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      LAMP法與PCR法快速檢測B族鏈球菌的應(yīng)用分析

      2019-10-29 14:46:08河南省鶴壁市人民醫(yī)院458030黃捷
      首都食品與醫(yī)藥 2019年21期
      關(guān)鍵詞:鏈球菌靈敏度特異性

      河南省鶴壁市人民醫(yī)院(458030)黃捷

      B族鏈球菌(GBS)是一種革蘭氏陽性鏈球菌,能夠定植于孕產(chǎn)婦腸道和陰道。母體圍生期GBS定植是新生兒早發(fā)型GBS感染的主要危險(xiǎn)因素[1]。數(shù)據(jù)資料顯示,攜帶GBS的孕婦,超過40%會在生產(chǎn)過程中感染新生兒,部分會出現(xiàn)早期侵入性感染,引起新生兒肺炎、腦膜炎、敗血癥等,危及患兒生命[2]。對孕晚期婦女進(jìn)行GBS篩查,對陽性患者采取預(yù)防措施,可以減少新生兒感染情況的發(fā)生。我院對比研究了LAMP法與PCR法快速檢測B族鏈球菌的應(yīng)用價(jià)值。現(xiàn)報(bào)導(dǎo)如下。

      1 資料與方法

      1.1 一般資料 收集2016年2月~2018年10月來我院進(jìn)行孕檢并分娩的孕晚期婦女1188例的臨床資料。孕婦年齡為22~39歲,平均年齡(28.57±4.11)歲;孕周為35~40周,平均孕周(37.14±0.58)周。

      1.2 方法 取樣:由婦產(chǎn)科醫(yī)生完成。將無菌拭子插入孕婦陰道口1/3處,旋轉(zhuǎn)1周,采取分泌物;每名孕婦同時(shí)取兩份樣本,分別進(jìn)行檢測。試驗(yàn)試劑:GBS核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)購自泰普生物科學(xué)(中國)有限公司;LAMP法試劑盒購自法國生物梅里埃公司。標(biāo)準(zhǔn)菌株:購自衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心。Taq-DNA聚合酶、DNA marker:購自大連寶生物工程公司。質(zhì)譜檢測:送第三方實(shí)驗(yàn)室檢測。

      1.3 觀察指標(biāo) 觀察檢測情況、兩種方法檢測情況和確認(rèn)情況,計(jì)算靈敏度和特異性。

      椎間盤部分脫出患者表現(xiàn):椎間盤椎體后緣表現(xiàn)為中央弧形突出;黃韌帶肥厚合并鈣化患者表現(xiàn):韌帶厚度在5.8~9.5mm以內(nèi),超過健康者,且均伴隨有鈣化現(xiàn)象;椎間孔狹窄患者表現(xiàn):存在椎小關(guān)節(jié)增生,由于不斷壓迫,導(dǎo)致椎間孔狹窄,其中,3例患者伴隨韌帶肥厚,在6.5~8.5mm以內(nèi);硬膜囊受損患者表現(xiàn):硬膜囊脂肪層受到擠壓存在變形,具有不對稱或消失情況,并且,神經(jīng)根也被推壓移位;側(cè)隱窩狹窄患者表現(xiàn):側(cè)隱窩小于健康者,在2.3~3.0mm以內(nèi)。

      第Ⅲ類的3家研究機(jī)構(gòu)中,遼寧省標(biāo)準(zhǔn)化研究院作為網(wǎng)站主辦方建立了“遼寧省標(biāo)準(zhǔn)信息公共服務(wù)平臺”,但網(wǎng)站功能較為簡單,尚不能稱之為門戶網(wǎng)站,而貴州省標(biāo)準(zhǔn)化研究院和西藏自治區(qū)標(biāo)準(zhǔn)化研究所均難以在搜索引擎中找到相應(yīng)網(wǎng)站。門戶網(wǎng)站及功能的缺失,直接影響了這3家標(biāo)準(zhǔn)化研究機(jī)構(gòu)的品牌關(guān)注度。

      1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 本次研究使用SPSS17.0處理數(shù)據(jù),計(jì)數(shù)資料用百分率(%)表示,組間比較采取χ2檢驗(yàn),P<0.05表示差異顯著。

      2 結(jié)果

      GBS是圍生期新生兒和孕產(chǎn)婦最為常見的感染致病菌,孕婦在妊娠期感染GBS,會使得新生兒增加感染的風(fēng)險(xiǎn),威脅著新生兒的健康成長[3]。采取有效的措施,預(yù)防和降低新生兒圍生期感染,具有重要意義。一般情況下,可以通過靈敏度和特異度對檢測方法的可用性進(jìn)行評價(jià),選擇更為合適的檢測方法。本文研究結(jié)果顯示,本研究1188例樣本中,GBS確認(rèn)94例,陽性率為7.91%。兩種方法陽性率對比,差異不顯著;LAMP法檢測靈敏度為100.00%,高于PCR法的80.91%,差異明顯,LAMP法檢測特異性為99.81%,和PCR法檢測特異性的99.09%對比,差異不顯著。說明LAMP法檢測在靈敏度方面更有優(yōu)勢。

      2.2 兩種方法檢測情況和確認(rèn)情況對比 LAMP法檢測陽性96例,陽性率為8.08%;PCR法檢測陽性86例,陽性率為7.24%;兩種方法陽性率對比,差異不顯著(P>0.05);LAMP法檢測靈敏度為100.00%,高于PCR法的80.91%,差異顯著(P<0.05);LAMP法檢測特異性為99.81%,和PCR法檢測特異性的99.09%對比,差異不顯著(P>0.05)。詳見附表1、附表2。

      附表1 LAMP法檢測結(jié)果和確認(rèn)結(jié)果對比(n)

      附表2 PCR法檢測結(jié)果和確認(rèn)結(jié)果對比(n)

      3 討論

      2.1 檢測情況 1188例孕晚期婦女樣本中,經(jīng)兩種方法檢測均為陽性者76例,檢測結(jié)果不一致的樣本共30例,經(jīng)質(zhì)譜確認(rèn),9例為GBS。因此,本研究1188例樣本中,GBS確認(rèn)94例,陽性率為7.91%。

      霧和云的區(qū)別僅僅在于是否接觸地面[18],當(dāng)云接地時(shí)即為霧,而霧抬升后形成低云,因此也可以用云水混合比來描述霧。一般認(rèn)為[19-20]:近地面霧的云水混合比范圍為0.05~0.5 g/kg,本文取0.05 g/kg作為霧區(qū)臨界值來描述此次平流霧的生消過程。

      LAMP法的特點(diǎn)是具有較高的特異性,不需要特殊的儀器,方法簡便,容易被推廣[4]。而且LAMP法檢測在2h內(nèi)就可以完成,符合快速檢測理念。此外,臨床在檢測過程中,為了避免核酸擴(kuò)增,需要對提取到的DNA模板進(jìn)行核酸純化,從而提高檢測準(zhǔn)確性。

      總之,和PCR法對比,LAMP法快速檢測B族鏈球菌具有更高的靈敏度,可以作為B族鏈球菌的首選檢測方法。

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