北沙參揮發(fā)油中鑒定出了15、18、27個(gè)化合物,相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為89.29%、96.76%、94.53%;鐮葉芹醇是不同產(chǎn)地北沙參揮發(fā)油中相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高的共有化合物,相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為69.79%、90.89%、71.04%;萊陽(yáng)產(chǎn)北沙參富含脂肪酸類成分,安國(guó)和赤峰產(chǎn)北沙參富含C15H24型倍半萜類成分。結(jié)論:不同產(chǎn)地北沙參的揮發(fā)油成分有較大差異,提示應(yīng)將其作為區(qū)分不同產(chǎn)地北沙參的化學(xué)標(biāo)志物。

      關(guān)鍵詞 北沙參;產(chǎn)地;揮發(fā)油;成分;氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用;鐮葉芹醇;化學(xué)標(biāo)志物

      Comparative Analysis of Volatile Oil Constituents of Glehnia littoralis from Different Producing Areas

      WANG Huiming1,LYU Zhiqiang1,ZHANG Haoer2,PAN Dongqi1,WANG Pengrui2,LIU Hongbing2,3(1. Drug Purchase Office, the Affiliated Hospital of Qingdao University, Shandong Qingdao 266000, China; 2. School of Pharmacy, Ocean University of China, Shandong Qingdao 266003, China; 3. Qingdao National Pilot Laboratory of Marine Science and Technology, Functional Laboratory of Marine Drugs and Biological Products,Shandong Qingdao 266237,China)

      ABSTRACT ? OBJECTIVE: To compare the difference in volatile oil constituents of Glehniae littoralis from 3 producing areas as Shandong Laiyang, Hebei Anguo, Inner Mongolian Chifeng. METHODS: The method of steam distillation was used to extract the volatile oil of G. littoralis from different areas and calculate the extraction rate. The constituents of volatile oil were analyzed by using GC-MS. The data was corrected by Xcalibur chemical workstation. The constituents were searched by NIST 11.0 mass spectrometry database (matching degree >800), and the relative mass fraction of each chemical constituent was obtained by peak area normalization. RESULTS: The extraction rate of volatile oil in G. littoralis from Laiyang was 0.013%, which was far lower than G. littoralis from Anguo (0.099%) and G. littoralis from Chifeng (0.105%). There were 15, 18 and 27 constituents identified in volatile oil of G. littoralis from 3 producing areas; the relative mass fractions were 89.29%, 96.76%, 94.53%. Falcarinol was a common compound with the highest relative mass fraction of the volatile oil of G. littoralis from different producing areas; the relative mass fractions were 69.79%, 90.89% and 71.04%, respectively. Fatty acids were rich in the sample from Laiyang, while C15H24 sesquiterpenoids were rich in the other samples from Anguo and Chifeng. CONCLUSIONS: Volatile oil of G. littoralis could be used as potential chemical markers to distinguish different producing areas due to their significant differences in chemical components.

      KEYWORDS ? Glehniae littoralis; Producing area; Volatile oil; Constituents; GC-MS; Falcarinol; Chemical marker

      北沙參為傘形科珊瑚菜屬植物珊瑚菜(Glehnia littoralis Fr. Schmidt ex Miq.)的干燥根,具有養(yǎng)陰清肺、益胃生津之功效,常用于治療肺熱燥咳、勞嗽痰血、胃陰不足、熱病津傷、咽干口渴等[1]。山東萊陽(yáng)是北沙參的傳統(tǒng)道地產(chǎn)區(qū),所產(chǎn)北沙參以“萊陽(yáng)沙參”“萊胡參”著稱,但其種植面積與產(chǎn)量卻逐年萎縮;另一方面,河北與內(nèi)蒙古的北沙參引種區(qū)域在不斷擴(kuò)大,加之價(jià)格便宜,已成為該品種的主流產(chǎn)區(qū)[2-3]。關(guān)于上述3個(gè)主產(chǎn)地所產(chǎn)北沙參的質(zhì)量是否存在差異,尚無(wú)相關(guān)研究?;瘜W(xué)成分是中藥發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ),不同產(chǎn)地北沙參藥材的化學(xué)成分是否存在差異、可用于區(qū)分不同產(chǎn)地以及可用于控制質(zhì)量的標(biāo)志性成分是什么,都是值得深入研究的課題。2015年版《中國(guó)藥典》(一部)中收錄的北沙參項(xiàng)僅有性狀和顯微鑒別項(xiàng),而未見(jiàn)化學(xué)成分相關(guān)檢查項(xiàng)。鑒于北沙參的化學(xué)及生物活性研究較少、化學(xué)標(biāo)志物不明確[4],筆者對(duì)3種主要產(chǎn)地的北沙參藥材的化學(xué)成分進(jìn)行了比較研究,以期為該藥材的采收加工、質(zhì)量評(píng)價(jià)、藥效物質(zhì)等研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)?,F(xiàn)將不同產(chǎn)地北沙參揮發(fā)油成分及相對(duì)含量分析結(jié)果報(bào)道如下。

      1 材料

      1.1 儀器

      Trace1300型氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)儀,含ISQ型單四極桿質(zhì)譜儀、Xcalibur化學(xué)工作站、NIST MS Search 2.0數(shù)據(jù)庫(kù)(美國(guó)Thermo Fisher Scientific公司);AL204-IC型電子天平[梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司];DK-98-ⅡA型電熱恒溫水浴鍋、101-2AB型電熱鼓風(fēng)干燥箱、98-Ⅰ-B型電子調(diào)溫電熱套(天津市泰斯特儀器有限公司);HGC-24A型氮吹儀(天津市恒奧科技發(fā)展有限公司)。

      1.2 藥材與試劑

      北沙參藥材均購(gòu)自青島善大天源飲片有限公司,分別產(chǎn)自山東萊陽(yáng)大夼鎮(zhèn)(批號(hào):20180306;產(chǎn)地加工方式:沸水燙后除去外皮)、河北安國(guó)常莊鄉(xiāng)(批號(hào):2018030;產(chǎn)地加工方式:沸水燙后除去外皮)和內(nèi)蒙古赤峰營(yíng)子鄉(xiāng)(批號(hào):20180308;產(chǎn)地加工方式:直接曬干)等3個(gè)產(chǎn)區(qū),分別簡(jiǎn)稱為“萊陽(yáng)北沙參”“安國(guó)北沙參”“赤峰北沙參”。藥材均于2018年3月在相應(yīng)產(chǎn)地采購(gòu),并經(jīng)中國(guó)海洋大學(xué)醫(yī)藥學(xué)院生藥學(xué)教研室劉紅兵教授鑒定為傘形科珊瑚菜屬植物珊瑚菜(G. littoralis Fr.Schmidt ex Miq.)的干燥根。標(biāo)本保存于中國(guó)海洋大學(xué)醫(yī)藥學(xué)院海洋中藥樣品庫(kù)。

      無(wú)水硫酸鈉、無(wú)水乙醚、正己烷等均為分析純;水為蒸餾水。

      2 方法與結(jié)果

      2.1 北沙參揮發(fā)油的提取

      參考文獻(xiàn)[5-6]采用水蒸氣蒸餾法進(jìn)行揮發(fā)油提取。取不同產(chǎn)地北沙參藥材粉碎,過(guò)二號(hào)篩后,精密稱取上述粉末100 g,置于1 000 mL圓底燒瓶中,加水450 mL;連接揮發(fā)油測(cè)定器與回流冷凝管,自冷凝管上端加水至充滿揮發(fā)油測(cè)定器的刻度部分并溢流入燒瓶時(shí)為止;將燒瓶置于電熱套中,緩緩加熱至沸,回流提取5 h。取含油的水層,以等體積無(wú)水乙醚萃取3次,合并乙醚層,以無(wú)水硫酸鈉脫水,氮?dú)獯蹈?,得淡黃色油狀物,稱定質(zhì)量并計(jì)算提取率。結(jié)果顯示,萊陽(yáng)、安國(guó)和赤峰所產(chǎn)北沙參的揮發(fā)油提取率分別為0.013%、0.099%和0.105%(以揮發(fā)油質(zhì)量占藥材干質(zhì)量的比例進(jìn)行計(jì)算)。

      2.2 供試品溶液的制備

      取“2.1”項(xiàng)下所得3個(gè)產(chǎn)地北沙參揮發(fā)油各30 μL,均以正己烷1 mL溶解制成供試品溶液,用于GC-MS分析。

      2.3 GC-MS檢測(cè)條件

      2.3.1 色譜條件 色譜柱:DB-5MS柱(30 m×0.25 mm,0.25 μm);升溫程序:初始溫度為50 ℃,以5 ℃/min升至240 ℃,保持25 min;進(jìn)樣口溫度:280 ℃;載氣:氦氣;流速:2.0 mL/min;進(jìn)樣量:1 μL;分流進(jìn)樣,分流比:1 ∶ 1。

      2.3.2 質(zhì)譜條件 離子源:電子轟擊離子源;離子源溫度:230 ℃;四極桿溫度:150 ℃;電離能:70 eV;質(zhì)量掃描范圍(m/z):29~600;溶劑延遲時(shí)間:4.9 min。

      2.4 數(shù)據(jù)處理及成分分析

      將“2.2”項(xiàng)下制備的供試品溶液按“2.3”項(xiàng)下條件進(jìn)樣測(cè)定,得總離子流圖(圖1)。采用Xcalibur工作站對(duì)所得GC-MS原始數(shù)據(jù)進(jìn)行校正,并采用IXCR軟件對(duì)色譜峰進(jìn)行對(duì)齊和解卷積處理。采用NIST 11.0質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行化合物檢索(設(shè)置匹配度>800),采用峰面積歸一化法求得各化學(xué)成分的相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù),結(jié)果見(jiàn)表1。

      由表1可見(jiàn),從萊陽(yáng)、安國(guó)、赤峰三地產(chǎn)北沙參揮發(fā)油中分別鑒定出了15、18、27種化合物,相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為89.29%、96.76%、94.53%。其中,鐮葉芹醇(又稱法卡林醇,F(xiàn)alcarinol)是不同產(chǎn)地北沙參揮發(fā)油相對(duì)含量最高的共有化合物(相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為69.79%、90.89%、71.04%)。除鐮葉芹醇外,萊陽(yáng)北沙參揮發(fā)油中相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)超過(guò)1%的其他成分有4個(gè),主要為脂肪酸類,分別為2,6-二叔丁基對(duì)甲酚、棕櫚酸、亞油酸、17-十八炔酸,其中只有棕櫚酸的相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)超過(guò)5%;安國(guó)北沙參揮發(fā)油中相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)超過(guò)1%的其他成分只有1個(gè),即γ-欖香烯(1.62%),屬于倍半萜類;赤峰北沙參揮發(fā)油中相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)超過(guò)1%的其他成分有7個(gè),主要為倍半萜類,分別為雪松烯、(+)-花側(cè)柏烯、2,6-二叔丁基對(duì)甲酚、(+)-α-長(zhǎng)葉蒎烯、γ-欖香烯、棕櫚酸乙酯、亞油酸乙酯,其中只有γ-欖香烯相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)超過(guò)5%。

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