田君歡 張慧慧

保定樂(lè)凱新材料股份有限公司 河北保定 071000

色譜法作為化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的一種檢測(cè)法，氣相色譜法通過(guò)氣化處理樣本，再開展色譜分析的一種方法，這種儀器常用在對(duì)特定組分的定量與定性分析中。為了確保儀器設(shè)備符合相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)要求，在實(shí)驗(yàn)前期，有必要對(duì)儀器設(shè)備性能進(jìn)行檢驗(yàn)，當(dāng)前國(guó)內(nèi)設(shè)備檢測(cè)需要通過(guò)WHO預(yù)認(rèn)證，文章基于此，就氣相色譜儀的性能影響及驗(yàn)證進(jìn)行了詳細(xì)探究。

1 影響氣相色譜儀性能的因素及控制方法

1.1 氣路系統(tǒng)

對(duì)于氣相色譜儀而言，若載氣純度不到位，很容易對(duì)氣相色譜的靈敏性產(chǎn)生影響，再加上載氣當(dāng)中包含較多的雜質(zhì)，所以最終會(huì)干擾實(shí)際分析結(jié)果。為了減少載氣不純對(duì)實(shí)驗(yàn)分析結(jié)果造成的影響，可以在氣相色譜儀的氣路系統(tǒng)中連接載氣凈化器，從而將儀器當(dāng)中的雜質(zhì)去除干凈，與此同時(shí)，為了讓這一設(shè)備充分發(fā)揮作用，在實(shí)際操作中還應(yīng)對(duì)載氣氣壓進(jìn)行合理控制，確保其壓強(qiáng)穩(wěn)定，便于氣相色譜儀進(jìn)樣分離徹底。

1.2 進(jìn)樣系統(tǒng)

在氣相色譜儀實(shí)驗(yàn)中，其主要是利用注射器進(jìn)行進(jìn)樣操作，其中控制進(jìn)樣操作與頻率也會(huì)對(duì)儀器的檢測(cè)結(jié)果造成影響，若進(jìn)樣操作中，不能及時(shí)排空內(nèi)部的空氣，樣品注射期間就會(huì)使得進(jìn)樣數(shù)量減少，最后就會(huì)對(duì)最終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響。為了減少由于人為誤差導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)誤差，很多實(shí)驗(yàn)室中都使用自動(dòng)進(jìn)樣法進(jìn)行操作，即利用自動(dòng)進(jìn)樣器對(duì)樣品量進(jìn)行控制，從而有效確保氣相色譜儀的精準(zhǔn)性。

1.3 分離系統(tǒng)

當(dāng)色譜儀在進(jìn)行分離操作時(shí)，其主要操作是在色譜柱上進(jìn)行的，目前大部分的實(shí)驗(yàn)室都是通過(guò)設(shè)置分離系統(tǒng)來(lái)固定液體相，但由于這一操作取樣不規(guī)律。實(shí)驗(yàn)室在選擇固定液期間仍然需要具有一定操作經(jīng)驗(yàn)的人員。實(shí)驗(yàn)操作中基本的原則為相似相溶原則，所以在非極性樣品分析期間應(yīng)合理選擇固定液，如此才能確保檢測(cè)組分遵照沸點(diǎn)順序呈現(xiàn)階梯式變化，但若操作期間選擇的是極性樣品，那么也要選擇與之相對(duì)的固定液。因?yàn)樵跉庀嗌V分析中，為了確保實(shí)際效果準(zhǔn)確，更多的是要依靠色譜柱，而對(duì)于氣相色譜儀而言，主要有兩種色譜柱，即填充柱與毛細(xì)管柱。在很多實(shí)驗(yàn)檢測(cè)中，填充柱經(jīng)濟(jì)適用，種類較多，但分離效果沒有毛細(xì)管柱好。毛細(xì)管柱分離能力較強(qiáng)，結(jié)果出現(xiàn)的速度快，滲透性較好，因而便于載氣流的迅速通過(guò)，便于將混合氣體分開。但是由于管孔相對(duì)較小，容量也小，所以導(dǎo)致進(jìn)樣量隨之減少。在設(shè)置進(jìn)樣系統(tǒng)期間有必要采取一定措施解決這一問(wèn)題。例如，可以使用分流進(jìn)樣的方法開展進(jìn)樣操作，也就是在進(jìn)樣期間控制實(shí)際樣液數(shù)量，然后在進(jìn)樣器里面開展氣化操作，混合載氣期間只允許少部分樣液通過(guò)色譜柱，這一方法的使用在業(yè)界中頗受歡迎。

1.4 溫度控制系統(tǒng)

在色譜柱分析中，溫度是一個(gè)重要的影響因素，其對(duì)實(shí)際檢測(cè)結(jié)果會(huì)產(chǎn)生較大影響，所以溫度控制系統(tǒng)也是影響氣相色譜儀的主要因素。對(duì)于日常使用的氣相色譜儀而言，需要對(duì)色譜柱、氣化室、檢測(cè)室方面開展恒溫操作。為了讓樣品在第一時(shí)間氣化完全，且不分解，應(yīng)對(duì)氣化室中的溫度進(jìn)行合理控制，確保其在樣品沸點(diǎn)與最高定值之間。

1.5 定量分析法

在實(shí)驗(yàn)樣品檢測(cè)中，不同的樣品檢測(cè)所需的方法也各不相同，因此在定量分析期間若選擇錯(cuò)誤的方法進(jìn)行樣品分析，很容易對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成一定不良影響，最終引起檢測(cè)結(jié)果誤差。通常來(lái)講定量分析法中的外標(biāo)法對(duì)樣品進(jìn)行分析，一定要對(duì)樣品進(jìn)樣數(shù)量進(jìn)行合理化控制，確保樣品進(jìn)量精準(zhǔn)度，在使用這一方法期間由于不同添加標(biāo)準(zhǔn)溶液，所以操作起來(lái)比較容易，實(shí)驗(yàn)期間在測(cè)量藥品前期，只需要繪制不同的標(biāo)準(zhǔn)曲線，接著將同一試驗(yàn)條件下開展檢測(cè)樣品即可，最終將得到的樣品區(qū)縣與繪制出的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對(duì)比，如此就能得到最佳的定量分析結(jié)果。若標(biāo)準(zhǔn)曲線與樣品曲線間存在較大差異，即表明樣品中的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)含量有問(wèn)題，相應(yīng)的就需要重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)與曲線繪制，如此方能確保定量分析結(jié)果的精準(zhǔn)合理。

2 氣相色譜儀性能驗(yàn)證各項(xiàng)指標(biāo)

當(dāng)前在氣相色譜儀性能檢測(cè)中，應(yīng)遵循相關(guān)的國(guó)家規(guī)定，即國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程對(duì)于氣相色譜儀各項(xiàng)性能的要求，這項(xiàng)規(guī)程常用在檢測(cè)氮磷、火焰離子、熱島、電子俘獲等方面的氣相色譜儀檢定。規(guī)程已經(jīng)從柱溫箱、載氣流速、靈敏度、基線、定量重復(fù)性、檢測(cè)限等方面入手進(jìn)行檢測(cè)。歐洲醫(yī)藥管理局結(jié)合藥品檢測(cè)特點(diǎn)，針對(duì)氣相色譜的檢測(cè)器、進(jìn)樣、柱溫箱、儀器技術(shù)等方面開展了實(shí)際檢測(cè)。

3 氣相色譜儀性能驗(yàn)證主要方法

結(jié)合國(guó)家檢定規(guī)程中的各項(xiàng)技術(shù)要求，及相關(guān)的檢測(cè)方法，本文主要介紹進(jìn)口藥品殘留檢測(cè)與柱溫箱溫度精度檢測(cè)法。

3.1 儀器試劑

秒表：控制分度值在0．03s以下。注射器：帶樣品到達(dá)10，應(yīng)該進(jìn)行校準(zhǔn)，若有檢測(cè)證書則可直接應(yīng)用。鉑電阻溫度計(jì)：Pt100型，控制溫度差值在0．3℃。數(shù)字多用表：電壓測(cè)量的不確定結(jié)果5。電阻測(cè)量不確定值。正辛醇-正己烷溶液標(biāo)準(zhǔn)物：使用國(guó)家規(guī)定量程下的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，同時(shí)控制正辛烷的體積分?jǐn)?shù)到1%。

3.2 環(huán)境

控制室溫在。

3.3 柱溫箱溫度精度檢測(cè)法

將鉑電阻溫度計(jì)連接到多用數(shù)字表中，接著固定溫度計(jì)探頭與柱箱中部。設(shè)定柱箱溫度到70，加熱一直到溫度達(dá)到設(shè)定溫度后，繼續(xù)觀察10min，記錄多用便的數(shù)字變化情況，計(jì)算多用數(shù)字表中最大數(shù)值與最小數(shù)值之間的溫度差，然后以此記錄多用數(shù)字表及儀器當(dāng)中的讀數(shù)，然后計(jì)算二者之間的差值，也就是我們所需的柱溫箱精密度。

3.4 進(jìn)口藥品殘留檢測(cè)

（1）分流模式測(cè)定；色譜柱大小為；載氣：氦氣，控制實(shí)際氣體流速在；分流比：；進(jìn)樣體積大小為：；進(jìn)樣器實(shí)際溫度為：。柱箱溫度為。檢測(cè)器：；檢測(cè)器實(shí)際溫度控制在。

選擇正辛醇-正己烷標(biāo)準(zhǔn)溶液當(dāng)做試品溶液，實(shí)驗(yàn)重復(fù)2次，然后將主峰面積記錄下來(lái)，然后再取正己烷溶液，重復(fù)上述操作，最后記下和正辛醇在同一時(shí)間下的峰譜面積。保留正辛醇時(shí)間在5min。

（2）不分流模式測(cè)定；這一環(huán)節(jié)測(cè)定和分流模式不同的是要控制載氣流速為；樣品進(jìn)出體積為：；柱箱溫度控制在，且控制這一溫度時(shí)間為4min，其他設(shè)備操作都和分流模式測(cè)定條件一致。在標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)選擇期間，應(yīng)控制標(biāo)準(zhǔn)溶液體積為10ml，然后使用正己烷將其稀釋到體積為100ml，并將其當(dāng)做供試品，接著重復(fù)實(shí)際進(jìn)樣操作，記錄下主峰的面積，另外選擇正己烷當(dāng)做空白溶液，控制進(jìn)樣次數(shù)為1，記錄下和正辛醇在相同時(shí)間下的峰譜面積，保留正辛醇的實(shí)際時(shí)間8min。

（3）進(jìn)口樣品殘留量計(jì)算?？瞻兹芤寒?dāng)中的色譜圖正辛醇風(fēng)譜圖面積與供試品當(dāng)中的峰圖面積相除，就得到所需的進(jìn)口樣品殘留量。

4 實(shí)驗(yàn)總結(jié)

為了減少實(shí)驗(yàn)影響因素對(duì)氣相色譜儀帶來(lái)的影響，最終影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的精準(zhǔn)性，在實(shí)驗(yàn)操作中，除了要加強(qiáng)對(duì)不同系統(tǒng)的分析管理外，還應(yīng)確保操作符合相應(yīng)的執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)；與此同時(shí)，在實(shí)驗(yàn)期間，還應(yīng)加強(qiáng)對(duì)設(shè)備使用人員的管理培訓(xùn)，通過(guò)理論與操作技能培訓(xùn)，提高操作人員的整體技術(shù)水平，降低儀器試驗(yàn)誤差，另外，對(duì)于管理人員而言，在技術(shù)人員操作期間，還應(yīng)該加強(qiáng)質(zhì)量監(jiān)督工作，確保試驗(yàn)操作符合實(shí)際操作標(biāo)準(zhǔn)；此外，在實(shí)驗(yàn)操作中，還應(yīng)將儀器驗(yàn)證和文件、檔案等結(jié)合在一起，確保儀器驗(yàn)證數(shù)據(jù)、技術(shù)、方案、表格等信息完整。驗(yàn)證報(bào)告應(yīng)該由管理、驗(yàn)證人員簽字保存，最終以利用書面的形式存檔，確保整體的實(shí)驗(yàn)操作有始有終，數(shù)據(jù)完整。

氣相色譜儀在藥物代謝、臨床研究、興奮劑等藥物檢測(cè)中起到了重要作用。當(dāng)前國(guó)內(nèi)出口藥企為了達(dá)到WHO的認(rèn)證要求，統(tǒng)一使用原廠家檢測(cè)法，這種設(shè)備需要消耗花費(fèi)很多資金，同時(shí)也不利于實(shí)際推廣。氣相色譜儀性能驗(yàn)證，以國(guó)家規(guī)定規(guī)程為基礎(chǔ)，與藥品檢測(cè)特點(diǎn)相結(jié)合，融合WHO的認(rèn)證要求，減少了重復(fù)檢測(cè)的出現(xiàn)。這種檢測(cè)方法操作簡(jiǎn)便，成本較低，值得在業(yè)界中推廣使用。

5 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，氣相色譜儀性能對(duì)于試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果有較大影響，基于此，文章從影響儀器檢測(cè)精準(zhǔn)性開始談起，并提出了相應(yīng)的改進(jìn)措施；接著，探討了氣相色譜儀性能驗(yàn)證法的建立和應(yīng)用，通過(guò)對(duì)性能驗(yàn)證法進(jìn)行研究，找到了最佳的氣相色譜儀性能檢測(cè)法，希望能對(duì)當(dāng)前的氣相色譜儀檢測(cè)帶來(lái)實(shí)際幫助。