■楊菲菲 曾曉倩 趙玉快 王利華

（青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東青島266109）

在水貂的各飼養(yǎng)時(shí)期中，哺乳期水貂的營(yíng)養(yǎng)需要量最高，因?yàn)樗醭藵M足自身的營(yíng)養(yǎng)需要，還要通過泌乳，供給仔貂快速生長(zhǎng)發(fā)育所需要的營(yíng)養(yǎng)[1]。仔貂出生后4 d，體重是初生重的2倍，出生后3周內(nèi)，仔貂的平均生長(zhǎng)率為12%。哺乳期間母貂為了泌乳需求，大量動(dòng)員體脂，能量處于負(fù)平衡狀態(tài)，機(jī)體易發(fā)生代謝紊亂，嚴(yán)重時(shí)可發(fā)生哺乳綜合征，引起母貂死亡。有研究表明，泌乳期間飼喂適量的碳水化合物能夠有效降低哺乳綜合征[2]。然而，水貂對(duì)碳水化合物的消化能力非常有限，尤其是未經(jīng)糊化的淀粉，水貂的消化率只有50%左右。植物源性飼料經(jīng)酵母菌、乳酸桿菌、枯芽孢桿菌等發(fā)酵，可將大分子的物質(zhì)轉(zhuǎn)化為易吸收的小分子物質(zhì)，可提高飼料消化率，同時(shí)可以改善腸道微生物區(qū)系，抑制病原微生物滋生，提高飼料適口性。解決水貂對(duì)植物性飼料消化率低的問題，可以補(bǔ)充水貂所需的碳水化合物。Skrede 等[3]研究發(fā)現(xiàn)，水貂飼糧中添加乳酸桿菌發(fā)酵的小麥能提高水貂對(duì)碳水化合物的消化吸收。

發(fā)酵飼料在水產(chǎn)動(dòng)物、畜禽上的應(yīng)用已有大量研究。以往研究表明，發(fā)酵飼料可提高水產(chǎn)動(dòng)物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收水平，促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)；提高畜禽對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化利用率，改善腸道微生物菌群區(qū)系，抑制病原微生物滋生，降低氮的排泄量，減少對(duì)環(huán)境的污染[4-7]，然而發(fā)酵飼料在水貂中的研究卻較少。因此，本試驗(yàn)以哺乳期水貂為研究對(duì)象，通過代謝試驗(yàn)和飼養(yǎng)試驗(yàn)評(píng)價(jià)發(fā)酵飼料對(duì)水貂營(yíng)養(yǎng)消化率、氮代謝及仔貂生長(zhǎng)性能的影響，確定發(fā)酵飼料在水貂哺乳期的應(yīng)用效果。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)使用的發(fā)酵飼料采用三株菌二次發(fā)酵工藝（專利號(hào)：201710222458.5）在實(shí)驗(yàn)室自制（乳酸菌在45 ℃下進(jìn)行擴(kuò)繁，然后將玉米-豆粕按2:1混合物接種乳酸菌、枯草芽孢桿菌和酵母菌，38 ℃培養(yǎng)96 h），發(fā)酵飼料的干物質(zhì)含量為33.93%，粗蛋白35.27%、粗脂肪13.09%、粗灰分9.58%（實(shí)測(cè)值，干物質(zhì)基礎(chǔ)）。制備發(fā)酵飼料所需的脫脂奶粉由河北華仁飼料廠提供，乳酸菌和枯草芽孢桿菌從北京川秀科技有限公司購(gòu)買，酵母菌從安琪酵母股份有限公司購(gòu)買，大豆粕及玉米為普通市售。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選擇96 只分娩后2 周的咖啡色母貂及其仔貂，隨機(jī)分為4組，每組24個(gè)重復(fù)。4組飼糧中發(fā)酵飼料的含量分別為0（Ⅰ組）、2.5%（Ⅱ組）、5.0%（Ⅲ組）、7.5%（Ⅳ組）。

1.3 飼養(yǎng)管理及飼糧組成

試驗(yàn)于青島市即墨某水貂養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)進(jìn)行。水貂單籠飼養(yǎng)，每日2次（上午07：30，下午15：30），保證自由采食和飲水，其他的飼養(yǎng)管理全部按照水貂養(yǎng)殖場(chǎng)的飼養(yǎng)方式進(jìn)行。各試驗(yàn)組營(yíng)養(yǎng)成分見表1。

無(wú)氮浸出物(%)=100%-粗蛋白(%)-粗脂肪(%)-粗灰分(%)。代謝能為計(jì)算值，計(jì)算公式為：代謝能=（85%×粗蛋白×4.5+90%×粗脂肪×9.5+70%×無(wú)氮浸出物×4.2）×4.184。發(fā)酵飼料組的鈣和磷是根據(jù)商品全價(jià)料中和發(fā)酵飼料中鈣和磷的測(cè)定結(jié)果計(jì)算值，其他各指標(biāo)為實(shí)測(cè)值，并以干物質(zhì)基礎(chǔ)計(jì)。Ⅰ～Ⅳ組干物質(zhì)含量分別為32.30%、32.79%、33.00%、33.47%。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 代謝試驗(yàn)

試驗(yàn)開始后每組隨機(jī)選擇6 窩水貂進(jìn)行代謝試驗(yàn)。代謝試驗(yàn)采用全收糞尿法，預(yù)試期3 d后，連續(xù)收集3 d母貂的糞便和尿液。收集的糞和尿樣用10%硫酸溶液固氮，同時(shí)采集飼糧樣品。準(zhǔn)確記錄3 d 的采食量、排糞量和排尿量。

表1 試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

收集的尿液混勻后用于測(cè)定其中氮含量，根據(jù)排尿量計(jì)算尿氮。糞樣和飼料樣混合均勻后取樣，于65 ℃制成風(fēng)干樣，并測(cè)定初水份。樣品粉碎過40 目篩，測(cè)定糞樣和飼料樣品中的干物質(zhì)、總氮（粗蛋白）、粗脂肪、粗灰分。干物質(zhì)的含量測(cè)定參照GB/T 6435—2006；粗蛋白質(zhì)的含量測(cè)定參照GB/T 6432—1994；粗脂肪的含量參照GB/T 6433—2006；粗灰分含量測(cè)定參照GB/T 6438—2007。根據(jù)采食量、排糞量，計(jì)算出營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率；根據(jù)食入氮、糞氮和尿氮計(jì)算沉積氮、氮沉積率和蛋白質(zhì)生物學(xué)價(jià)值。計(jì)算公式為：

某養(yǎng)分的消化率(%)=（某養(yǎng)分的攝入量-某養(yǎng)分通過糞排出量）/某養(yǎng)分的攝入量×100

沉積氮(g/d)=食入氮-糞氮-尿氮

氮沉積率(%)=（沉積氮/食入氮）×100

蛋白質(zhì)生物學(xué)價(jià)值(%)=[沉積氮/（食入氮-糞氮排出量）]×100

1.4.2 飼養(yǎng)試驗(yàn)

飼養(yǎng)試驗(yàn)進(jìn)行4 周，預(yù)試期3 d。仔貂每?jī)芍芊Q重一次，根據(jù)產(chǎn)仔日期和生產(chǎn)記錄，計(jì)算成30日齡和45 日齡校正體重；根據(jù)窩仔數(shù)計(jì)算30 日齡和45 日齡窩重、仔貂成活率。計(jì)算公式為：

30(45)日齡校正體重=[稱重重量/(稱重日期-出生日期)]×30(45)

30(45)日齡窩重=30(45)日齡校正體重×窩仔貂數(shù)

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)首先采用Excel 進(jìn)行數(shù)據(jù)整理，再用SAS 9.3 軟件中的MIXED 過程進(jìn)行方差分析，計(jì)算最小二乘均數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)誤，用Tukey 法對(duì)最小二乘均數(shù)進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 發(fā)酵飼料對(duì)水貂營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率和氮平衡的影響

表2 發(fā)酵飼料對(duì)水貂營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率和氮平衡的影響(%)

由表2 可知，發(fā)酵飼料對(duì)水貂粗脂肪消化率有顯著影響（P＜0.05），但對(duì)水貂干物質(zhì)消化率、粗蛋白消化率、粗灰分消化率均無(wú)顯著影響（P＞0.05）。Ⅱ、Ⅲ組粗脂肪消化率顯著高于Ⅰ組（P＜0.05）；Ⅲ、Ⅳ組干物質(zhì)消化率高于Ⅰ組和Ⅱ組，差異不顯著（P＞0.05）。

由表3 可知，發(fā)酵飼料對(duì)水貂氮平衡無(wú)顯著影響，各組的食入氮、糞氮、尿氮、氮沉積率及蛋白質(zhì)生物學(xué)價(jià)值均無(wú)顯著差異(P＞0.05)。

2.2 發(fā)酵飼料對(duì)仔貂生長(zhǎng)性能的影響

表3 發(fā)酵飼料對(duì)水貂氮平衡的影響

由表4可知，發(fā)酵飼料對(duì)仔貂30日齡窩重及斷奶窩仔數(shù)有顯著影響(P＜0.05)，但對(duì)仔貂30 日齡校正體重、45日齡校正體重、45日齡窩重及仔貂成活率無(wú)顯著影響(P＞0.05)。5%發(fā)酵飼料組的斷奶窩仔數(shù)顯著高于未添加發(fā)酵飼料組(P＜0.05)，其他各組間差異不顯著(P＞0.05)。

3 討論

3.1 發(fā)酵飼料對(duì)水貂營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率和氮平衡的影響

由于水貂消化道較短，消化腺分泌的淀粉酶較少以及植物性飼料中含有的抗?fàn)I養(yǎng)因子，水貂養(yǎng)殖過程中，未經(jīng)熟制的植物性飼料一般不能直接飼喂。有研究表明，植物性飼料中存在的不易為動(dòng)物機(jī)體吸收利用的蛋白質(zhì)、淀粉等大分子物質(zhì)，通過益生菌發(fā)酵，分解成更易吸收的單糖、游離氨基酸、多肽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，提高動(dòng)物的消化吸收率[8-10]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)哺乳期水貂應(yīng)用不超過7.5%的發(fā)酵飼料無(wú)任何不良影響，5%的發(fā)酵飼料可提高粗脂肪的消化率。發(fā)酵飼料原料中的脂肪經(jīng)益生菌發(fā)酵從顆粒內(nèi)部滲透到表面，可增加水貂對(duì)脂肪的消化率。張婷等[11]試驗(yàn)結(jié)果表明，添加乳酸菌微生態(tài)制劑可顯著提高冬毛期北極狐粗脂肪和總能消化率。Giang 等[12]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加芽孢桿菌H4，可促進(jìn)仔豬對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率，均與本試驗(yàn)結(jié)果相一致。

郭俊剛等[13]研究表明，飼糧中添加適宜水平的益生菌可提高藍(lán)狐的氮沉積率和蛋白質(zhì)生物學(xué)價(jià)值，降低氮排出量；荊祎等[14]通過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在水貂飼糧中添加乳酸菌，在提高氮沉積率的同時(shí)還可以降低糞尿中的含氮量。但本試驗(yàn)并未發(fā)現(xiàn)發(fā)酵飼料有提高粗蛋白消化率，改善氮沉積率和蛋白質(zhì)生物學(xué)價(jià)值的作用，但可以證明用一定量的發(fā)酵飼料替代動(dòng)物源性的飼料對(duì)養(yǎng)分消化率和氮平衡沒有不良影響。

3.2 飼糧中發(fā)酵飼料對(duì)仔貂生長(zhǎng)性能的影響

受限于現(xiàn)有的生產(chǎn)實(shí)際條件，本次試驗(yàn)無(wú)法配制成等能等蛋白的試驗(yàn)飼糧。Mayntz 等[15]證實(shí)，水貂對(duì)能量和蛋白的攝入量有很強(qiáng)的調(diào)節(jié)能力，對(duì)于高能低蛋白飼糧，水貂不會(huì)發(fā)生能量攝入過多，對(duì)于高蛋白低能飼糧水貂也不會(huì)造成能量攝入不足。各試驗(yàn)組的能量蛋白比較為接近，保證每組水貂的蛋白質(zhì)供能所占比例相對(duì)穩(wěn)定。試驗(yàn)各組間的差異主要反映在碳水化合物和脂肪供能的比例不同，發(fā)酵飼料比列越高則碳水化合物供能的比例越高，脂肪供能的比例越低。

仔貂出生后的3 周內(nèi)，營(yíng)養(yǎng)需要完全依賴母乳，3 周后，仔貂開始采食飼料。因此，30 日齡窩重可反映母貂的泌乳能力，45 日齡窩重可反映出飼糧的飼喂效果。由于仔貂體內(nèi)的消化酶活性和數(shù)量從出生到12 周齡是逐漸增加的，所以早期仔貂對(duì)飼料的消化率較低[16]，因此，要求這個(gè)時(shí)期的飼糧更為平衡、全價(jià)、易吸收。盡管有研究證明，枯草芽孢桿菌可以合成淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纖維素酶等酶類，在消化道中與水貂體內(nèi)的消化酶類一同發(fā)揮作用，促進(jìn)動(dòng)物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，提高水貂的生長(zhǎng)性能[17]，但大量發(fā)酵飼料的使用會(huì)降低飼糧蛋白和能量水平，影響到仔貂的生長(zhǎng)性能，本試驗(yàn)中仔貂45 日齡窩重及45 日齡校正體重及仔貂成活率的變化趨勢(shì)可證實(shí)這一觀點(diǎn)。30 日齡窩重和斷奶窩仔數(shù)，說明7.5%發(fā)酵飼料的用量不影響母貂對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，及母貂的泌乳能力和哺育仔貂的能力。但生產(chǎn)實(shí)際上考慮到仔貂的消化生理，推薦哺乳期母貂發(fā)酵飼料用量為5%。

4 結(jié)論

植物性飼料通過發(fā)酵后可應(yīng)用于哺乳期水貂，推薦用量為5%。