多發(fā)性骨髓瘤患者血清β2-微球蛋白、TNF-α、CRP及IL-6水平檢測

譚鑫

[摘要] 目的 探討檢測多發(fā)性骨髓瘤（MM）患者血清β2-微球蛋白（β2-MG）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、C反應蛋白（CRP）及白細胞介素-6（IL-6）的臨床價值。 方法 選擇2016年12月～2017年12月我院血液科收治的93例MM患者為研究組，根據Durie-Salmon分期將研究組分為D-SⅠ期組（24例），D-SⅡ期組（39例），D-SⅢ期組（30例），所有MM患者均經VTD 或CTD方案化療。并選擇60例健康志愿者為對照組，比較研究組和對照組、不同D-S分期組、研究組化療前后血清β2-MG、TNF-α、CRP、IL-6的差異。 結果 與健康對照組相比，研究組患者血清β2-MG、CRP、IL-6水平明顯增高[（9.21±3.62）mg/L vs （1.62±0.51） mg/L、（25.14±5.02）mg/L vs （3.05±0.02）mg/L、（66.15±10.35）pg/L vs （22.11±9.36）pg/L]，TNF-α明顯降低[（268.52±31.73）ng/L vs （339.85±33.95）ng/L]，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。不同D-S分期MM患者血清β2-MG、CRP、IL-6水平依次為：D-SⅢ期>D-SⅡ期組>D-SⅠ期組，組間比較差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。經化療后MM患者血清β2-MG、CRP、IL-6水平顯著下降，TNF-α 水平顯著上升，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。 結論 檢測血清β2-MG、TNF-α、CRP、IL-6水平有助于MM診斷、判斷病情程度及臨床治療效果。

[關鍵詞] 多發(fā)性骨髓瘤;血清β2-微球蛋白;腫瘤壞死因子-α;C反應蛋白;白細胞介素-6

[中圖分類號] R733.3? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2019）26-0013-04

[Abstract] Objective To investigate the clinical value of detection of serum β2-microglobulin（β2-MG）， tumor necrosis factor-α （TNF-α）， C-reactive protein （CRP） and interleukin-6 （IL-6） in patients with multiple myeloma （MM）. Methods 93 patients with MM admitted to our Department of Hematology from December 2016 to December 2017 were enrolled. The study group was divided into D-SⅠ group（24 cases）， D-SⅡ group （39 cases）， D-SⅢ group （30 cases） according to Durie-Salmon stage. All MM patients were treated with VTD or CTD regimen. 60 healthy volunteers were selected as the control group. The differences of serum β2-MG， TNF-α， CRP and IL-6 between the study group and the control group， the different D-S staging group and in the study group before and after chemotherapy were compared. Results Compared with those of the healthy control group， serum β2-MG， CRP， and IL-6 levels were significantly higher in the study group [（9.21±3.62） mg/L vs （1.62±0.51） mg/L， （25.14±5.02） mg/L vs （3.05±0.02） mg/L， （66.15±10.35） pg/L vs （22.11± 9.36） pg/L]， and TNF-α in the study group was significantly decreased [（268.52±31.73） ng/L vs （339.85±33.95 ） ng/L]， and the difference was statistically significant （P<0.05）. The levels of serum β2-MG， CRP and IL-6 in patients with different DS stage MM were： D-SⅢ>D-SⅡ stage>D-SⅠ stage group. The differences between groups were statistically significant（P<0.05）. After chemotherapy， the levels of serum β2-MG， CRP and IL-6 in MM patients decreased significantly， and the levels of TNF-α increased significantly （P<0.05）. Conclusion The detection of serum β2-MG， TNF-α， CRP， IL-6 levels is helpful for MM diagnosis， judgment of disease severity and clinical treatment effect.

[Key words] Multiple myeloma; Serum β2-microglobulin; Tumor necrosis factor-α; C-reactive protein; Interleukin-6

多發(fā)性骨髓瘤（Multiple myeloma，MM）是一種以漿細胞克隆性增殖的惡性造血系統(tǒng)腫瘤，我國MM發(fā)病率為1/10萬，好發(fā)于70歲以上老年人[1-2]，貧血、頑固性骨痛、尿液檢查本周蛋白陽性為其主要特征。MM患者存在免疫球蛋白、炎癥因子等血清指標異常，上述指標的檢測在MM早期診斷、早期治療、病情評估、療效評價中均有較高價值[3]。β2-MG能夠有效反映MM骨髓瘤細胞增殖活性，TNF-α、CRP、IL-6均為重要的炎癥因子，并參與機體免疫調節(jié)、細胞生長等過程，在MM患者中存在一定的變化規(guī)律。本研究對MM患者血清β2-MG、TNF-α、CRP、IL-6水平進行檢測，探討其在MM診斷、病情評估和臨床療效評價中的價值，以期對臨床診療提供幫助，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

選擇2016年12月～2017年12月我院血液腫瘤科住院部收治93例MM患者為研究組，其中初診MM者83例，復發(fā)10例，Durie-Salmon分期Ⅰ期24例，Ⅱ期39例，Ⅲ期30例。研究組患者均經以下標準進行篩選，納入標準：均經細胞遺傳學檢查，符合張之南編寫的第三版《血液病診斷及療效標準》中MM的診斷標準[4]。排除標準：經確診的其他類型血液腫瘤者;嚴重肝腎功能不全者;預期生存期<3個月者;化療不耐受者;中途退出者;抵觸本研究者;隨訪失聯(lián)者。選擇60例健康志愿者為對照組，兩組患者的性別、年齡等基線資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），見表1。

1.2方法

1.2.1 化療方法? 研究組患者49例采用VTD方案化療：長春新堿0.5 mg靜脈點滴，第1～4天，沙利度胺（50～100）mg/d于化療第1～21天口服，地塞米松注射液（15～20）mg/d于第1～4天、第9～12天靜脈注射，4～5周為1個療程，至少接受2個療程以上化療。44例采用CTD方案化療：環(huán)磷酰胺（400 mg/m2）于化療第1、8 天靜脈點滴，沙利度胺、地塞米松用法同上，4～5周為1個療程，至少接受2個療程以上化療。治療過程充分水化、堿化尿液，并根據個體化療耐受情況給予對癥處理，惡心嘔吐較重者給予阿扎司瓊注射液或格拉司瓊注射液靜脈注射;感染者給予抗生素、抗真菌治療;長期使用沙利度胺者給予口服拜阿司匹林100 mg/d;骨骼損害者接受唑來磷酸4 mg靜脈注射，每4周1次;合并高鈣血癥者應用降鈣素皮下注射。完全緩解（CR）或接近完全緩解（nCR）后，根據患者經濟能力，采用原有方案或TD方案等鞏固治療。

1.2.2血清β2-MG、TNF-α、CRP、IL-6檢測方法? 研究組患者均于化療前、化療結束后8 周檢測血清β2-MG、TNF-α、CRP、IL-6水平。抽取患者空腹靜脈血5 mL，德國Eppendorf 5810 型離心機3000 r/min離心10 min后取上清，-70℃冷凍保存于日本Sanyo超低溫冰箱待檢。CRP、TNF-α、IL-6（將標本稀釋10倍后加入反應板條，37℃環(huán)境下孕育60 min，經洗板處理后加入酶結合物工作液并封板，37℃環(huán)境下孕育30 min，再經4次洗板后加入顯色劑，37℃環(huán)境下避光孕育10～25 min，加入終止液后測量OD450值）采用ELISA法檢測，β2-MG檢測采用免疫比濁法（將標本加入HM Tase校準管后，再加入含β2-MG抗體的聚苯乙烯膠顆粒懸浮液1 mL，在37℃環(huán)境下反應5 min，再于37℃環(huán)境下加入10 μL蒸餾水、10 μL校準品及10 μL標準血清），檢查設備為日本Olympus全自動生化檢測儀，自帶試劑盒。

對照組于入組后進行血清β2-MG、TNF-α、CRP、IL-6水平檢測，檢測設備及方法同觀察組。

1.3 觀察指標

比較MM患者和正常對照組血清β2-MG、TNF-α、CRP、IL-6水平的差異，并比較不同D-S分期，化療前后MM患者血清β2-MG、TNF-α、CRP、IL-6水平的差異。

1.4 統(tǒng)計學分析

采用SPSS22.0統(tǒng)計學軟件進行分析，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，采用t檢驗或單因素方差分析比較，計數資料以[n（%）]表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 MM患者和正常對照組血清β2-MG、TNF-α、CRP、IL-6水平的比較

研究組患者血清β2-MG、CRP、IL-6水平高于對照組，TNF-α 低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表2。

2.2 不同D-S分期MM患者血清β2-MG、TNF-α、CRP、IL-6水平的比較

不同D-S分期MM患者血清β2-MG、TNF-α、CRP、IL-6水平比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），血清β2-MG、CRP、IL-6水平隨著MM病情加重逐漸增高，TNF-α 隨著MM病情加重逐漸降低，組間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表3。

2.3化療前后MM患者血清β2-MG、TNF-α、CRP、IL-6水平的變化比較

經化療后MM患者血清β2-MG、CRP、IL-6水平顯著下降，TNF-α水平顯著上升，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表4。

3 討論

MM是具有合成與分泌免疫球蛋白能力的漿細胞惡性增生所致的血液系統(tǒng)惡性腫瘤，占惡性腫瘤的1%～2%，占血液腫瘤的10%[5]。臨床上以多發(fā)性溶骨性損害、高鈣血癥、貧血、腎損害等主要伴發(fā)癥狀多見。漿細胞惡性增殖引起骨質破壞、尿中本周蛋白、異常免疫球蛋白增加，破壞腎功能和免疫功能，抑制正常免疫球蛋白生成，同時導致對細菌易感性的增加。因此檢測MM患者血清β2-MG及炎性因子水平對MM的診治有重要意義。

β2-MG為血小板、多形核白細胞以及淋巴細胞分泌的小分子球蛋白，屬細胞膜上完整組織相容性抗原 HLA 的組成部分，可有效反映MM骨髓瘤細胞增殖活性[6，7]，臨床上常根據血清β2-MG對MM患者進行分期。血清β2-MG與腫瘤負荷有關，能直接反映患者體內腫瘤負荷，關系患者生存期。本研究顯示MM患者血清β2-MG明顯高于正常對照組，與MM患者腎功能下降、大量管型形成、β2-MG排除減少有關[8，9]。同時血清β2-MG隨著MM患者D-S分期的加重而增高，說明血清β2-MG可有效反映MM患者病情的嚴重程度，用于指導臨床診斷和分級。TNF-α是由活化的單核細胞或巨噬細胞產生的炎癥因子，能顯著抑制或殺傷腫瘤細胞，促進細胞繁殖和分化，并參與機體自身免疫過程，具有抗感染、促進中性粒細胞吞噬等作用[10，11]。MM患者由于免疫功能受抑制，TNF-α水平下降[12，13]，本研究顯示MM患者血清TNF-α水平顯著低于正常對照組，且隨著D-S分期的加重而下降，提示血清TNF-α同樣可用于鑒別MM及指導臨床診治。CRP是由肝細胞合成的一種急性時相蛋白，在機體組織損傷、炎癥反應時，表達明顯上調，是炎癥反應的敏感指標，MM患者體內CRP水平升高經浸潤、聚集等途徑或影響相應細胞因子水平而引起相應受體細胞活化，從而導致機體一系列病變的發(fā)生。IL-6 是由血管內皮細胞、單核巨噬細胞、成纖維細胞分泌的細胞因子，具有調節(jié)細胞生長、分化、免疫功能，并參與炎性反應過程[13]。同時IL-6誘導MM患者漿細胞增殖，有效反映腫瘤的負荷、預后、分期等。MM患者β2-MG、TNF-α、CRP、IL-6水平的變化提示免疫機制、細胞因子及炎性分子均可能參與了MM病變的過程，通過免疫應答、補體途徑、炎性機制等發(fā)揮作用。本研究顯示，MM患者血清CRP、IL-6均明顯高于正常對照組，且隨著MM病情加重逐漸增高，是判斷MM病情的重要指標。以往研究顯示，β2-MG在MM早期診斷中具有重要的價值，能夠早期提示病變的存在[14]。還有學者指出，β2-MG及多種細胞因子不僅在MM的診斷中發(fā)揮重要作用，而且還可以評價患者治療效果[15]。本研究顯示MM患者血清β2-MG、TNF-α、CRP、IL-6水平可用于判斷臨床治療效果，血清β2-MG、CRP、IL-6在治療后均出現下降，TNF-α在治療后上升，β2-MG、CRP、IL-6水平的下降，提示腫瘤細胞增殖被有效抑制，機體炎性反應水平下降，TNF-α水平上升提示MM患者免疫功能得到有效恢復，說明MM患者對治療方案敏感，也進一步表明血清β2-MG、TNF-α、CRP、IL-6可用于評估治療、預測預后。

綜上所述，MM患者血清 β2-MG、TNF-α、CRP、IL-6水平發(fā)生規(guī)律性變化幅度高于健康志愿者，且隨病情嚴重程度加重而增加。因此，血清β2-MG、TNF-α、CRP、IL-6是診斷MM、評估MM病情、判斷臨床治療效果的有效指標，值得臨床推廣。

[參考文獻]

[1] 劉憲凱，呂國慶，楊滿，等. 來那度胺、三氧化二砷及維生素C治療復發(fā)/難治性多發(fā)性骨髓瘤的療效分析[J]. 中國現代醫(yī)生，2018，56（2）：16-19.

[2] 谷景立，李娟. 多發(fā)性骨髓瘤的診斷及治療進展[J]. 臨床內科雜志，2013，30（6）：365-367.

[3] 段麗娟，李超，楊如玉. 多發(fā)性骨髓瘤患者血清 β2-微球蛋白、TNF-α、CRP 及 IL-6 水平檢測[J]. 中國實驗血液學雜志，2015，23（5）：1362-1365.

[4] 張之南，沈悌. 血液病診斷及療效標準3版[M]. 北京科學出版社，2011：232-235.

[5] 于奇寧. 免疫球蛋白指標對多發(fā)性骨髓瘤的臨床診斷價值分析[J]. 中國現代醫(yī)生，2018，56（25）：42-44.

[6] Gajendran M，Vipperla K，Loganathan P，et al. Gastroenterology：Esophageal perforation in a patient with multiple myeloma-the bone connection[J]. J Gastroenterol Hepatol，2015，30（8）：1227.

[7] Yamasaki S，Kohno K，Kadowaki M，et al. Dose-adjusted lenalidomide combined with low-dose dexamethasone rescues older patients with bortezomibresistant multiple myeloma[J]. Intern Med，2015，54 （14）：1711-1715.

[8] Alonso S，Cabrero M，Caballero JC，et al. Acute graft-versus-host disease and bronchiolitis obliterans after autologous stem cell transplantation in a patient with multiple myeloma[J]. Clin Case Rep，2015，3（6）：370-375.

[9] 金曉娜，周寶珍，張黨鋒. 多發(fā)性骨髓瘤患者VEGF、IL-17、β2-MG、IL-35表達水平及臨床意義[J]. 中國實驗血液學雜志，2018，26（1）：192-196.

[10] Zagouri F，Terpos E，Kastritis E，et al. An update on the use of lenalidomide for the treatment of multiple myeloma[J]. Expert Opin Pharmacother，2015，16（12）：1865-1877.

[11] 吳曉穎，施菊妹，陶怡，等. IGF-Ⅰ、β2-MG和SF在多發(fā)性骨髓瘤患者中的診斷價值及其與臨床分期的關系[J]. 中國實驗血液學雜志，2018，26（3）：802-806.

[12] 劉艷娟，吳玉輝，郭賀賀， 等. 多發(fā)性骨髓瘤患者血清HMGB1水平變化及其與β2-MG、LDH的關系[J]. 山東醫(yī)藥，2018，58（10）：78-80.

[13] 童勇，孫志強，朱華民，等. 硼替佐米對老年多發(fā)性骨髓瘤病人IL-6、CRP和β2-MG水平的影響及療效觀察[J]. 實用老年醫(yī)學，2018，32（10）：966-969.

[14] 羅敏琪，張宏斌，許玨，等. 聯(lián)合檢測血清尿酸、β2微球蛋白和尿液輕鏈在多發(fā)性骨髓瘤早期診斷中的應用[J]. 實用醫(yī)學雜志，2018，34（14）：2416-2419，2424.

[15] 左雨娜，肖敏麗. β2-微球蛋白、C反應蛋白及乳酸脫氫酶檢測在多發(fā)性骨髓瘤診治中的臨床意義[J]. 湖南師范大學學報（醫(yī)學版），2018，15（6）：36-39.

（收稿日期：2019-03-18）