李成偉
敗血癥是鯉魚(yú)最常見(jiàn)的疾病之一,常引起鯉魚(yú)大規(guī)模死亡造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。2019年7月,四川眉山洪雅某養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖鯉魚(yú)成魚(yú)發(fā)生急性敗血癥,發(fā)病初期鯉魚(yú)攝食明顯減少,無(wú)明顯外觀癥狀;3天后攝食進(jìn)一步減少,部分魚(yú)停食,且出現(xiàn)個(gè)別魚(yú)游邊,反應(yīng)遲鈍,打撈起后發(fā)現(xiàn)體表褪色,鰭條基部、腹部充血、出血,泄殖孔紅腫、外凸(圖1),鰓絲發(fā)白;剖解后有血樣腹水,肝胰臟、脾臟、腎臟淤血、出血、質(zhì)地變脆,膽囊腫大,腸壁及腸系膜充出血嚴(yán)重,腸內(nèi)黏液增多(圖2),魚(yú)類開(kāi)始出現(xiàn)個(gè)別死亡,隨著時(shí)間推移死亡數(shù)量上升,7天后死亡數(shù)量達(dá)到80~100尾/天(5畝大小池塘),采集患病典型鯉魚(yú)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室相關(guān)診斷。
通過(guò)采集血液制作血涂片,鰓絲、體表黏液、腸道黏液水浸片顯微鏡檢測(cè),均未發(fā)現(xiàn)寄生蟲(chóng)。
無(wú)菌環(huán)境接種病魚(yú)的腹水、肝胰臟、腎臟、脾臟,劃線到BHI平板,28℃培養(yǎng)24小時(shí),分離、純化后得到一株細(xì)菌(編號(hào)CW1908),其菌落形態(tài)為淡黃色、圓形凸起、半透明,革蘭氏染色后為陰性、無(wú)芽孢的短桿菌。按照細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒提取DNA作為PCR模板,采用16S rRNA細(xì)菌通用引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物純化后送生工生物工程(上海)有限公司進(jìn)行序列測(cè)定。將分離菌株的16S rRNA基因序列于GenBank中已知核酸序列進(jìn)行比對(duì)分析,結(jié)果顯示菌株CW1908與嗜水氣單胞菌同源性高達(dá)99%,初步判斷為嗜水氣單胞菌。
采用藥敏紙片法對(duì)分離菌株進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明:菌株CW1908對(duì)氟苯尼考、氟哌酸、丁胺卡那霉素敏感;對(duì)強(qiáng)力霉素、慶大霉素、多粘菌素B介于敏感和耐藥之間;對(duì)氨芐西林、青霉素、鏈霉素、新霉素、阿奇霉素、克拉霉素、多西四環(huán)素、恩諾沙星、諾氟沙星、氧氟沙星耐藥。
根據(jù)藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果,選取水產(chǎn)常用藥物氟苯尼考粉20mg/kg,加上Vk粉20mg/kg進(jìn)行拌料投喂,每天一次,連用7天,用藥4天后鯉魚(yú)死亡數(shù)量明顯減少,7天后停止死亡,該病得到有效控制。
嗜水氣單胞菌是水產(chǎn)典型的條件性致病菌,當(dāng)水質(zhì)惡化,魚(yú)類免疫力下降,水溫22~28℃時(shí),在水體中一直存在的病原菌容易感染魚(yú)類,大量繁殖,相互傳染。在此次病例中,發(fā)病池塘的NH4+為1.2mg/L,NO2-為0.4mg/L,均嚴(yán)重超標(biāo),主要原因是該塘在上一輪養(yǎng)殖結(jié)束后未進(jìn)行清塘就直接投放的鯉魚(yú)種魚(yú),底質(zhì)積累的糞便和飼料殘?jiān)^(guò)多,分解產(chǎn)生大量氨氮,魚(yú)類在長(zhǎng)期氨氮超標(biāo)的水體中免疫力下降,引起感染,而該養(yǎng)殖場(chǎng)其他三個(gè)塘的水質(zhì)NH4+<0.5mg/L,則未發(fā)病。對(duì)于此次鯉魚(yú)發(fā)病池塘,病情得到控制后,應(yīng)進(jìn)一步進(jìn)行水體消毒、底質(zhì)改良,使用EM菌微生態(tài)制劑培養(yǎng)池塘優(yōu)勢(shì)菌群,抑制病原菌生長(zhǎng),防止疾病復(fù)發(fā)。
圖1 患病鯉魚(yú)體表褪色,鰭條基部、腹部充出血,泄殖孔紅腫外凸
圖2 肝胰臟、腸道、腎臟淤血、出血,腸道內(nèi)分泌物增多