付瑜,王永紅,康世平,張萌萌
(陜西中煙工業(yè)有限責(zé)任公司,陜西西安 710065)
絞股藍(lán)(Gynostemma pentaphyllum Makin)是葫蘆科絞股藍(lán)屬的多年生草質(zhì)藤本植物[1-3],其主要有效成分為絞股藍(lán)皂苷,能夠降血脂、降膽固醇、增強(qiáng)冠狀動脈和腦血流量,提高機(jī)體免疫功能,是一種新的藥食兩用植物資源。
吸煙已成為人們普遍重視的社會問題,很多煙草工作者嘗試將一些對人體有益的中草藥活性成分加入卷煙中,能夠降低有害物質(zhì)的生成,從而降低因吸煙而引起的不適和危害[4-6]。所以,考察其有效成分在試制卷煙主流煙氣中的轉(zhuǎn)移率是很有意義的。
絞股藍(lán),購于安康市平利縣;RM20/CS轉(zhuǎn)盤式吸煙機(jī)(德國Borgwaldt公司);RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮);Re皂苷標(biāo)準(zhǔn)品(上海安普);D101大孔樹脂;5%香草醛-冰乙酸(分析純,國藥);75%乙醇(分析純,國藥)。
1.2.1 試制卷煙煙氣捕集及前處理
選取添加了絞股藍(lán)或絞股藍(lán)皂苷的煙支作為實(shí)驗(yàn)卷煙樣品;煙支經(jīng)吸煙機(jī)燃吸后利用92 mm劍橋?yàn)V片捕集煙氣,將濾片置于250 mL錐形瓶內(nèi),加入100 mL水超聲萃取30 min,取出后備用。
1.2.2 層析柱分離方法
用10 mL的注射器作為層析管,填入高度3 cm左右的D101大孔樹脂和1 cm的中性氧化鋁。用75%乙醇溶液和5 mL水洗柱后,加入1.0 mL樣品處理液,用25 mL的水和75%乙醇溶液洗脫皂苷,將流出液收集于蒸發(fā)皿中,置于60 ℃的水浴中揮干,待顯色。
1.2.3 顯色方法
利用高氯酸將皂苷的酚羥基氧化為羧基,所生成的共軛雙鍵系統(tǒng),在酸的作用下顯色,于560 nm處存在最大吸收。在蒸發(fā)皿中依次加入0.2 mL 5%的香草醛冰乙酸溶液和0.8 mL高氯酸,混勻后移入5 mL具塞試管中,水浴加熱,冰水冷卻后,加入5 mL冰乙酸,搖勻,測定其在560 nm下的吸光度,通過比對標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到樣品中總皂苷的含量。
1.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制及檢測
配制絞股藍(lán)皂苷的標(biāo)準(zhǔn)溶液,將待測樣品溶液和對照樣品溶液依次用分光光度法進(jìn)行檢測,根據(jù)其標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中的濃度。
1.2.5 轉(zhuǎn)移率計算
準(zhǔn)確稱取0.0125 g Re皂苷標(biāo)準(zhǔn)品于5 mL容量瓶,甲醇定容,配制成濃度為2.5 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液儲備液。分別移取標(biāo)準(zhǔn)儲備液20 μL、40 μL、60 μL、80 μL、100 μL、120 μL和140 μL至10 mL具塞試管中,分別測定其在560 nm下的吸光度。
圖1 總皂苷標(biāo)準(zhǔn)曲線
如圖1所示,以吸光度作橫坐標(biāo)(X),濃度作縱坐標(biāo)(Y),得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程Y=0.419X+0.039,相關(guān)系數(shù)R為0.9970。
表1 絞股藍(lán)中總皂苷的測定結(jié)果
絞股藍(lán)總皂苷在卷煙煙氣轉(zhuǎn)移率的測定結(jié)果見表2。
表2 絞股藍(lán)卷煙煙氣總皂苷轉(zhuǎn)移率的測定結(jié)果
對絞股藍(lán)卷煙進(jìn)行煙氣實(shí)驗(yàn),測定在吸食過程中絞股藍(lán)藥物有效成分的轉(zhuǎn)移率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,七葉絞股藍(lán)中總皂苷含量大于五葉絞股藍(lán),且七葉絞股藍(lán)卷煙中煙氣皂苷含量高于五葉絞股藍(lán)卷煙。絞股藍(lán)總皂苷化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定,在煙絲燃燒過程可以轉(zhuǎn)移到煙氣中被人體吸人,從而改善卷煙產(chǎn)品品質(zhì),降低卷煙產(chǎn)品成本,豐富中式卷煙產(chǎn)品。