展幫樂 阮建波 朱和玲

摘要：目的? 了解生殖器皰疹（GH）高危人群兩種血清學檢測方法的陽性率。方法? 收集暨南大學附屬東莞醫(yī)院2018年1月～5月427例GH高危人群采用酶聯(lián)免疫法，2018年7月～11月528例GH高危人群采用化學發(fā)光免疫法，比較兩種檢測方法檢測單純皰疹病毒（HSV）IgM陽性結(jié)果。結(jié)果? 化學發(fā)光免疫法檢測的528例GH高危人群中HSV IgM陽性94例，陽性率17.80%，其中1型IgM陽性42例，陽性率7.95%，2型IgM陽性52例，陽性率9.85%;酶聯(lián)免疫方法檢測的427例GH高危人群中HSV IgM陽性24例，陽性率5.62%，其中1型IgM陽性12例，陽性率2.81%，2型IgM陽性12例，陽性率2.81%。化學發(fā)光免疫法陽性率檢測高于酶聯(lián)免疫法，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結(jié)論? 化學發(fā)光免疫法檢測高危GH人群HSV IgM的陽性率高于酶聯(lián)免疫法，且操作簡單，檢測時間周期短。

關鍵詞：生殖器皰疹;單純皰疹病毒;化學發(fā)光免疫法;酶聯(lián)免疫法

Abstract：Objective? To understand the positive rates of two serological tests for high-risk population of genital herpes（GH）.Methods? Collecting Dongguan Hospital Affiliated to Jinan University from January to May 2018， 427 high-risk population of GH were enrolled in enzyme-linked immunosorbent assay. 528 high-risk population of GH from July to November 2018 were chemiluminescence immunoassay. Two methods were used to detect IgM positive result of herpes simplex virus （HSV）. Results? 528? high-risk population of GH cases were detected by chemiluminescence immunoassay， with 94 cases of HSV IgM， the positive rate was 17.80%， including 42 cases of type I IgM positive， the positive rate was 7.95%; 52 cases of type 2 IgM positive， the positive rate was 9.85%; 427 high-risk population of GH cases were detected by enzyme-linked immunosorbent assay methods， with 24 cases of herpes simplex IgM， the positive rate was 5.62%， including 12 cases of type I IgM positive， the positive rate was 2.81%; 12 cases of type 2 IgM positive， the positive rate was 2.81%. The positive rate of chemiluminescence immunoassay was higher than that of enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）， the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion? The positive rate of herpes simplex virus IgM in high-risk genital herpes is higher than that of enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）， and the operation is simple and the results are rapid.

Key words：Genital herpes;Herpes simplex virus;Chemiluminescence immunoassay;Enzyme-linked immunosorbent assay

單純皰疹病毒（herpes simplex virus，HSV）在皮膚黏膜的角質(zhì)形成細胞內(nèi)復制，并蔓延到周圍的細胞中，感染細胞周圍出現(xiàn)多形核細胞和淋巴細胞浸潤，從而引起表皮局灶性炎癥和壞死，出現(xiàn)原發(fā)感染的癥狀。生殖器皰疹（genital herpes，GH）是臨床上常見的一種慢性病程較長而又無法根治的性傳播疾病，超過80%的原發(fā)性GH會反復發(fā)作，其與免疫功能密切相關，當機體受到創(chuàng)傷、情緒緊張、病毒感染及抵抗力下降時，潛伏病毒易被激活。近40%～60%的早期感染HSV患者無臨床癥狀或癥狀不顯著，隱性患者及無癥狀者是該病的主要傳染源，及時發(fā)現(xiàn)并且采取措施是預防該病傳播和及時治療的關鍵環(huán)節(jié)[1]。臨床上常采用血清學檢測進行診斷或篩查。目前國內(nèi)有多種HSV抗體檢測試劑盒，暨南大學附屬東莞醫(yī)院2018年1～5月采用酶聯(lián)免疫法檢測，7～11月改用化學發(fā)光免疫法檢測，現(xiàn)將兩種檢測方法結(jié)果進行統(tǒng)計分析，結(jié)果報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料? 選取2018年1月～5月、7月～11月暨南大學附屬東莞醫(yī)院門診GH高危人群（近1個月有不潔性交史;父母有外GH感染史，患兒外生殖器有皮損）955例為研究對象，其中1月～5月427例，7月～11月528例，年齡9個月～71歲，平均年齡（33.85±9.93）歲。2018年5月之前，該院檢驗科一直采用酶聯(lián)免疫法檢測HSV，2018年7月之后改用化學發(fā)光免疫法檢測。

1.2儀器與試劑? 采用的檢測儀器為深圳愛康URANUSAE120全自動酶免儀，HSV IgM檢測采用愛爾蘭Trinity公司HSV-1 IgM、HSV-2 IgM檢測試劑盒;化學發(fā)光免疫法檢測儀器為深圳亞輝龍生物科技iFlash 3000化學發(fā)光測定儀及配套HSV IgM檢測試劑盒。

1.3方法

1.3.1標本采集? 采集研究對象空腹靜脈血3～5 ml，3000 r/min，離心10 min，分離后血清樣本放于2～8℃環(huán)境下貯存，在48 h內(nèi)檢測。

1.3.2 HSV抗體測定? 實驗操作完全按試劑說明書和儀器操作規(guī)程進行。酶聯(lián)免疫法檢測時間2 h，化學發(fā)光免疫法40 min。

1.4觀察指標? 比較兩種方法檢測HSV-1 IgM、HSV-2 IgM、HSV IgM的陽性率。化學發(fā)光免疫法HSV-1 IgM或HSV-2 IgM值>0.9 COI為陽性。

1.5統(tǒng)計學處理? 采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料采用（n，%）表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

化學發(fā)光免疫法檢測HSV-1 IgM、HSV-2 IgM、HSV IgM的陽性率均高于酶聯(lián)免疫方法，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表1。

3討論

GH是一種慢性、反復發(fā)作、病程較長而又無法根治的生殖器部位病毒感染疾病，其復發(fā)與患者的免疫功能有關[1，2]。引起GH的HSV包括HSV-1和HSV-2兩種血清型。HSV-1主要感染眼、口、唇等腰以上的皮膚和黏膜以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)，偶見于外生殖器;HSV-2主要引起生殖器和腰以下的皮膚、黏膜以及新生兒感染，并與女性外陰癌和宮頸癌的發(fā)生相關。HSV感染若發(fā)生在懷孕和分娩過程中，可能會造成胎兒多器官系統(tǒng)性感染和皰疹腦炎，繼而導致流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎、畸形等[3]。

臨床大多數(shù)GH患者癥狀不典型，需要通過實驗室檢測確診，并根據(jù)病毒學或血清學檢測結(jié)果為性傳播疾病患者或高危患者制定治療方案。病毒學檢測包括細胞學、抗原檢測和細胞培養(yǎng)。細胞涂片敏感性和特異性均低，PCR抗原檢測敏感性高但收費高，細胞培養(yǎng)特異性強但敏感性低，由于感染患者排毒為間歇性[4]，培養(yǎng)或PCR檢測陰性并不一定代表不再存在感染，故臨床上不做首選。2017年版中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準正式將血清抗體檢測納入GH診斷標準。IgM是初次體液免疫應答中最早出現(xiàn)的抗體，感染HSV后3～5 d可在血清中檢測到特異性IgM抗體，它是HSV初次感染的確診標志。血清樣本中，IgM陽性提示近期感染，對于防止性伴侶間和母嬰間HSV傳播有著重要意義[3]。

酶聯(lián)免疫法和化學發(fā)光免疫法是臨床常用的抗體免疫學檢測技術。酶聯(lián)免疫法是一種結(jié)合抗原抗體反應的特異性和酶高效催化反應的專一性的免疫技術;化學發(fā)光免疫法包括化學反應系統(tǒng)和免疫反應系統(tǒng)，即在抗原-抗體特異性反應過程中，伴隨化學反應過程而產(chǎn)生光的反射現(xiàn)象?；瘜W發(fā)光系統(tǒng)是利用在化學反應中釋放大量自由能產(chǎn)生激發(fā)態(tài)中間體，當其回到穩(wěn)定的基態(tài)時，同時也發(fā)射出光子，利用發(fā)光信號測量儀對所發(fā)出的光量子進行定量測定。酶聯(lián)免疫法價格較化學發(fā)光免疫法低，但多為定性結(jié)果，時間需2 h，且廠家不同，其試劑靈敏度也不同?；瘜W發(fā)光免疫法試劑與儀器配套，避免因不同廠家試劑操作不同和靈敏度差異產(chǎn)生誤差，精確度高，不僅能定性分析，還可定量分析，檢測時間周期短，僅40 min。

本次研究兩種檢測來自不同人群，但樣本均來自同一醫(yī)院，收集時間超過5個月，且樣本數(shù)量足夠，對兩種檢測結(jié)果統(tǒng)計分析影響較小。本研究結(jié)果顯示：化學發(fā)光免疫法HSV-1 IgM陽性檢測率（7.95%）、HSV-2 IgM陽性檢測率（9.84%）和總HSV IgM陽性檢測率（17.80%），與何衛(wèi)東等[5]報道的結(jié)果相近;且高于酶聯(lián)免疫法HSV-1 IgM陽性檢測率（2.81%）、HSV-2 IgM陽性檢測率（2.81%）和總HSV IgM陽性檢測率（5.62%），差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

綜上所述，GH高危人群HSV血清學檢測化學發(fā)光免疫法陽性率高于酶聯(lián)免疫法，且操作簡單，檢測時間周期短。

參考文獻：

[1]樊建勇，趙陽，楊慧蘭.單純皰疹病毒的生物學特點及其潛伏復發(fā)機制研究進展[J].皮膚性病診療學雜志，2015，22（1）：82-85.

[2]鐘道清，周天恩.肥大細胞在HSV-2感染所致生殖器皰疹中的作用[J].皮膚性病診療學雜志，2018，25（3）：128-131.

[3]柯吳堅，楊斌.2015年美國CDC生殖器皰疹治療指南解讀[J].中國皮膚性病學雜志，2016，30（5）：530-533.

[4]鄒先彪.《2014英國生殖器皰疹指南》解讀[J].中國臨床醫(yī)生雜志，2016，44（1）：14-15.

[5]何衛(wèi)東，劉明春，陳秋月，等.化學發(fā)光法檢測育齡婦女單純皰疹病毒結(jié)果分析[J].中國衛(wèi)生標準管理，2018，9（16）：117-119.

收稿日期：2019-3-26;修回日期：2019-4-18

編輯/楊倩