陳捷 韋劍洪 方小武 霍駿業(yè)
精液由精子細(xì)胞和基質(zhì)精漿共同組成。精漿中富含精子活動(dòng)需求的蛋白質(zhì)和各種營養(yǎng)物質(zhì),能夠?yàn)榫踊顒?dòng)提供穩(wěn)定的環(huán)境,還可作為運(yùn)輸精子到達(dá)女性生殖道的載體[1-2]。大量研究結(jié)果表明[3-7],精漿中可能含有男性不育及男性生殖系統(tǒng)疾病的生物標(biāo)志物,在診斷和治療男性不育及生殖系統(tǒng)疾病中具有重要的使用價(jià)值。已有研究對(duì)26 種精漿中生化指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè),并且檢測(cè)血清中26 種生化指標(biāo)的含量進(jìn)行對(duì)比分析,結(jié)果表明在血清中無法檢出前白蛋白,而其余25 種均可檢出[8]。但現(xiàn)階段關(guān)于上述指標(biāo)與男性生育能力相關(guān)性的研究報(bào)道較少,因此,本研究對(duì)24 種精漿生化指標(biāo)與精子參數(shù)之間的相關(guān)性進(jìn)行分析,為臨床診斷和指標(biāo)提供一定的參考依據(jù)?,F(xiàn)報(bào)道如下。
總蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)乳酸脫氫酶(LDH)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)及腺苷脫氨酶(ADA)等24 種精漿生化指標(biāo)試劑盒均購自于傷害執(zhí)誠生物科技股份有限公司。本研究中全自動(dòng)生化分析儀為日本Olympus AU400,電解質(zhì)分析儀偉南京攀事達(dá)電子儀器有限公司生產(chǎn)的PSD-16a。
精漿樣本來源于我院生殖遺傳實(shí)驗(yàn)室?;颊呔鶠榍皝砦以壕驮\的無其他疾病且不育超過1 年的男性不育患者60 例,年齡為25~32 歲,禁欲2~7 d 后留取精液樣本。精液液化后采用CASA 系統(tǒng)對(duì)精液進(jìn)行常規(guī)參數(shù)分析,并嚴(yán)格準(zhǔn)守WHO 5 對(duì)精液量、精子活動(dòng)率及前向運(yùn)動(dòng)精子百分率(PR)等參數(shù)進(jìn)行分析。隨后,在使用12 000 g 離心機(jī)離心5 min,留取上層精漿進(jìn)行生化指標(biāo)檢測(cè)。
精漿檢測(cè)前對(duì)所使用的樣本和儀器進(jìn)行定標(biāo)和質(zhì)控檢測(cè),檢測(cè)合格后將精漿樣本置入全自動(dòng)生化分析儀上進(jìn)行檢測(cè),鉀、鈉及氯檢測(cè)采用電解質(zhì)測(cè)定。對(duì)超出檢測(cè)限的樣本稀釋后重新測(cè)定,精漿中的LDH、CK、αHBDH、K+、Ca2+及Mg2+樣本稀釋5倍后上機(jī)檢測(cè),精漿中的GGT 和P 樣本稀釋25 倍后上機(jī)檢測(cè)。LDH、CK、αHBDH、Ca2+、Mg2+、GGT 和P 采用生理鹽水進(jìn)行稀釋,K+采用去離子水進(jìn)行稀釋。
本研究采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理分析,精漿中生化指標(biāo)以()表示,以t檢驗(yàn)分析;對(duì)精漿中生化指標(biāo)進(jìn)行K-S檢驗(yàn)是否符合正態(tài)性分布,符合正態(tài)性分布采用Pearson 分析,不符合正態(tài)分布資料采用Spearman's rho 分析。當(dāng)P<0.05 時(shí)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
60 例患者精液常規(guī)參數(shù)和24 種精漿生化指標(biāo)結(jié)果見表1。
相關(guān)性分析結(jié)果表明,精漿蛋白含量包含TP、Alb 及Glb 均與精子濃度呈顯著正相關(guān)關(guān)系,并且精漿Alb 含量與精子總數(shù)也呈顯著正相關(guān)關(guān)系;精漿AST、LDH 活性與精子濃度和精子總數(shù)呈顯著正相關(guān)關(guān)系,但精漿AKP 活性與精液量呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系,與精子活動(dòng)率呈顯著正相關(guān)關(guān)系。精漿αHBDH 活性與精子濃度和精子總數(shù)呈顯著正相關(guān)關(guān)系,UN 與精液量呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系,Cr 與精液量、精子濃度和精子總數(shù)呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系;精漿Glu含量與精子濃度和精子總數(shù)呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系;精漿TG 與精液量呈顯著正相關(guān)關(guān)系,與精子活動(dòng)率呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系;精漿氯與精液量呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系。結(jié)果見表2。
表1 60 例生育力低下男性精液常規(guī)參數(shù)和精漿生化指標(biāo)結(jié)果(n =60,)
表1 60 例生育力低下男性精液常規(guī)參數(shù)和精漿生化指標(biāo)結(jié)果(n =60,)
表2 精漿生化指標(biāo)與精液常規(guī)參數(shù)相關(guān)性分析(n =60)
精漿中含有大量與精子活性有關(guān)的物質(zhì)。精漿中富含以Glb為主的蛋白質(zhì),并且精漿中TP、Alb 及Glb 與精子濃度具有正相關(guān)關(guān)系。以往大量研究對(duì)Alb 的研究較多[9-11],但對(duì)于精漿中占據(jù)多數(shù)的Glb 的相關(guān)研究較少,因此進(jìn)一步研究Glb 在明確其對(duì)男性生殖系統(tǒng)作用具有重要意義。同時(shí),因精漿中含有大量的酶,精漿中ALT、AST、AKP 以及LDH 等酶的活性與血清中相比明顯升高。但上述酶中僅有αHBDH、AST 和LDH 與精子濃度及精子總數(shù)呈正相關(guān)關(guān)系,其中αHBDH 與精子濃度及精子總數(shù)相關(guān)性最好。有研究認(rèn)為[12-14],精漿中的酶存在方式與精子相類似,則表明精漿中酶與精子正常生理代謝活動(dòng)具有重要作用。一般認(rèn)為,精漿中高水平的AST 和ALT 不利于精子的正常生理活性[15-17],但在本研究中發(fā)現(xiàn),高水平AST 對(duì)精子發(fā)生具有促進(jìn)作用,但ALT未發(fā)現(xiàn)此種作用。且在本研究中還發(fā)現(xiàn)LDH 與精子濃度和精子總數(shù)具有正相關(guān)關(guān)系,說明LDN 在精子供能中具有重要作用;在本研究中發(fā)現(xiàn)精漿αHBDH 活性與精子濃度和精子總數(shù)呈正相關(guān)關(guān)系,但尚未有研究報(bào)道,因此其在精子發(fā)生或代謝中的作用還需進(jìn)一步的研究。本研究顯示,精漿AKP 活性與精液量呈負(fù)相關(guān)關(guān)系,與精子活動(dòng)率呈正相關(guān)關(guān)系;UN 與精液量呈負(fù)相關(guān)關(guān)系,Cr與精液量、精子濃度和精子總數(shù)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系;精漿Glu 含量與精子濃度和精子總數(shù)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系;精漿TG 與精液量呈正相關(guān)關(guān)系,與精子活動(dòng)率呈負(fù)相關(guān)關(guān)系;精漿氯與精液量呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。雖然在本研究中上述部分指標(biāo)已有研究證實(shí)與精子活力或代謝相關(guān),但是其具體作用機(jī)制及是否存在其他功能還需進(jìn)一步的研究明確。
綜上所述,24 種精漿生化指標(biāo)中大多數(shù)與精液參數(shù)具有密切相關(guān)性,則說明這些成分在精子的發(fā)生、成熟及生理代謝過程具有一定作用。