免疫組化檢查在病理診斷中的應(yīng)用及其作用分析

李俏然

【摘 要】 目的：研究免疫組化檢查在病理診斷中的效果和作用。方法：將我院2018年2月至2019年2月期間收治的76例乳腺腫瘤患者納入研究，分別采用穿刺活檢和免疫組化檢查，對比兩種檢測的陽性率。結(jié)果：免疫組化檢查的陽性率（96.05%）高于穿刺活檢（75.00%），組間差異顯著（P<0.05）存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：免疫組化檢查在病理診斷中的效果顯著，能夠提升檢驗(yàn)的檢出陽性率，值得在臨床上予以推廣使用。

【關(guān)鍵詞】 免疫組化檢查;病理診斷中;作用

【中圖分類號】R248.3

【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

【文章編號】1005-0019（2019）18-245-01

免疫組化（immunocytochemistry）是使用免疫基本原理，以化學(xué)反應(yīng)顯示和確定組織細(xì)胞，以此進(jìn)行定位和定性分析[1]。腫瘤患者早期的癥狀往往易受到患者及其家屬的忽視，患者往往在確診后疾病已經(jīng)處于中晚期，錯(cuò)失最佳的治療階段[2]。采用早期干預(yù)治療是疾病治療的重要方式，這就需要臨床上進(jìn)行第一時(shí)間的確診，臨床上往往采用病理學(xué)診斷，但是疾病的創(chuàng)傷性較大，直接影響患者的檢驗(yàn)依從性。本研究為了分析免疫組化檢查在病理診斷中的應(yīng)用效果，納入76例患者進(jìn)行具體分析。

1 資料和方法

1.1 一般資料

將我院收治的76例乳腺腫瘤患者進(jìn)行研究，研究時(shí)間：2018年2月至2019年2月，所有患者均進(jìn)行穿刺活檢和免疫組化檢查;患者的年齡在36歲至71歲，平均年齡為（48.56±5.55）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)[3]：（1）患者資料完整;（2）患者自檢乳房有腫塊，乳頭凹陷等癥狀后入院診治;（3）患者經(jīng)過臨床病理學(xué)和影像學(xué)診斷為乳腺腫瘤。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）依從性較差的患者;（2）沒有進(jìn)行穿刺活檢和免疫組化技術(shù)檢查的患者。

1.2 一般方法

76例患者均采用穿刺活檢和免疫組化檢查。試劑使用上海杰浩生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的Ultra V Block。免疫組化檢查的具體步驟如下：第一，將石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水。后緩沖進(jìn)行兩次沖洗，每次沖洗至少三分鐘。撈片時(shí)將片子盡量撈于整張的中下2/3處。第二，烤片，溫度在70攝氏度，時(shí)間為1小時(shí)-2小時(shí)，如果時(shí)間過短可能出現(xiàn)掉片。第三，二甲苯脫蠟2缸，每缸的時(shí)間為10分鐘。第四，無水乙醇（5分鐘）→90%乙醇（5分鐘）→75%乙醇（5分鐘）。第五，蒸餾水沖洗干凈，采用浸洗的方式，每缸為3分鐘，共3缸。第六，根據(jù)一抗的要求進(jìn)行修復(fù)[4]。第七，使用BPS沖洗，3缸，每缸的時(shí)間為3分鐘，采用浸洗的方式。第八，將切片放置在以下孵育環(huán)境：H2O2（濃度為3%）的溫室，孵育時(shí)間為5分鐘至15分鐘，進(jìn)而降低因源性過氧化物酶而導(dǎo)致的非特異性背景染色。處理紅細(xì)胞，浸泡時(shí)間為10分鐘。第九，使用BPS沖洗，3缸，每缸的時(shí)間為3分鐘，采用浸洗的方式。第十，加一抗。4攝氏度過夜（或者37攝氏度1小時(shí)）。第十一，使用BPS沖洗，3缸，每缸的時(shí)間為3分鐘，采用浸洗的方式。第十二，添加二抗，室溫為30分鐘。第十三，使用BPS沖洗，3缸，每缸的時(shí)間為3分鐘，采用浸洗的方式[5]。第十四，滴入1毫升（1-2滴）的DAB Plus Chromogen，混勻后將溶液滴在切片中。第十五，自來水沖洗。第十六，使用蘇木素沖洗干凈，分式提拉1-2次，沖洗干凈后返藍(lán)液體30s/min。第十七，使用自來水沖洗。第十八，使用75%乙醇（5分鐘）→90%乙醇（5分鐘）→無水乙醇（5分鐘）。

1.3 評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

對比兩組檢驗(yàn)者的陽性檢驗(yàn)率。陽性判定的標(biāo)準(zhǔn)：陽性細(xì)胞學(xué)特診包括：復(fù)合型、胞膜型、胞核型、胞質(zhì)型以及微絨毛形。將陽性免疫特征分為三級：弱（+）、中（++）和強(qiáng)（+++）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

76例乳腺腫瘤患者的臨床數(shù)據(jù)以統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS20.0進(jìn)行處理，計(jì)量資料采用（%）進(jìn)行表達(dá)，組間差異采用卡方檢驗(yàn)，P<0.05，組間對比存在顯著性差異，在統(tǒng)計(jì)學(xué)中存在意義。

2 結(jié)果

穿刺活檢檢驗(yàn)的陽性率（75.00%）低于免疫組化檢查陽性率（96.05%），穿刺活檢檢驗(yàn)的陰性率（25.00%）高于免疫組化檢查陰性率（3.95%）。組間差異對比存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，（P<0.05）。具體內(nèi)容見表1。本組免疫組化技術(shù)檢查中，25例為原發(fā)性乳腺腫瘤，均為弱陽性（+）;21例為其他的惡性腫瘤轉(zhuǎn)移到乳腺，31例為乳腺癌轉(zhuǎn)移到其他組織，中等陽性（++）35例，強(qiáng)陽性（+++）25例。

3 討論

病理診斷對治療方案的選擇起著關(guān)鍵作用，穿刺活檢是獲取病理診斷的主要途徑。病理技術(shù)人員是免疫組化實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵因素，要求技術(shù)人員有豐富的免疫組化的理論知識及熟練的免疫組化染色技術(shù)，并且每一個(gè)步驟的應(yīng)用原理，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。

免疫組化技術(shù)用標(biāo)記的特異性抗體對組織內(nèi)抗原的分布進(jìn)行組織和細(xì)胞原位檢測技術(shù)，具有臨床診斷優(yōu)勢，主要表現(xiàn)為其定位和定性，進(jìn)而通過抗原抗體進(jìn)行呈色反應(yīng)，觀察形態(tài)和功能，進(jìn)而對病理學(xué)診斷進(jìn)行定量分析。在免疫組化檢查中，以顯色劑標(biāo)記抗體顯色，對組織細(xì)胞內(nèi)抗原進(jìn)行明確?？梢詫δ[瘤疾病進(jìn)行及時(shí)的定位和分型，發(fā)現(xiàn)微小病灶。

綜上所述，結(jié)合本文數(shù)據(jù)顯示，采用免疫組化檢驗(yàn)的陽性率比穿刺活檢更高，由此說明：在臨床上免疫組化檢查在病理診斷中的效果顯著，可以更好的提升檢驗(yàn)者的陽性檢驗(yàn)率。

參考文獻(xiàn)

[1] 龐亞丹.對接受肝臟穿刺組織病理檢查患者的病理切片進(jìn)行免疫組化染色的效果探討[J].當(dāng)代醫(yī)藥論叢，2018，16（21）：176-177.

[2] 腎活檢病理規(guī)范化診斷共識專家組.腎活檢病理規(guī)范化診斷的專家共識[J].中華腎臟病雜志，2018，34（12）：941-946.

[3] 唐治蓉，龍瓊先，劉欣雅， 等.內(nèi)鏡粘膜活檢組織的病理診斷思路及陷阱[J].中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2019，23（1）：6-9.

[4] 熱米拉·阿不都克力木，葛春鳴.免疫組化檢查在病理診斷中的應(yīng)用及其意義[J].臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)電子雜志，2017，4（5）：909，912.

[5] 楊永峰.免疫球蛋白G4相關(guān)肝膽疾病的組織病理學(xué)特征和病理學(xué)診斷[J].中華肝臟病雜志，2018，26（6）：404-406.