HPLC法測定油類香精（桂子油）桂皮醛的含量

張偉　陳雪梅　馮彥勇　楊玉娟　肖偉　匡鳳軍　匡鳳姣 劉鈺 徐凱

摘 要：目的：建立HPLC法測定油類香精（桂子油）中桂皮醛的含量的方法。方法：采用HPLC法，乙腈-水（45∶55）為流動相，C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）;流速：1 mL/min;檢測波長：290 nm。結(jié)果：桂皮醛在49.81～2490.50μg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系（r=0.999656），平均回收率為99.27%，RSD=0.44%（n=9）。結(jié)論：該方法簡便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于油類質(zhì)量控制，填補了油類香精桂皮醛的含量測定方法的空白。

關(guān)鍵詞：HPLC;桂子油;桂皮醛;含量測定

桂子油香精由植物油和食品用香精組成，具有桂子香氣，是大眾喜歡的味道?，F(xiàn)在在食品生產(chǎn)領(lǐng)域具有非常廣泛的運用。目前國家、行業(yè)或地方檢驗標(biāo)準(zhǔn)中沒有油類香精桂皮醛的含量測定方法，文獻中也沒有收錄其標(biāo)準(zhǔn)檢測方法及檢測限，且食品用香精提取用原料[1]、提取的工藝和香精廠添加量存在一定的差異，這樣就導(dǎo)致桂子油中桂皮醛的含量差別較大。因此為了更好的控制食品的口感，控制桂子油香精中桂皮醛的含量是十分重要的，該方法填補了油類香精桂皮醛的含量測定方法的空白。

1 儀器與試劑

儀器：島津20A高效液相色譜儀;紫外檢測器;島津色譜柱Wondasil C18-WR（4.6 mm×250 mm，5 μm）、Thermo色譜柱ODS-2 HYPERSIL（4.6 mm×250 mm，5 μm）、Waters

色譜柱SPHERISORB 5um ODS1。試劑：甲醇為色譜純（默克公司），乙腈為色譜純（默克公司），其余溶劑為分析純。

對照品：桂皮醛對照品，由中國食品藥品檢定研究院提供（含量測定用，批號110710-201821，含量以99.6%計）。

樣品分別由長沙曼尼食品科技有限公司、廣州市凱虹香料有限公司、長沙大河香業(yè)有限公司提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

精密稱定桂皮醛標(biāo)準(zhǔn)品適量，置棕色量瓶中，加甲醇制成50μg/mL的溶液。

2.2 供試溶液的制備

稱取樣品100mg，精密稱定，置50mL棕色容量瓶[3]中，加入甲醇25mL，置超聲波中，超聲處理（功率250 W，頻率33 kHz，）10 min，放冷，用甲醇定容到刻度，搖勻，作為供試溶液。標(biāo)準(zhǔn)溶液進樣量10 μL，供試溶液進樣量10 μL，進行測定。

2.3 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗

色譜柱：Thermo色譜柱ODS-2 HYP

ERSIL（4.6 mm×250 mm，5 μm）。

2.4 波長選擇

參考中國藥典（一部）2015版肉桂的含量測定[2]，故選擇290nm為檢測波長。

柱溫：室溫;流速：1.0 mL/min。

流動相：乙腈-水（45∶55）。

方法學(xué)考察測定樣品選用長沙曼尼食品科技有限公司的產(chǎn)品（20180906批）。

2.5 提取時間的考察

供試品制備采用超聲處理方法，分別采用超聲提取[3]10、20、30 min進行考察，結(jié)果表明超聲提取10 min時已提取完全，且節(jié)能省時（見表1）。

表1 提取時間考察數(shù)據(jù)一覽表

提取時間（min） 10 20 30

含量（μg/mg） 371.2 373.1 372.4

2.6 專屬性實驗

取植物油（非轉(zhuǎn)基因），按本品制法及供試品溶液的制備方法制成陰性對照溶液，按照上述方法進行測定，結(jié)果陰性樣品無干擾，方法可行

（見圖1）。

2.7 精密度考察

吸取桂皮醛標(biāo)準(zhǔn)溶液（249.05μg/mL），重復(fù)進樣6次，測定結(jié)果見表2。結(jié)果表明該方法精密度良好。

2.8 線性范圍的考察

分別精密吸取桂皮醛對照品溶液（49.81μg/mL），進樣量分別為1、5、10、15、20μL及50μL，測定其峰面積，以峰面積為縱坐標(biāo)，桂皮醛濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，測得回歸方程為：Y=0.000114146X+5.44921，r=0.999656，結(jié)果見表3。結(jié)果表明在49.81～2490.50μg/mL范圍內(nèi)，桂皮醛的吸收峰面積與桂皮醛濃度有良好的線性關(guān)系。

2.9 穩(wěn)定性實驗

稱取同一批次的桂子油（批號：20180906）的供試溶液，每間隔一定時間進樣一次，桂皮醛含量測定結(jié)果見表4。結(jié)果表明供試溶液在24h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.10 重復(fù)性試驗

取同批樣品桂子油（批號20180

906，長沙曼尼食品科技有限公司），依法平行測定6份，分別計算桂皮醛的含量，結(jié)果見表5。結(jié)果表明該方法的重復(fù)性良好。

2.11 準(zhǔn)確度試驗

取桂子油（批號20180906，長沙曼尼食品科技有限公司）樣品約100mg，精密稱定，分別精密加入標(biāo)準(zhǔn)品適量，按上述方法制備、測定供試品溶液，結(jié)果見表6。結(jié)果表明該方法回收率高、準(zhǔn)確度好。

2.12 耐用性實驗

分別更換不同試劑。改用默克公司的乙腈、迪馬科技公司的乙腈進行實驗;不同色譜柱：Thermo 色譜柱ODS-2 HYPERSIL（4.6 mm×250 mm，5 μm）、島津色譜柱Wondas-ilC18-WR（4.6 mm×250 mm，5 μm）、Waters色譜柱SPHERISORB 5um ODS1。都達(dá)到了分離度大于2的分離效果。

2.13 樣品測定

按本文中的含量測定方法，分別對9批樣品進行測定[4]，結(jié)果見表7。測定結(jié)果表明，不同生產(chǎn)企業(yè)以及同企業(yè)不同批次間產(chǎn)品間的桂皮醛含量差異較大，可能與原料質(zhì)量、提取工藝、廠家生產(chǎn)工藝以及貯藏條件等因素有關(guān)，故很有必要控制其質(zhì)量，以保證食品的口感穩(wěn)定。

3 討論

目前國家、行業(yè)或地方的檢驗標(biāo)準(zhǔn)中沒有油類香精桂皮醛的含量測定方法，文獻中也沒有收錄其標(biāo)準(zhǔn)檢測方法，在檢測過程中發(fā)現(xiàn)，同一廠家和每個廠家的桂子油香精中桂皮醛的含量差別較大，所以開發(fā)測定桂子油香精中的桂皮醛的含量測定方法具有重要意義。該方法填補了油類香精桂皮醛的含量測定方法的空白，且、簡便、快捷，具有準(zhǔn)確度高、精密度好、重現(xiàn)性好等特點，且分離度良好，陰性無干擾，通過此檢測方法能客觀地控制和評價桂子油香精中桂皮醛的含量，也能準(zhǔn)確檢測出食品中的桂皮醛添加量。因桂皮醛遇光不穩(wěn)定，因此實驗操作應(yīng)盡可能避光，確保測定過程不受環(huán)境因素的影響。

參考文獻

[1]羅晉萍，張中蘇，田晨，等.高效液相色譜法測定桂枝中桂皮醛的含量[J].中國中藥雜志，2000，25（9）：544.

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）2015版[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.

[3]羅晉萍，馮貞，田晨.HPLC法測定桂龍咳喘寧片中桂皮醛的含量[J].中藥雜志，2018，19（3）：30-35.

[4]馬蓉蓉，唐意紅，孫兆林，等.RP-HPLC測定不同產(chǎn)地肉桂中桂皮醛和肉桂酸的含量[J].中國現(xiàn)代中藥，2008，10（4）：9.