基于微生物分離培養(yǎng)的3種甜菜土壤細菌多樣性研究

李苗 楊福珍 武纖雨 閆海 劉洋

摘要通過傳統(tǒng)微生物培養(yǎng)方法，對甜菜頭茬土、根際土及迎際土的細菌群落結(jié)構(gòu)多樣性進行分析。結(jié)果表明，甜菜頭茬土、迎茬土、根際土的細菌群落結(jié)構(gòu)具有多樣性。甜菜頭茬土細菌含5個分類操作單元（operational taxonomic units，OTU），分屬Proteobacteria、Actinobacteria類群，其中，第一優(yōu)勢屬為Pseudarthrobacter，豐度為42.86%。甜菜根際土細菌含23個OTU，分屬Firmicutes、Actinobacteria類群，其中，第一優(yōu)勢屬為Bacillus，豐度為12.96%，第二優(yōu)勢屬為Microbacterium，第三優(yōu)勢菌屬為Planomicrobium和Streptomyces。甜菜迎茬土細菌含15個OTU，分屬Actinobacteria、Firmicutes、Proteobacteria類群，其中，第一優(yōu)勢屬為Pseudarthrobacter，豐度為30.95%，第二優(yōu)勢屬為Pseudomonas，第三優(yōu)勢菌屬為Arthrobacter和Paenarthrobacter。這表明土壤的性質(zhì)對土壤中細菌種類多樣性具有一定的影響，不同性質(zhì)土壤中細菌的OTU數(shù)目不同，且細菌群落結(jié)構(gòu)也有所差異。這是首次以不同性質(zhì)的甜菜土壤為試驗材料研究甜菜土壤細菌種類多樣性與土壤性質(zhì)的關(guān)系。

關(guān)鍵詞甜菜土壤;土壤細菌;可培養(yǎng)方法;物種多樣性

中圖分類號S?154.3文獻標識碼A

文章編號0517-6611（2019）18-0157-05

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2019.18.043

開放科學（資源服務）標識碼（OSID）：

Bacterial Diversity of Three Beet Soils Based on Microorganism Isolation and Culture

LI Miao，YANG Fu-zhen，WU Qian-yu et al（School of Chemical and Biological Engineering，University of Science and Technology Beijing，Beijing 100083）

AbstractThe diversity of bacterial community structure in sugar beet new soil，rhizosphere soil and licking soil in the soil was analyzed by traditional microbial culture methods.Experiments have shown that the bacterial community structure of the beet new soil，liking soil and rhizosphere soil were diverse.The beet new soil bacteria contained five operational taxonomic units （OTU），belonging to the Proteobacteria and Actinobacteria groups.Among them，the first dominant genus was Pseudarthrobacter，and the abundance was 42.86%.The rhizosphere soil bacteria contained 23 OTUs，belonging to the Firmicutes and Actinobacteria groups.Among them，the first dominant genus was Bacillus，the abundance was 12.96%，the second dominant genus was Microbacterium，and the third dominant genus was Planomicrobium and Streptomyces.The sugar beet contained 15 OTUs，belonging to the group of Actinobacteria，F(xiàn)irmicutes and Proteobacteria.Among them，the first dominant genus was Pseudarthrobacter，the abundance was 30.95%，the second dominant genus was Pseudomonas，and the third dominant genus was Arthrobacter and Paenarthrobacter.The results showed that the nature of soil had a certain impact on the diversity of bacterial species in the soil.The number of OTUs in different soils was different，and the bacterial community structure was also different.This was the first time to study the relationship between bacterial species diversity and soil properties of sugar beet soils with different beet soils as experimental materials.

Key wordsSugar beet soil;Soil bacteria;Cultivable method; Species diversity

甜菜不僅是世界上主要的糖料作物也是我國主要糖料作物之一。甜菜生產(chǎn)在國民經(jīng)濟中占有重要地位，尤其在制糖業(yè)中起著舉足輕重的作用，除用于制糖之外，還可以為動物飼料、生物燃料、人類營養(yǎng)和有機塑料提供許多增值的副產(chǎn)品[1-2]。甜菜具有耐旱、耐寒及耐鹽堿等特點，是適應性和抗逆性都較強的作物[3]。目前發(fā)達國家已經(jīng)利用科學手段來改變甜菜的根形和生物學特性，使甜菜的根產(chǎn)量和產(chǎn)糖率得到大幅度提升[4]，而我國仍面臨甜菜產(chǎn)糖量低、生產(chǎn)成本較高、產(chǎn)業(yè)不穩(wěn)定等問題[5]。

土壤微生物在土壤養(yǎng)分轉(zhuǎn)化與腐殖質(zhì)形成過程中起著重要作用[6]。土壤是微生物很重要的載體，是微生物生長和繁殖的天然培養(yǎng)基。土壤中存在豐富的微生物群落，包括各種病菌和有益的細菌，在維持土壤結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性、土壤微生物多樣性及生態(tài)平衡等方面均起到促進作用，是維持土壤生產(chǎn)力的重要指標[7-9]。土壤細菌含量在土壤微生物中占有絕對優(yōu)勢[10-11]，對廢物的分解具有重要意義。除分解作用，還會產(chǎn)生一些有用的物質(zhì)，可以促進土壤健康植物生長，其種類組成和群落結(jié)構(gòu)在很大程度上決定土壤的生物活性，并在自然生態(tài)系統(tǒng)中保持平衡[12]。研究表明，細菌群落多樣性與土壤理化性質(zhì)、土壤類型和土壤上種植的作物均有密切關(guān)系[13]。

土壤微生物與植物密切互動，是影響植物健康的重要因素，土壤中的微生物可以直接影響其上植物的微生態(tài)[14-15]。土壤中一些很重要的土傳病害可能成為傳遞給植物的致病因子，土壤中有益細菌對植物的健康生長發(fā)揮著重要的生物學作用[16]。雖然土壤微生物與植物的相關(guān)研究越來越多，但對甜菜與甜菜土壤微生物的研究相對較少[17-18]，且主要集中在甜菜育種、種植、栽培和營養(yǎng)成分糖分分析等方面，關(guān)于甜菜土壤微生物的相關(guān)研究目前很少[19-21]。

筆者以甜菜頭茬土、迎茬土和根際土為試驗材料，采用傳統(tǒng)分離培養(yǎng)方法，開展其土壤細菌群落多樣性研究，以獲得豐富的甜菜土壤細菌資源，并研究與甜菜相關(guān)土壤中不同微生物的聯(lián)系和差異，為進一步了解土壤與微生物之間的相互作用，篩選生防促生作用的有益細菌奠定基礎，同時為實施土壤的干預、指導甜菜生產(chǎn)、提高甜菜的品質(zhì)與產(chǎn)量提供科學依據(jù)，這對推進土壤微生物與植物關(guān)系的科學研究及甜菜產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有重要的理論依據(jù)和實踐意義。

1材料與方法

1.1試驗材料

1.1.1甜菜土壤樣品的采集。

試驗樣品為內(nèi)蒙古甜菜種植基地的3種甜菜土壤（不連作甜菜的頭茬土和根際土，連作甜菜的迎茬土），于2018年10月采自內(nèi)蒙古自治區(qū)鄂爾多斯市達拉特旗甜菜種植基地（109°54′55.92″E，?40°19′39.62″N），4 ℃?保存。

1.1.2培養(yǎng)基及試劑。

LB、TSA、R2A成品培養(yǎng)基購于北京陸橋公司; 細菌基因 DNA 提取試劑盒及PCR相關(guān)試劑購于TIANGEN 公司，PCR引物由北京諾賽生物公司合成。

1.2試驗方法

1.2.1土壤細菌的分離與純化。

甜菜土壤細菌群落多樣性研究采用傳統(tǒng)分離培養(yǎng)技術(shù)。在超凈工作臺取2 g 土壤樣品于50 mL 離心管，加20 mL 無菌水，采用梯度稀釋法制備稀釋倍數(shù)為1×10-2到1×10-7的系列稀釋液。分別取稀釋梯度為10-6 和10-7 的土壤稀釋樣品100 μL 涂布于 LB、TSA、R2A平板上，每個處理組設置3個平行，30 ℃ 培養(yǎng) 3?d后根據(jù)平板上菌落的形態(tài) （ 表面光澤度、透明度、大小、顏色、形狀、邊緣整齊度等） 隨機挑取具有代表性的單菌落，純化后 4 ℃ 保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2內(nèi)生細菌的 16S rDNA 序列分析 。

采用破碎法粗提取細菌基因組 DNA。用正向引物 27F （ 5′-AGAGT-TTCATCTGGCTCAG-3′） 和 反 向 引 物?1492R （ 5′-GGTTACCTTGT-TACGACTT-3′） 擴增細菌 16S rDNA。PCR 反應體系（ 50 μL） ： DNA 模板 3 μL、10×Buffer 5 μL、dNTP?（2.5 mmol/L） 4 μL、Taq 酶（ 5 U/L）0.25 μL、引物27F?（10 mmol/L）1 μL、引物 1492 R （ 10 mmol/L） 1μL，最后用 ddH2O 補足至 50 μL。PCR 反應程序：94 ℃ 預變性 5 min;?94 ℃ 變性 1 min，55 ℃ 復性 1 min，72 ℃ 延伸 1 min，30 個循環(huán)后 72 ℃ 延伸 10 min。用1% 瓊脂糖凝膠電泳檢測 PCR 擴增產(chǎn)物。PCR 產(chǎn)物用 ABI 3730 型 DNA 測序儀進行測序。將測序得到的結(jié)果在 EZ biocloud中進行比對，確定與已知序列同源關(guān)系，當序列相似性達 98.65% 以上時歸為同一?個種。

2結(jié)果與分析

通過傳統(tǒng)分離培養(yǎng)方法從甜菜頭茬土、根茬土和迎際土中分別挑取7、54、42株細菌，分別有5、23、15個代表菌株?（表1），將代表菌株序列信息提交到 GenBank，并獲得登?錄號。

由表1、2和圖1可知，甜菜頭茬土細菌群落分屬2個類群：Proteobacteria類群（1個克隆，14.29%）、Actinobacteria類群（6個克隆，85.71%），其中Proteobacteria包含1個OTU，Actinobacteria包含4個OTU。該群落分屬5個屬，優(yōu)勢屬（豐度）為Pseudarthrobacter（42.86%）。甜菜根際土細菌群落分屬2個類群：Firmicutes類群（25個克隆，46.30%）、Actinobacteria類群（29個克隆，53.70%），其中Firmicutes包含12個OTU，Actinobacteria包含11個OTU。該群落分屬16個屬，優(yōu)勢屬（豐度）為Bacillus（12.96%）、Microbacterium（9.25%）、Planomicrobium（7.41%）及Streptomyces（7.41%）。甜菜迎茬土細菌群落分屬3個類群：Actinobacteria類群（27個克隆，?64.29%）、Firmicutes類群（7個克隆，16.66%）、Proteobacteria類群（8個克隆，19.05%），其中Actinobacteria包含8個OTU，F(xiàn)irmicutes包含3個OTU，Proteobacteria包含4個OTU。該群落分屬11個屬，優(yōu)勢屬（豐度）為Pseudarthrobacter?（30.95%）、Pseudomonas（11.90%）、Arthrobacter（9.52%）及Paenarthrobacter（9.52%）。甜菜頭茬土共有5個OTU，根際土共有23個OTU，迎茬土共有15個OTU。甜菜根際土的OTU數(shù)目最多，其次是迎茬土，最后是頭茬土。

甜菜頭茬土、根際土和迎茬土有共同的菌屬，如Pseudarthrobacter是頭茬土的第一優(yōu)勢菌屬，也是迎茬土的第一優(yōu)勢菌屬，是根際土的第四優(yōu)勢菌屬;Paenarthrobacter是頭茬土的并列第二優(yōu)勢菌屬，是根際土的并列第四優(yōu)勢菌屬，也是迎茬土的并列第三優(yōu)勢菌屬。除Pseudarthrobacter和Paenarthrobacter是3個甜菜土壤的共同菌屬外，頭茬土與根際土也有一些共同菌屬Agrococcus和Sanguibacter;迎茬土與根際土也有一些共同菌屬Arthrobacter、Brevibacterium、Microbacterium、Bacillus、Planomicrobium和Streptomyces。而Enterobacter菌屬只在甜菜頭茬土中分離得到，Pseudoclavibacter、Psychrobacter和Pseudomonas菌屬只在迎茬土中分離得到，Exiguobacterium、Aerococcus、Paenibacillus、Enterococcus和Terribacillus菌屬只在根際土中分離得到。

3討論

土壤是植物生長的基質(zhì)，為植物提供營養(yǎng)，同時也是土壤微生物的棲息地。土壤微生物群落與植物相互作用，參與植物基本的養(yǎng)分循環(huán)等過程，對維持植物的生產(chǎn)力起到重要作用[22-23]。土壤的表面和內(nèi)部存在多種微生物，包括有益微生物和病原菌。目前對于土壤微生物的研究已經(jīng)比較深入，但主要集中在被污染土壤的修復與整治[24-25]，對于農(nóng)作物相關(guān)土壤微生物的研究主要是馬鈴薯[26]、黃瓜[27]、西瓜[28]、番茄[29]等作物，對甜菜土壤細菌群落結(jié)構(gòu)多樣性的研究較以上作物少。該研究以內(nèi)蒙古培育的甜菜頭茬土、迎茬土和受到土壤和甜菜共同影響的根際土為研究對象，通過傳統(tǒng)微生物培養(yǎng)方法，對甜菜不同土壤細菌種類多樣性進行研究，旨在揭示不同性質(zhì)的甜菜土壤中細菌種類多樣性的關(guān)系，為下一步進行土壤微生物干預提供科學依據(jù)。

該研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同甜菜土壤樣品細菌群落結(jié)構(gòu)具有多樣性。甜菜頭茬土細菌群落分屬Proteobacteria、Actinobacteria 2個類群，5個菌屬，具有 5個 OTU，第一優(yōu)勢菌屬為Pseudarthrobacter（42.86%）;甜菜根際土細菌群落分屬Firmicutes、Actinobacteria 2個類群，16個菌屬，具有 23個 OTU，前 3 個優(yōu)勢菌屬分別為Bacillus（12.96%）、Microbacterium?（9.25%）、Planomicrobium（7.41%）及Streptomyces（7.41%）;甜菜迎茬土細菌群落分屬Actinobacteria、Firmicutes、Proteobacteria 3個類群，11個菌屬，具有15 個OTU，前 3 個優(yōu)勢菌屬分別為Pseudarthrobacter（30.95%）、Pseudomonas（11.90%）、Arthrobacter（9.52%）及Paenarthrobacter（9.52%）。來自甜菜頭茬土的Enterobacter（14.29%）菌屬為其特有;Exiguobacterium（3.70%）、Aerococcus（7.40%）、Paenibacillus（1.85%）、Enterococcus（1.85%）、Terribacillus（3.70%）、Cellulomonas（3.70%）是甜菜根際土中特有的菌屬;Pseudoclavibacter（2.38%）、Psychrobacter（4.76%）和Pseudomonas（7.14%）菌屬是迎茬土中特有的菌屬。

該試驗結(jié)果表明，從甜菜根際土中分離獲得的細菌群落種類更多，細菌群落更具有多樣性。Naz等[30]對根際微生物研究發(fā)現(xiàn)，根際土區(qū)域定居的細菌數(shù)量通常比土壤中發(fā)現(xiàn)的細菌多10～100倍。甜菜頭茬土、根際土、迎茬土壤共有的Paenarthrobacter菌屬是土壤中常見的菌屬。Meng等[31]研究發(fā)現(xiàn)Paenarthrobacter nicotinovorans在土壤和極端環(huán)境中有很強的生存能力，現(xiàn)已廣泛應用于降解尼古丁、脫硫、磷和重金屬的去除污水、固氮作用等。

該試驗結(jié)果表明甜菜頭茬土中特有的Enterobacter菌屬對土壤的健康和甜菜的健康生長起有益作用。研究發(fā)現(xiàn)，Enterobacter是植物生長促進細菌，可能在植物與微生物相互作用中起重要作用，因此在生物防治機制中起重要作用。這是由于Enterobacter cloacae CAL2的ACC脫氨酶基因具有促進植物生長特性，ACC脫氨酶基因表達后，通過水解過量的ACC來增強發(fā)芽，從而降低種子中乙烯的抑制水平來促進植物生長[32]。 Enterobacter agglomerans IC1270 可以同時產(chǎn)生幾丁質(zhì)水解酶和吡咯尼特林抗生素，對多種植物病原細菌和真菌均有較好的抗菌作用[33]。Enterobacter sp.P23也具有促進植物生長的作用，成功保護了鹽脅迫下的水稻幼苗[34]。Agrococcus和Sanguibacter菌屬為甜菜頭茬土和根際土共有菌屬，研究表明Agrococcus菌屬成員能夠在極端生存條件下茁壯成長，如在永久凍土環(huán)境中、極端堿性地中或極限環(huán)境[35]。Park等[36]研究發(fā)現(xiàn)Sanguibacterantarcticus KOPRI 21702可以產(chǎn)生具有很強冷適應性的幾丁質(zhì)水解酶。甜菜迎茬土中特有的Psychrobacter菌屬對抗生素具有一定的抗性。Psychrobacter psychrophilus在凍土中分離出來，研究表明其對四環(huán)素和鏈霉素具有抗性[37];另外甜菜迎茬土中特有的Pseudomonas屬存在一定的致病性。黃其玲等[38]在研究獼猴桃潰瘍病菌的生物學特性時發(fā)現(xiàn)Pseudomonas syringae pv.actinidiae所引起的獼猴桃潰瘍病是生產(chǎn)中最具毀滅性的細菌病害之一，是我國林業(yè)上的檢疫性病害。

4結(jié)論

這是首次用傳統(tǒng)分離培養(yǎng)方法研究內(nèi)蒙古甜菜的頭茬土、根際土和迎茬土壤細菌群落多樣性，對推進土壤科學研究及甜菜產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有積極的理論與實踐價值，為進一步挖掘土壤微生物與植物之間的互作關(guān)系提供參考依據(jù)，為實施土壤的干預、指導甜菜生產(chǎn)、提高甜菜的品質(zhì)與產(chǎn)量提供微生態(tài)的科學依據(jù)。該試驗首次分離到的內(nèi)蒙古甜菜土壤細菌資源，為今后合理開發(fā)新的植物益微菌劑奠定資源基礎。

參考文獻

[1]韓秉進，朱向明.我國甜菜生產(chǎn)發(fā)展歷程及現(xiàn)狀分析[J].土壤與作物，2016，5（2）：91-95.

[2]興旺，崔平，潘榮，等.不同國家甜菜種質(zhì)資源遺傳多樣性研究[J].植物遺傳資源學報，2018，19（1）：76-86.

[3]李智.膜下滴灌甜菜水氮耦合的生理效應[D].呼和浩特：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學，2018.

[4]劉升廷，王燕飛，高衛(wèi)時，等.對我國甜菜種業(yè)發(fā)展的思考[J].中國糖料，2017，39（2）：71-74.

[5]MARINELLO F，PEZZUOLO A，CILLIS D，et al.Traffic effects on soil compaction and sugar beet （Beta vulgaris L.） taproot quality parameters[J].Spanish journal of agricultural research，2017，15（1）：1-8.

[6]崔金香，王帥.土壤微生物多樣性研究進展[J].河南農(nóng)業(yè)科學，2010（6）：165-169.

[7]錢葉，侯怡鈴，邱潔，等.龍門山地震帶土壤細菌多樣性的研究[J].土壤通報，2017，48（5）：1093-1101.

[8]郭金瑞，宋振偉，朱平，等.長期不同種植模式對東北黑土微生物群落結(jié)構(gòu)與土壤理化性質(zhì)的影響[J].土壤通報，2016，47（2）：353-359.

[9]KIRK J L，BEAUDETTE L A，HART M，et al.Methods of studying soil microbial diversity[J].Journal of microbiological methods，2004，58（2）：169-188.

[10]DELMONT T O，PRESTAT E，KEEGAN K P，et al.Structure，fluctuation and magnitude of a natural grassland soil metagenome[J].The ISME Journal，2012，6（9）：1677-1687.

[11]FIERER N，LEFF J W，ADAMS B J，et al.Cross-biome metagenomic analyses of soil microbial communities and their functional attributes[J].Proceedings of the national academy of sciences，2012，109（52）：21390-21395.

[12]NACKE H，THRMER A，WOLLHERR A.Pyrosequencing-based assessment of bacterial community structure along different management types in German forest and grassland soils[J].PLoS One，2011，6（2）：1-12.

[13]NICOMRAT D，DICK W A，DOPSON M，et al.Bacterial phylogenetic diversity in a constructed wetland system treating acid coal mine drainage[J].Soil biology and biochemistry，2008，40（2）：312-321.

[14]KIM Y C，LEVEAU J，MCSPADDEN GARDENER B B，et al.The multifactorial basis for plant health promotion by plant-associated bacteria[J].Applied and environmental microbiology，2011，77（5）：1548-1555.

[15]SANTHANAM R，LUU V T，WEINHOLD A，et al.Native root-associated bacteria rescue a plant from a sudden-wilt disease that emerged during continuous cropping[J].Proceedings of the national academy of sciences，2015，112（36）：5013-5020.

[16]李南南，劉洋，趙燃，等.北京優(yōu)質(zhì)雜交玉米種子內(nèi)生細菌種類多樣性[J].食品科學技術(shù)學報，2016，34（5）：55-63.

[17]VALENCIA E，GROSS N，QUERO J L，et al.Cascading effects from plants to soil microorganisms explain how plant species richness and simulated climate change affect soil multifunctionality[J].Glob Chang Biol，2018，24（12）：5642-5654.

[18]SHI W C，LI M C，WEI G S，et al.The occurrence of potato common scab correlates with the community composition and function of the geocaulosphere soil microbiome[J].Microbiome，2019，7（1）：1-18.

[19]HASSANI M，HEIDARI B，DADKHODAIE A，et al.Genotype by environment interaction components underlying variations in root，sugar and white sugar yield in sugar beet （Beta vulgaris L.）[J].Euphytica，2018，214：1-21.

[20]JACOBS A，KOCH H，MAERLAENDER B.Using preceding crop effects for climate smart sugar beet （Beta vulgaris L.）cultivation[J].Europenan journal of agronomy，2019，104：13-20.

[21]BARONE V，BAGLIERI A，STEVANATO P，et al.Root morphological and molecular responses induced by microalgae extracts in sugar beet （Beta vulgaris L.）[J].Journal of applied phycology，2018，30（2）：1061-1071.

[22]LELOUP J，BAUDE M，NUNAN N，et al.Unravelling the effects of plant species diversity and aboveground litter input on soil bacterial communities[J].Geoderma，2018，317：1-7.

[23]SCHMID M W，HAHL T，VAN MOORSEL S J，et al.Rhizosphere bacterial community composition depends on plant diversity legacy in soil and plant species identity[J/OL].bioRxiv，2018：1-37[2019-01-25].https：//www.biorxiv.org/content/early/2008/03/23/287235.full.pdf.doi：https：//doi.org/10.1101/287235.

[24]CAO B，ZHANG Y，WANG Z Y，et al.Insight into the variation of bacterial structure in atrazine-contaminated soil regulating by potential phytoremediator： Pennisetum americanum（L.） K.Schum.[J].Frontiers in microbiology，2018，9：1-11.

[25]LIU Z C，WANG L A，DING S M，et al.Enhancer assisted-phytoremediation of mercury-contaminated soils by Oxalis corniculata L.，and rhizosphere microorganism distribution of Oxalis corniculata L.[J].Ecotoxicology and environmental safety，2018，160：171-177.

[26]呂昭和，唐德華.馬鈴薯連作栽培對土壤微生物多樣性的影響[J].農(nóng)業(yè)工程技術(shù)，2018，38（23）：24-27.

[27]秦立金，徐峰，劉永勝，等.黃瓜與西芹間作土壤細菌多樣性及其對黃瓜枯萎病發(fā)生的影響[J].中國生態(tài)農(nóng)業(yè)學報，2018，26（8）：1180-1189.

[28]吳宇佳，吉清妹，解鈺，等.西瓜連作土壤細菌種群消長變化[J].中國瓜菜，2018，31（11）：18-21.

[29]孫文慶，康亞龍，劉建國，等.加工番茄連作對土壤微生物群落多樣性的影響[J].西北農(nóng)業(yè)學報，2017，26（7）：1099-1110.

[30]NAZ S A，JABEEN N，SOHAIL M，et al.Production and purification of pyocin from a soil associated Pseudomonas aeruginosa strain sa 188[J].Pakistan journal of agricultural sciences，2015，52（4）：873-887.

[31]MENG J，SUN X M，LI S S，et al.Draft genome sequence of Paenarthrobacter nicotinovorans Hce-1[J].Genome announcements，2017，5（30）：717-727.

[32]KAMPFER P，MCINROY J A，GLAESER S P.Enterobacter muelleri sp.nov.，isolated from the rhizosphere of Zea mays[J].Int J Syst Evol Microbiol，2015，65（11）：4093-4099.

[33]NIE L，SHAH S，RASHID A，et al.Phytoremediation of arsenate contaminated soil by transgenic canola and the plant growth-promoting bacterium Enterobacter cloacae CAL2[J].Plant physiology and biochemistry，2002，40（4）：355-361.

[34]SARKAR A，GHOSH P K，PRAMANIK K，et al.A halotolerant Enterobacter sp.displaying ACC deaminase activity promotes rice seedling growth under salt stress[J].Res Microbiol，2018，169（1）：20-32.

[35]BEHRENDT U，SCHUMANN P，ULRICH A.Agrococcus versicolor sp.nov.，an actinobacterium associated with the phyllosphere of potato plants[J].Int J Syst Evol Microbiol，2008，58（Pt 12）：2833-2838.

[36]PARK H J，KIM D，KIM I H，et al.Characteristics of cold-adaptive endochitinase from Antarctic bacterium Sanguibacter antarcticus KOPRI 21702[J].Enzyme and microbial technology，2009，45（5）：391-396.

[37]PETROVA M，GORLENKO Z，MINDLIN S.Molecular structure and translocation of a multiple antibiotic resistance region?of a Psychrobacter psychrophilus permafrost strain[J].FEMS Microbiol Lett，2009，296（2）：190-197.

[38]黃其玲，高小寧，趙志博，等.GFPuv標記獼猴桃潰瘍病菌的生物學特性及其在土壤、根系中的定殖[J].中國農(nóng)業(yè)科學，2013，46（2）：282-291.