劉倩倩

【摘 要】目的：探討IL-17、IL-6在紫癜性腎炎（Henoch Schonlein Purpura Nephritis，HSPN）患兒腎活檢組織的表達(dá)，以期為診治HSPN找到新的治療靶點(diǎn)提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。方法：將研究對象分為HSPN組和對照組，HSPN組為初診初發(fā)，未經(jīng)激素及免疫抑制劑治療的紫癜性腎炎患兒30例，行腎活檢術(shù)，取其腎活檢組織;對照組即死于車禍患兒的尸腎組織5例（腎功能及尿常規(guī)正常）。采用免疫組織化學(xué)染色SP法分別檢測IL-17和IL-6在HSPN組及對照組腎組織中的表達(dá)。結(jié)果：HSPN組患兒腎組織中IL-17、IL-6表達(dá)水平高于正常對照組，差異有顯著性意義（P<0.05），提示IL-17、IL-6參與了腎臟的損害。結(jié)論：IL-17、IL-6可能參與HSPN的發(fā)生，為診治HSPN找到新的治療靶點(diǎn)提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 IL-17;IL-6;紫癜性腎炎

【中國分類號】R277.5 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B【文章編號】1002-8714（2019）12-0105-02

過敏性紫癜（Henoch-Schonlein Purpura，HSP）是以毛細(xì)血管炎為主要病理改變的系統(tǒng)性的血管炎;臨床表現(xiàn)為血小板不減少性皮膚紫癜，常伴腹痛、便血、關(guān)節(jié)痛、血尿和蛋白尿[1];如累及到腎臟出現(xiàn)血尿和蛋白尿，伴/不伴水腫、高血壓，稱之為紫癜性腎炎（Henoch-Schonlein Purpura Nephritis，HSPN）。HSPN是兒科常見的繼發(fā)性腎小球疾病之一。紫癜性腎炎的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，，2005年發(fā)現(xiàn)的Th17細(xì)胞及其相關(guān)特異性細(xì)胞因子IL-17、IL-6在免疫性疾病中的作用成為研究熱點(diǎn)。IL-6、IL-17是重要的促炎細(xì)胞因子，本文旨在 IL-17、IL-6可能參與HSPN的發(fā)生，為診治HSPN找到新的治療靶點(diǎn)提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

1 材料與方法

1.1.入選對象

將研究對象分為HSPN組和對照組。隨機(jī)收集2012年11月-2013年6月在貴陽市兒童醫(yī)院腎臟病房住院診斷為HSPN患兒30例，即為HSPN組，其中男19例，女11例，男女之比為1.7∶1，發(fā)病年齡4-14歲，平均年齡7.8±2.4歲。該組患兒初診初發(fā)，未經(jīng)激素及免疫抑制劑治療，此組均符合諸福棠（實(shí)用兒科學(xué)）第七版HSP的診斷標(biāo)準(zhǔn)及中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會腎臟病學(xué)組2009年制定的HSPN的診斷標(biāo)準(zhǔn)。正常對照組即死于車禍患兒的尸腎組織5例（腎功能及尿常規(guī)正常）。

1.2研究方法

1.2.1臨床資料 收集HSPN組患兒的性別、年齡、臨床分型、尿常規(guī)、血肌酐、尿素氮、24小時尿蛋白定量和腎活檢病理組織等資料。免疫組化SP法分別檢測HSPN組患兒腎活檢組織和對照組腎組織中IL-17、IL-6的表達(dá)。（IL-17兔抗人多克隆抗體、IL-6兔抗人多克隆抗體、SP法免疫組化試劑盒均購買自北京博奧森。）

1.2.2計(jì)算機(jī)圖像分析 在高倍（X400倍）鏡下應(yīng)用彩色病理圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行檢測。腎小球細(xì)胞胞質(zhì)、系膜基質(zhì)及腎小管上皮細(xì)胞胞質(zhì)呈棕黃色或棕褐色顆粒為陽性，不著色為陰性，胞核呈紫藍(lán)色。每張切片隨機(jī)抽取5個高倍鏡下的視野，分別評定腎小球、腎小管的陽性程度。腎小球或腎小管陽性程度評定：所有腎小球區(qū)域均無陽性染色定為（-），局灶分布的染色區(qū)域<腎小球總面積的50%定為（+），彌漫性分布的染色區(qū)域>腎小球總面積的50%定為（++） ;腎小管陽性程度評定：所有腎小管區(qū)域均無陽性染色定為（-），局灶分布的染色區(qū)域<腎小管總面積的50%定為（+），彌漫性分布的染色區(qū)域>腎小管總面積的50%定為（++） 。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本數(shù)據(jù)分析采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行。兩組間陽性率比較用x2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1免疫組化檢測患兒腎組織IL-17蛋白表達(dá)：光鏡下（400倍）示，HSPN組腎組織圖陽性，IL-17蛋白可表達(dá)在腎小球、腎小管細(xì)胞的胞漿。HSPN組患兒腎組織中IL-17蛋白表達(dá)水平高于正常對照組，差異有顯著性意義（P<0.05）。

2.2免疫組化檢測患兒腎組織IL-6蛋白表達(dá)：光鏡下（400倍）示，HSPN組腎組織圖陽性，IL-6蛋白可表達(dá)在腎小球、腎小管細(xì)胞的胞漿。HSPN組患兒腎組織中IL-6蛋白表達(dá)水平高于正常對照組，差異有顯著性意義（P<0.05）。

近年來研究顯示HSP/HSPN存在明顯的T細(xì)胞亞群紊亂及細(xì)胞因子的異常，本研究應(yīng)用免疫組化方法探討新近發(fā)現(xiàn)Th17細(xì)胞的相關(guān)炎癥細(xì)胞因子IL-17、IL-6在HSPN腎組織的表達(dá)，以期為診治HSPN找到新的治療靶點(diǎn)提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

Th17細(xì)胞是一種CD4+T 細(xì)胞亞群，是在IL-6和TGF-β存在的時候由初始T細(xì)胞分化而來，IL-23促進(jìn)其增殖。Th17細(xì)胞是一種重要的促炎細(xì)胞，主要通過其分泌IL一17A（通常說的IL-17就是指IL一17A）、IL-17F、IL-6、IL-21、IL-22、TNF-α等細(xì)胞因子發(fā)揮作用，其中IL-17是重要的促炎細(xì)胞因子，可以誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及上皮細(xì)胞產(chǎn)生多種細(xì)胞因子和趨化因子，通過放大一系列的反應(yīng)鏈而引起血管炎癥反應(yīng)，參與機(jī)體免疫性疾病[2]的發(fā)生。紫癜性腎炎是免疫性疾病之一，本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，HSPN組患兒腎組織IL-17表達(dá)水平明顯升高，與正常腎組織比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，進(jìn)一步提示IL-17參與了HSPN的發(fā)生及進(jìn)展。

IL-6是是一種多功能的細(xì)胞因子，由活化的T細(xì)胞、B 細(xì)胞、單核-巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、腎小球系膜細(xì)胞等產(chǎn)生的前炎癥細(xì)胞因子，可以作為內(nèi)源性的致熱源，參與炎癥反應(yīng);促進(jìn)B細(xì)胞分化和分泌抗體[3];促進(jìn)T細(xì)胞的活化;在多種細(xì)胞因子的協(xié)同作用下，可以刺激腎小球系膜組織的增生，導(dǎo)致腎小球纖維化，所以IL-6也是與腎小球疾病關(guān)系最為密切的炎性細(xì)胞因子。本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步顯示，HSPN組患兒腎組織IL-6表達(dá)水平明顯升高，與正常腎組織比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，也提示IL-6參與了過敏性紫癜患兒的腎損傷的發(fā)生。

在這錯綜復(fù)雜的細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)中找出啟動因子，斷IL-17、IL-6信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，可能會減少HSPN的發(fā)生，因此，有望將IL-17、IL-6作為新的治療靶點(diǎn)，為HSPN患兒提供合理有效治療方案。

參考文獻(xiàn)

[1] 沈曉明，王衛(wèi)平，常立文等.兒科學(xué)[M].第7版.北京：人民衛(wèi)生出版社2008：182-184.

[2] Oseko F，Yamamoto T，Akamatsu Y，eta1.IL-17? is involved in bone resorption in mouse periapical lesions.Microbiol Immunol，2009，53（5）：287-294.

[3] 范秋霞 ，王春美 ，盛光耀。Thl7細(xì)胞和白細(xì)胞介素-17在兒童過敏性紫癜發(fā)病中作用[J].

中華實(shí)用診斷與治療雜志，2010，24（1）：1089-1090。